AISLAMIENTO Y RECUENTO

DE BACTERIAS AEROBIAS

• ALVARADO MORALES KELLY

• ALVAREZ FERNANDEZ VIRIDIANA
• LEON VALVERDE MARIO SANTIAGO
OBJETIVOS
• Aprender y practicar las técnicas de aislamiento por medio de la
estría cruzada y el método de las diluciones.

• Hacer la estimación cualitativa y cuantitativa del contenido

microbiano de diferentes grupos de microorganismos de las muestras
de suelo.
INTRODUCCION

Los microorganismos generalmente se encuentran en la naturaleza

como poblaciones mixtas, y para poder caracterizar e identificar un
tipo particular de microorganismos, este debe ser aislado y conservado
como un cultivo puro o axénico
Son útiles por diferentes razones: mantienen los organismos viables, permiten hacer
sub cultivos para someterlos a diferentes análisis. Para obtenerlo es necesario recurrir
a las técnicas de aislamiento.
Para estudiar estos microorganismos particulares se debe tomar en cuenta la
naturaleza de la muestra:
- Liquida
- Sólida
 TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
Método de estría cruzada Método de diluciones
Consiste en hacer diluciones, de las cuales
• Consiste en la dilución de un cultivo
se toman alícuotas que se siembran en
mediante el estriado en la medios de cultivo solidos depositando la
superficie de un medio sólido. alícuota en la superficie y dispersándola
con una varilla de metal.
 METODOLOGÍA
I. Aislamiento de bacterias por el método de las diluciones
 METODOLOGÍA
II. Aislamiento de bacterias por el método de estría cruzada
 RESULTADOS
Dilución Número de colonias / 0.1mL Número de colonias / mL
10-10
10-9
10-8 250
10-7 -- --
10-6 -- --

1 1
𝑈𝐹𝐶 = #𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ( )( )
𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

1 1
= #𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ( )( )
𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 0.1

Mencione cuantas formas coloniales se observan en cada una de las placas utilizadas.
¿Tiene eso algún significado?
RESULTADOS

I.- Aislamiento de bacterias por el II. Aislamiento de bacterias por el

método de las diluciones método de estría cruzada
 CUESTIONARIO
1. ¿Por qué el método de las diluciones es cualitativo y cuantitativo?
R= Cualitativo: Diferencia las características morfológicas y de
crecimiento de la colonia
Cuantitativo: Permite conocer el número de microorganismos
existentes en un medio
2. ¿Por qué es importante el método de la estría cruzada para verificar la
pureza de un cultivo?
R= Ayuda a separar microorganismos, al obtener colonias aisladas y así
observar sus características morfológicas con más detalle, logrando
identificar una mayor cantidad de ellas
3. Mencione dos técnicas de enriquecimiento físicas y dos químicas para
microorganismos que estén en baja concentración en una muestra.
R= Físicas: Temperatura y presión
Químicas: pH y nutrientes del medio
4. Si como se menciona en la introducción, el oxígeno molecular es un
agente oxidante muy tóxico, ¿Cómo es que los organismos aerotolerantes lo
soportan a concentraciones tan altas como la atmosférica del 21%?
R= Poseen Los microorganismos aerotolerantes pueden carecer de la
enzima Catalasa. Pero la mayoría tienen SOD (factores de virulencia
en anaerobios), ya que estas enzimas permitirán la sobrevida de las
bacterias en tejidos oxigenados hasta que el consumo de O2
determine el ambiente adecuado para el desarrollo.
5. ¿Por qué las cajas de Petri con un medio de cultivo sólido deben incubarse
con la tapa abajo?
R= Para evitar que el agua condensada que se produce dentro de la
caja caiga dentro de ella y contaminen el cultivo de nuestra muestra.
 CONCLUSIONES
• Esta practica nos fue de utilidad para practicar los métodos de diluciones y
estría cruzada para el aislamiento de bacterias
• El método de las diluciones es un método cualitativo y cuantitativo, pues
además de mostrarnos las características de la morfología colonial, también
nos permite contar el numero de colonias que se obtienen por muestra.
• El método de estría cruzada es un método cualitativo de aislamiento de
bacterias, es muy sencillo y requiere menos tiempo
• Se cuantificaron un total de 250 UFC por
 BIBLIOGRAFÍA
• Brock T. D. Microbiología. 1987. 4ta Ed. Editorial Prentice-Hall
Hispanoamericana. Pag 12-14
• Jawetz E., Melnick J., Adelberg A. E. Microbiología médica. 1979. 8va
Edición. Editorial el manual moderno S.A.. Pag 78-84
• Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case. Introducción a la
microbiología. 9a Edición. EE.UU. Editorial Panamericana.2007. p 160 –
170.