UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MÉXICO-CAMPUS LOMAS VERDES

Cultivo, Identificación, Preparación, Extracción Y Purificación De Penicillium

Chrysogenum.
Delgadillo Pérez Ivan Ricardo
Asignatura: Síntesis de compuestos heterocíclicos
Licenciatura QFBT
Periodo 2020 -1

RESUMEN: En esta práctica se realizaría la síntesis y el cultivo de una cepa de

Penicillium Chrysogenum para su posterior tratamiento químico para llegar a
penicilina , se realizo una investigación bibliográfica para generar una diapositiva
que explique los conceptos dados en los objetivos.

Palabras clave: síntesis, teórica, practica, penicillium

OBJETIVOS

a) Aplica las técnicas de aislamiento y cultivo de microorganismos específicos.

b) Extrae de una fuente natural, y cultiva Penicillium chrysogenum de acuerdo con

las indicaciones del proveedor del medio de cultivo Sabouraud, controlando las
condiciones fisicoquímicas para el crecimiento óptimo de este hongo, con el
propósito de iniciar el proceso de purificación de este cultivo.

c) Aplica la técnica de microcultivo y la tinción específica para identificar a

Penicillium chrysogenum, con la finalidad de aplicar un método particular de
identificación de hongos con uso farmacéutico.

d) Prepara el caldo de fermentación de Penicillium chrysogenum mediante la

combinación de sustancias y bioelementos fundamentales, controlando las
condiciones fisicoquímicas para el crecimiento óptimo de este hongo, con el
propósito de caracterizar una forma industrial a escala de este proceso.

e) Realiza la extracción orgánica de penicilina a partir del medio de inoculación en

donde se encuentra este metabolito, mediante la adición de compuestos orgánicos
que provoquen su precipitación ácida, con la finalidad de aplicar una técnica de
extracción industrial.
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INVESTIGACION PREVIA
Penicillium chrysogenum Se
reproduce asexualmente mediante
conidias (esporas asexuales) que se
producen en los conidióforos. Estos
son erectos y con paredes delgadas,
con pocas fiálides (células
productoras de las conidias).
La especie es saprófita. Tiene la
capacidad de producir enzimas
digestivas que son liberadas sobre la
materia orgánica. Estas enzimas
degradan el sustrato,
descomponiendo compuestos
carbonados complejos.
Posteriormente, los compuestos más
simples son liberados y pueden ser
absorbidos por las hifas. Los
nutrientes que no son consumidos, se
acumulan como glicógeno.
El hongo presenta micelios
filamentosos. Las hifas son septadas,
lo que es característico de los
Ascomycota.
Los conidióforos son terverticilados
(con ramificaciones abundantes).
Estos son delgados y de paredes lisas,
midiendo de 250-500 µm.
Las colonias en los medios de cultivo
crecen muy rápidamente. Son de
aspecto aterciopelado hasta
algodonoso, con los micelios blancos
en los márgenes. Las colonias son de
color verde azulado y producen un
exudado abundante de color amarillo
brillante.
Se presentan aromas afrutados en las
colonias, semejantes a la piña. Sin
embargo, en algunas razas el olor no
es muy marcado.
La ruta de biosíntesis de la penicilina
por P. chrysogenum es un proceso
que consta de tres etapas
diferenciales.
La primera de ellas consiste en la
unión secuencial de los aminoácidos
L-a-aminoadípico, L-cisteína y L-
valina para formar el tripéptido lineal
&-(L-a-aminoadipil)-L-cisteinil-D-
valina (ACV).
La biosíntesis "in vitro" del tripéptido
ACV se lleva a cabo mediante la
activación de cada aminoácido con el
concurso de ATP e iones magnesio.
La reacción está catalizada por la
enzima ACV sintetasa, una proteína
de alto peso molecular cuyas
características enzimáticas aún no
están completamente establecidas.
El siguiente paso de la ruta biosintética
de la penicilina consiste en la ciclacion
del tripéptido ACV, proceso que
origina la molécula de la isopenicilina
N. La isopenicilina N es el primer
compuesto de esta ruta biosintética
que tiene actividad antibiótica. La
ciclacion del ACV es una reacción
oxidativa durante la cual se produce la
pérdida de cuatro átomos de
hidrógeno por cada molécula de
tripéptido. Como consecuencia de
esta reacción se forman dos anillos
característicos de las penicilinas: un
anillo B-lactámico y un anino
tiazolidínico.
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El proceso de ciclacion del ACV está hidrolítica frente a diversas penicilinas,

catalizado por la enzima isopenicilina liberando la cadena lateral y el núcleo
N sintasa \) o ciclasa. Las de la penicilina (6-APA).
características de esta enzima, a
diferencia de lo que ocurre con la
mencionada anteriormente, se
conocen con bastante detalle.

Hasta la fecha se han estudiado las

ciclasas de bastantes especies de
microorganismos productores de
antibióticos B-lactámicos (Penicillium,
Cephalusporium, Streptomyces) y se
han clonado los genes que codifican Imagen 1. Estructura de la penicilina
para dichas proteínas.
Metodología
La última de las etapas de la ruta de
biosíntesis de la penicilina consiste en
el intercambio de la cadena lateral de
la isopenicilina N (ácido a-
aminoadípico) por el ácido
fenilacético, molécula que se añade al
medio de cultivo en calidad de
precursor de la penicilina. La reacción
enzimática se lleva a' cabo "in vitro" en
presencia de isopenicilina N y de
fenilacetilcoenzima A (una forma
activada del ácido fenilacético). Esta
reacción está catalizada por la enzima
acir-coenzima A: isopenicilina N
aciltransferasa.

La penicilina puede ser sintetizada

asimismo por acilación directa del
ácido 6-aminopenicilánico (6-APA)
mediante el concurso de la enzima
aciltransferasa y del fenilacetil-
coenzima A La enzima aciltransferasa
es capaz de hidrolizar la isopenicilina
N, en ausencia de fenilacetil-coenzima
A, y también muestra actividad
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REFERENCIAS
http://www.scielo.org.pe/scielo.
php?script=sci_arttext&pid=S1
810634X2006000400002&lng=
es&nrm=is
Paquete, A. Leo. (2006).
FUNDAMENTOS DE QUIMICA
HETEROCICLICA. Editorial
Limusa. México.
Penieres, C. Guillermo. (2006).
MANUAL DE EXPERIMENTOS
EN QUIMICA
HETEROCICLICA. Editorial
UNAM. México.