Clonación de genes

El proceso de clonación de genes se utiliza para localizar y copiar un gen específico de

todo el ADN de un organismo. Esta bacteria contiene un solo gen de interés (segmento
rojo) que los ingenieros genéticos quieren clonar para insertar en otro organismo. El
ADN se extrae primero de la bacteria en un tubo de ensayo. Se agrega una enzima de
restricción para cortar el ADN extraído en trozos del tamaño de un gen. En otro tubo de
ensayo, los plásmidos bacterianos extraídos se cortan usando la misma enzima de
restricción.
Luego, los plásmidos cortados se mezclan con los trozos de ADN del tamaño de un gen.
Las piezas del tamaño de un gen se unen y se unen con los plásmidos cortados para
formar plásmidos recombinantes. Algunos de los plásmidos cortados pueden unirse a sí
mismos sin una parte del ADN extraído cortado.
A continuación, se añaden las bacterias al tubo de ensayo de plásmidos recombinantes.
La electroporación usa pulsos rápidos de electricidad para crear pequeños agujeros en
las paredes celulares de las bacterias. Los plásmidos recombinantes pueden luego
ingresar a las bacterias que expresarán los genes. Las bacterias transformadas se
considerarán transgénicas. Sin embargo, no todas las bacterias tomarán un nuevo
plásmido y se convertirán en transgénicas.
Los plásmidos contienen naturalmente un gen de resistencia a los antibióticos. Por lo
tanto, las bacterias transformadas tendrán resistencia a los antibióticos.
Después de la electroporación, las bacterias se colocan en placas sobre un medio que
contiene el antibiótico.
Las bacterias que no se han transformado no tendrán resistencia a los antibióticos y
morirán. Las bacterias que se han transformado con el plásmido crecerán y se
multiplicarán en colonias que son visibles a simple vista.
Los organismos tienen miles de genes. Pueden ser necesarios cientos de placas de Petri
de bacterias para clonar todos estos genes. Esta colección se llama biblioteca genética.
Luego, el ingeniero genético debe encontrar qué colonia de bacterias se ha transformado
con el gen de interés.
Luego, la colonia se transfiere a una placa de Petri separada. Se le permite multiplicarse
en una gran colonia con cientos de copias del gen de interés.