ESPECTROFOTÓMETRO

Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en función de la
longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de
radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. También se utiliza en
laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.

MANEJO
1. Encender el espectrofotómetro antes de realizar la prueba teniendo en cuenta el tiempo de termostatización
recomendado por el fabricante.
2. Seleccionar la longitud de onda de trabajo. Si tiene un fotocolorímetro seleccione el filtro más próximo a la
longitud de onda indicada.
3. Seleccionar la temperatura de trabajo.
4. Elegir una cubeta en buen estado (sin deformaciones ni suciedad)
5. Llevar a cero de absorbancia con agua destilada.
6. Vaciar la cubeta y enjuagarla con una pequeña porción de la solución a medir para evitar arrastre.
7. Cargar la cubeta con la solución y leer la absorbancia por duplicado informando la absorbencia promedio.
8. Si se debe medir más de una solución, enjuagar la cubeta con una porción de la solución antes de medir y
leer como en el paso 7. Tener la precaución de empezar siempre por la solución más diluida.

CUIDADOS

1. Limpieza de la superficie del instrumento

2. Limpieza de los filtros y fuentes de luz
3. Verificar las instalaciones eléctricas
4. Asegurarse de que las cubetas estén limpias y sin ralladuras, sin huellas digitales. Esto es cada vez que se
utilice.

PARTES
Fuente de luz: La fuente de luz que ilumina la muestra debe
cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad,
direccionalidad, distribución de energía espectral continua y
larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio
(también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y
lámpara de deuterio que se utilizan en los laboratorios
atómicos.
Monocromador: El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan
desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática. Esta constituido por las rendijas de entrada y
salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es
un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa
todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz
hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra: Es donde tiene lugar la interacción con la materia (debe producirse donde no haya
absorción ni dispersión de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica
la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, con base en sus leyes de absorción, en lo que concierne al
paso de la molécula de fundamental-excitado.
Detector: El detector, es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio.
Hay de dos tipos:
a) los que responden a fotones;
b) los que responden al calor.
Foto detectores: En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotos detectores para percibir la
señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de
medida, y minimiza las partes móviles del equipo.
Celdas: Celdas de espectrofotometría. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz
ultravioleta; en segundo plano, de plástico, para colorimetría (es decir, empleando luz visible).
Son los recipientes donde se depositan las muestras líquidas a analizar. El material del cual están hechas varía
de acuerdo a la región que se esté trabajando; son de vidrio o plástico si se trabaja en la región visible, de
cuarzo si se trabaja en la ultravioleta y de NaCl si se trabaja la región de infrarrojo. Se caracterizan por tener
dos paredes correspondientes a los lados ópticos por donde cruza el haz de luz.