GUIA DE LABORATORIOS

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BIOLOGIA

BACTERIAS, HONGOS, PROTOZOOS Y ALGAS

1. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA
Con esta práctica se pretende que el estudiante:
1. Adquiera algunas técnicas utilizadas para observar y estudiar microorganismos.
2. Observe algunos microorganismos presentes en aguas dulces y en medios de cultivo y aprenda algunas
diferencias morfológicas entre ellos.
3. Observe varias clases de hongos y conozca algunas de sus características.

2. MARCO TEORICO

Hay gran diversidad de formas vivas, muchas de ellas microscópicas, que fueron observadas por primera vez por
Leeuwenhoek, quien las reportó como “animálculos” (animales pequeños), lo cual se constituyó en el punto de
partida para el estudio del mundo microbiano. Posteriormente, hombres de ciencia como Pasteur, Koch,
lwanoswsky, Haeckel y otros hicieron grandes descubrimientos en este campo, y esto permitió tener un
conocimiento amplio de sus características como hábitat, morfología, fisiología y patogenicidad.

En esta práctica se observarán bacterias, hongos protozoos y algas, organismos que se clasifican dentro
de varios reinos, como aparece a continuación:

Bacterias
Reino Mónera Algas verde azules Procariotas
(cianobacterias)
Algas unicelulares y coloniales
Protozoos
Reino Protista Hongos mixomycetes Eucariotas
Reino Fungí Hongos
Algas pluricelulares
Reino Plantae Plantas

3. MATERIALES Y EQUIPOS
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EQUIPO CAPACIDAD CANTIDAD

Microscopios compuestos binoculares
Portaobjetos 1 Caja
Cubreobjetos (laminillas) 1 Caja
Goteros
Beakers o frascos pequeños con agua 250 ml 5
Toallas de papel absorbente 1 rollo
Asas de platino 5
Agujas de disección o estiletes
Lámparas de alcohol
Papel para limpiar lentes (Kleenex facial blanco)
Tela suave para limpiar el microscopio

4. REACTIVOS

SUSTANCIA CONCENTRACIÓN CANTIDAD

Aceite de inmersión 1 frasco
Muestras de aguas estancadas
Cultivos de bacterias, hongos, protozoos y algas
Lugol 1% 200 ml
Azul de metileno 1% 200 ml

5. PROCEDIMIENTO
1. Bacterias
Ponga en el portaobjeto una gota de agua. Con el asa tome una pequeña cantidad del cultivo de bacterias,
mézclela con el agua y extienda la preparación unos dos centímetros a lo largo y ancho del portaobjeto formando
una película delgada. Pásela varias veces sobre la llama de un mechero, en forma rápida, para evitar un excesivo
calentamiento. Cuando la preparación esté seca agregue azul de metileno hasta cubrir toda la muestra y deje
actuar el colorante durante un minuto. Luego elimine el exceso de colorante lavando la placa con un chorro suave
de agua, seque con un papel absorbente sin frotar la muestra y pásela nuevamente por la llama dos o tres veces.

Sin colocarle cubreobjeto, enfoque con el objetivo de 100X Esquematice lo observado con este objetivo y
compare con los dibujos de la figura 1. ¿Para qué calentó la preparación antes de colorear? ¿Qué estructuras u
organelas pudo observar en las bacterias?
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Cocos Bacilos Espirilos

Figura 1: Bacterias

2. Hongos

a. Zigomycetes

Con un estilete tome una porción muy pequeña de la masa algodonosa del hongo Rhizopus nigricans o
moho del pan de manera que incluya la menor parte posible del sustrato sobre el cual está creciendo
dicho hongo. Póngala en un portaobjeto, agregue una gota de azul de metileno y dispersa un poco la
muestra con el mismo estilete. Ponga luego el cubreobjetos y observe esporas, esporangios,
esporangióforos, estolones y rizoides.

Haga los esquemas correspondientes a lo observado en 10X y compare con el dibujo de la figura 2. ¿Las
esporas son móviles? ¿Están dentro o fuera del esporangio, es decir, son endosporas o exosporas? ¿Las
hifas son septadas?

b. Ascomycetes

• Penicíllium o Aspergillus
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Observe una de las placas preparadas que le proporcione su profesor. Compare con el dibujo
correspondiente de la figura 2 y vea qué diferencias hay en cuanto a las hifas (septadas o no septadas) y
las esporas (endosporas o exosporas) del Rhizopus.

• Levaduras

Deposite una gota del cultivo de levaduras en un portaobjeto, póngale el cubreobjetos y observe. ¿Qué
estructuras ve? Compare con las observaciones anteriores y saque conclusiones sobre el carácter
unicelular o pluricelular de este hongo. Haga un esquema de lo observado en 40X.

c. Basidiomycetes

Tome uno de los hongos llamados paraguas de sapo y observe, con ayuda del dibujo de la figura 2, las
siguientes partes: rizoides, estípite, píleo y lamelas. ¿Qué diferencias encuentra con relación a los
hongos observados anteriormente? ¿Dónde se encuentran sus esporas y qué nombre reciben?
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3. Microorganismos acuáticos

a. Protozoos de vida libre

Haga un montaje en fresco con una gota del cultivo de protozoos. Trate de identificar diferentes protozoos
mediante los dibujos de la figura 3 y los que estén disponibles en el laboratorio.
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Seleccione la muestra donde hay mayor diversidad de protozoos y prepare una nueva placa en forma
similar a la anterior pero agregándole una gota de lugol. ¿Puede ver algunas estructuras no observadas
en el primer montaje? ¿Qué pasó con la movilidad de los microorganismos? Explique.
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Figura 3: Protozoo de vida libre (no dibujadas a escala)

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Figura 4: Algas (no dibujadas a escala)

b. Algas
Haga un montaje en fresco con una gota del cultivo de algas. Trate de identificar algunas por medio de
los dibujos de la figura 4 y de otros que estén disponibles en el laboratorio. ¿Qué diferencia fundamental
encuentra en comparación con los hongos y con los protozoos? ¿Todas son pluricelulares? ¿Algunas de
ellas presenten movimiento propio?
(Nota: En las muestras de aguas que usted utilizó se podrían encontrar organismos pluricelulares como
rotíferos, nematodos, larvas de insectos, etc., los cuales no son objeto de estudio en esta práctica.)

6. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

Se deben entregar las gráficas y la respuesta las preguntas de cada ítem.

7. PREGUNTAS DE PROFUNDIZACIÓN

1. ¿Qué formas de asociación pudo observar en los cocos? ¿Qué otros tipos existen? Dé un ejemplo de
cada uno de los tipos de asociación de las bacterias.

2. Hay bacterias patógenas y bacterias no patógenas. Consulté algunos ejemplos de cada una de ellas.

3. ¿Qué diferencias hay entre una célula eucariota y una procariota? De ejemplos de cada una de ellas.

4. Algunos protozoos de vida libre, como el paramecio, poseen vacuolas contráctiles. ¿Cuál es su
función? ¿Qué les sucedería a estos microorganismos si las vacuolas contráctiles dejaran de
funcionar?

5. ¿Por qué los hongos y las algas son importantes? Cite tres razones para cada caso.

6. En general, ¿en qué consiste la fermentación?

7. Mencione algunos procesos industriales que se realizan basados en la fermentación.

8. Además de las aguas dulces, ¿en que otros medios se desarrollan las algas?

9. Ciertas algas causan perjuicios. Cite algunos ejemplos.

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10. En general, ¿cómo se nutren las algas, los hongos y las bacterias?

11. BIBLIOGRAFÍA y CIBERGRAFÍA

AUDESIRK, T.; AUDESIRK, G. y BYERS, B. Biología: la vida en la tierra. México: Thomson Editores.
20005. 1100p.

BECKER, W.; KLEINSMITH, L. y HARDIN, J. El mundo de la célula. 6 ed. España: Pearson. 2006. 970p.

COOPER¨S, GEOFFREY M., ROBERTE. HAUSMAN. La célula. 3 ed. España: Marbán. 2007. 818p.
GORDON DP. 2009. Towards a management hierarchy (classificacion) for the Cataloque of life: Draft
Discussion Document, In Species 2000 & ITIS Cataloque of life: 2009 Anunuak Checklist (Bisby FA,
Roskov YR, Orrell TM, Nicolson D, paglinawan LE, Bailly N, Kirk PM, Bourgoin T, Baillargeon G., eds)
CD-ROM; Species 2000: Reading UK.

El informe debe realizarse en formato tipo artículo, de acuerdo a la plantilla DC-LI-FR-002.

No olvide presentar todos los cálculos realizados.

Nota: Verifique siempre el estado de agregación de los reactivos y el grado de peligrosidad de

los mismos para prever las medidas de seguridad adicionales que debe cumplir.