Tema 18 y 22: Ingeniería Genética y biotecnología

La biotecnología es el conjunto de técnicas mediante las que se obtienen productos útiles para
las personas a partir de seres vivos o de sus productos

La ingeniería genética es una rama moderna de la biotecnología que consiste en usar diversas
técnicas para manipular el ADN de los organismos, mediante la transferencia de ADN de unos
organismos a otros.

1. Ingenieria genética

Conjunto de técnicas que permiten manipular y transferir material genético de un organismo a

otro. De este modo se obtienen organismos genéticamente modificados (OGM o transgénicos

La técnica comienza por la obtención del fragmento de ADN que interesa, llamado ADN pasajero
o extraño, para posteriormente introducirlo en otra célula, que puede ser o no de otra especie.
Así se obtienen organismos transgénicos. Los más frecuentes, dada su mayor facilidad de
elaboración son los organismos unicelulares, como levaduras y bacterias, pero también hay
plantas y animales transgénico

1.1. Tecnología ADN recombinante

ADN RECOMBINANTE: aquel formado por ADN de diferentes organismos.

Necesita:

Enzimas de restricción (endonucleasas de restricción):

- Cortan fragmentos de ADN por determinados pares de bases que reconocen

específicamente.

ADN ligasas: unen los fragmentos de ADN

Vector de clonación: molécula de ADN donde se inserta el ADN de interés. Suele ser un plásmido
bacteriano que al final se llama plásmido RECOMBINANTE.

Microorganismo para copiar el plásmido recombinante (clonación). Suelen emplearse bacte rias.

- Enzimas de restricción

El desarrollo de la ingeniería genética se inicia con el descubrimiento de las enzimas de

restricción.

Son un grupo de enzimas endonucleasas de diversas especies de bacterias, que destruyen los
ADN víricos que pueden entrar en estos organismos, para lo que realizan cortes en el ADN
extraño.

Estas enzimas, una vez extraídas de los organismos, y purificadas, son herramientas utilizadas
para cortar las moléculas de ADN.

CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

Cada una de ellas corta el ADN siempre en un mismo punto de la secuencia de nucleótidos, una
secuencia entre 4 y 8 pares de nucleótidos denominada sitio de restricción.

El sitio de restricción es palindrómico, es decir, la secuencia es idéntica si se lee en una dirección

o en la contraria.
Al cortar la doble hélice, estas enzimas dejan en los extremos secuencias de una sola hebra,
llamados extremos cohesivos o pegajosos, porque tienden a aparearse nuevamente

Cualquier extremo generado por una enzima de restricción determinada, se hibrida con otro
extremo generado por la misma enzima.

INSERCCIÓN DE UN ADN PASAJERO EN OTRA MOLÉCULA DE ADN

Para insertar un ADN pasajero en el seno de un ADN receptor se han

de cortar ambos con la misma enzima de restricción . De este modo,
las bases nitrogenadas de los extremos cohesivos de ambos tienden
a unirse.

Es necesaria la presencia de la enzima ADN ligasa, para que una los

extremos de los ADN entre sí y obtener un ADN recombinante.

AMPLIFICACIÓN DEL ADN RECOMBINANTE

Las moléculas de ADN recombinante contienen

- Vector: fragmentos de ADN que permiten la transferencia de genes de un organismo a

otros (permiten introducir el material genético de interés una célula). Los más utilizados
son los plásmidos y los virus.
- Gen o genes de interés: Una molécula de ADN recombinante, o cualquier fragmento de
ADN de interés, puede someterse a clonación para aumentar el número de copias.
- Las dos técnicas principales de amplificación son: Clonación bacteriana y PCR (del inglés
Polimerase Chain Reaction)
1.2. Clonacion bacteriana

Consiste en la introducción del gen o genes que se quieren amplificar en el interior de una
bacteria.

El fragmento de ADN se une a un vector, normalmente un plásmido, éste plásmido se coloca en

el medio de cultivo de bacterias, y éstas lo incorporan espontáneamente por transformación
(parasexualidad)

El plásmido se replica en el interior de la bacteria, y cuando esta se divide, alguna de la copias

pasan a las hijas, de manera que en poco tiempo se originan miles de bacterias que contienen
el gen.

Otra aplicación, además de conseguir copias de un gen, es cultivar dichas bacterias y, así,
conseguir que fabriquen la proteína codificada por dicho gen en cantidades económicamente
rentables. Ejemplos: insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulación, etc

RESUMEN

1. Con el uso de enzimas de restricción se aísla el gen de interés y se corta el vector (plásmido
bacteriano).
2. Con las ligasas se unen el gen de interés y el plásmido, formado el ADN recombinante.
3. Se introduce el ADN recombinante en las células receptoras (bacterias).
4. Por replicación en las células, se obtienen copias del ADN recombinante.
5. Por transcripción y traducción se obtienen las proteínas de interés en gran cantidad.
1.3. PCR REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
Método de obtener múltiples copias de un
fragmento de ADN a partir de una muestra.
Necesario conocer los primeros nucleótidos de
los extremos. Elementos: ADN de interés,
Cebadores (primers), Desoxirribonucleótidos,
ADN polimerasa resistente a altas
temperaturas (Taq polimerasa): aislada de la
bacteria Thermus aquaticus y una Máquina que
se programa por ciclos: termociclador
Pasos: 1º desaturalización 95°: el ADN se desnaturaliza y se abren las cadena, y
cada hebra sirve de como molde para sintetizar otra cadena complementarria
2º hibridación (anillamiento) 55 °: se unen los primers.
3º síntesis de ADN 72 °: la polimerasa copia. Nº copias = 2n n= nº ciclos -2
2. Aplicaciones de la ingeniería genética
1. Aplicaciones Médicas:
Obtención de proteínas para tratamiento de enfermedades: Insulina, hormona de
crecimiento, factores de coagulación, enzimas, antibióticos
Obtención de vacunas
Terapia génica: uso de genes como medicamentos al transferir a células somáticas
específicas un gen funcional que sustituya a uno defectuoso.
2. Agricultura y ganadería:
Obtención de plantas y animales transgénicos con resistencia a plagas, insecticidas, al frío,
enriquecidos en algún nutriente… Aquellos en los que se ha insertado algún gen, procedente
de otro organismo. Empleamos técnicas PCR y ADN recombinante para obtenerlos
3. Mejora del medio ambiente y biorremediación:
Obtención de microorganismos transgénicos que degradan contaminantes como los
hidrocarburos.
Plantas transgénicas (fitorremediación) para descontaminación de suelos (metales pesados)
GENÓMICA: se encarga de conocer el genoma humano y el de otras especies: localización de
genes en los cromosomas y secuencia de nucleótidos. Proyecto genoma humano (año 2003)
Aplicaciones: terapia génica medicina personalizada (chips de ADN: análisis genéticos sobre
miles de genes simultáneamente.)
- Proyecto genoma Humano: El proyecto genoma humano incluye una serie de iniciativas
destinadas a conocer los genes contenidos en los 23 cromosomas humanos (su
localización, su secuenciación y la función que desempeñan)
- Conclusiones del PGH: El genoma humano contiene alrededor de 25.000 genes
codificadores de proteínas, lo que representa un 3% del total, es decir, la mayoría de los
genes tienen otras funciones. El resto del ADN (mal denominado ADN basura), cumple
funciones todavía no bien conocidas, pero sin duda importantes
PROTEÓMICA: estudio del proteoma, que es el conjunto de proteínas de un organismo, tipo
celular u orgánulo, a partir de los genes que contiene. Aplicaciones: diagnóstico e investigación
médica humana, farmacología
3. Biotecnologia
Conjunto de técnicas que utilizan las potencialidades de los
organismos vivos o de compuestos procedentes de ellos, para la
obtención de productos, bienes y servicios.
Tiene aplicaciones en la industria alimentaria, farmacéutica, agropecuaria, medio ambiente y
medicina.
3.1. Biotecnolofia industrial
INDUSTRIA ALIMENTARIA: Se emplea la capacidad fermentativa de muchos microorganismos
para conseguir alimentos. Las fermentaciones se llevan a cabo en fermentadores, y los
principales productos que se obtienen son: etanol (fermentación alcohólica) , ácido láctico
(fermentación láctica) y ácido acético (fermentación acética

ELABORACIÓN DEL VINO: Fermentación alcohólica de los azúcares presentes en el zumo de uva
(glucosa y fructosa). Da como resultado etanol y CO2. Realizada por las levaduras:
Saccharomyces cerevisiae y otras

ELABORACIÓN DE LA CERVEZA: Se elabora por la fermentación alcohólica de los cereales, el más

empleado es la cebada. Saccharomyces cerevisiae, S.calsbergiensis

FABRICACIÓN DE VINAGRE: Producción de ácido acético a partir de etanol (vino, sidra…) en un

proceso de respiración aeróbica llevado a cabo por las bacterias acéticas como Acetobacter y
Gluconobacter. Es una reacción que requiere oxígeno, de modo que no se trata de una
verdadera fermentación, sino de una respiración incompleta, pero como se realiza
a nivel industrial en fermentadores, también se llama fermentación.

ELABORACIÓN DEL PAN: Fermentación alcohólica de la harina del cereal. Realizada

Saccharomyces cerevisiae. Se añade una pequeña cantidad de levadura a una mezcla de harina
de cereales, agua, sal y azúcar.

ELABORACIÓN DEL QUESO: El queso y el yogurt se obtienen por fermentación láctica de los
glúcidos sencillos de la leche, que pasan a ácido láctico. Producida por las bacterias Lactobacillus
y Lactococcus, que se encuentran de forma natural en la leche sin e sterilizar.

INDUSTRIA QUÍMICA Los microorganismos intervienen en la producción industrial de algunos

productos químicos como ácidos orgánicos (ácido cítrico, ácido glucónico…), disolventes,
conservantes, colorantes, etc…

INDUSTRIA FAMACÉUTICA: Producción de vacunas: Vacunas de microorganismos vivos

atenuados, Vacunas de organismos inactivados (muertos por la acción del formaldehído u otras
sustancias), Toxoides para la inactivación de toxinas microbianas, pero que conserva su
capacidad para provocar respuesta inmune y Vacunas recombinantes, obtenidas por ingeniería
genética. También se encarga de la Producción de antibióticos, con Hongos: genero Penicillium
(se conocen más de 800 antibióticos producidos por este género) y Bacterias: géneros Bacillus y
Streptomyces. Y la producción de vitaminas, aminoácidos y enzimas.

3.2. BIOTECNOLOGÍA APLICADA A LA AGRICULTURA

Plantas transgénicas y microorganismos (Ingeniería genética): Plantas modificadas

genéticamente. Una de las estrategias utilizadas es la introducción de un plásmido, procedente
de la bacteria Agrobacterium tumefaciens, que puede clonarse con los genes de interés.
Producción de biofertilizantes, los fertilizantes utilizados en agricultura contienen nitratos. Las
bacterias fijadoras de nitrógeno (Azotobacter, Rhizobium) pueden utilizarse como
biofertilizantes.

Producción de insecticidas biológicos, Bacillus thuringiensis produce una proteína no tóxica para
los animales que actúa como un insecticida natural. Las larvas de los insectos ingieren las
bacterias y sus esporas y ocasionan daños irreversibles y la muerte de las larvas. El bioinsecticida
Bt, procedente de esta bacteria, se fabrica industrialmente.

3.3. BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL Entre las principales aplicaciones de la biotecnología a la

protección de medio ambiente destacan:
- Biorremediación: Proceso que utiliza microorganismos, plantas o enzimas derivadas de ellos,
para retornar un medio ambiente alterado por contaminantes, a su condición natural.
Estos seres vivos han diversificado de tal modo su metabolismo que cualquier sustancia
orgánica o inorgánica puede ser utilizada como nutriente por alguno de ellos
Ejemplos: Biodegradación: degradación de sustancias contaminantes por la acción de
organismos vivos. (La ingeniería genética ha permitido obtener cepas capaces de degradar
este tipo de compuestos de manera más eficaz) Ejemplo: bacterias (Pseudomonas
modificada genéticamente) que degradan productos derivados del petróleo
Bioadsorción: Inmovilización de contaminantes por la adsorción de estos a las estructuras
externas como pareces celulares o cápsulas (hongos
- Producción de productos biodegradables: Determinados microorganismos fabrican, como
sustancia de reserva, polímeros biodegradables. Esta propiedad permite la producción de
bioplásticos y espumas de poliuterano, que constituyen una alternativa a la contaminación
producida por la fabricación y acumulación de plástico
- Eliminación de residuos: Depuración biológica de aguas residuales, que se realiza a partir de
bacterias y algas.
Compostaje: Fermentación por microorganismos de residuos sólidos orgánicos y de los
fangos de las depuradoras para obtener un material rico en nitrógeno usado como abono en
la agricultura
- Depuración de aguas residuales