DETERMINACIN DE UNA CONCENTRACIN A PARTIR DE LA

CUANTIFICACIN COLORIMTRICA.

DETERMINATION OF A CONCENTRATION FROM THE COLORIMETRIC

QUANTITATION

1
Departamento de Qumica. Facultad de Qumica. Universidad Nacional de Colombia, Bogot,
D.C., Colombia
2
Departamento de Ingeniera Qumica y ambiental. Facultad de Ingeniera. Universidad Nacional
de Colombia, Bogot, D.C., Colombia

RESUMEN

El presente artculo describe el proceso por el cual se hall la concentracin desconocida de una
disolucin de azul de metileno empleando como base terica la ley de Beer-Lambert. En la fase
experimental se dispuso de un espectrofotmetro marca thermo scientific genesys 20 el cual
registr que la solucin problema tuvo mayor absorbancia (0,423) a una longitud de onda () de
660 nm, por consiguiente se compar la absorbancia de siete soluciones con concentraciones
desde 1.3 hasta 20 ppm a esta longitud de onda y se confronto con la absorbancia de la solucin
problema anteriormente descrita determinando que la concentracin enigma fue de 3.65 ppm.

Palabras claves: concentracin, longitud de onda, absorbancia

ABSTRACT

This article describes the process through which we could find out the unknown concentration of
a solution of methylene blue, it was found as a theoretical basis using the Beer-Lambert law. In
the experimental phase was dispose a spectrophotometer brand thermo scientific genesys 20
which showed that the test solution had higher absorbance (0.423) at a wavelength () 660nm,
therefore the absorbance of seven solutions was compared with concentrations since 1.3 to
20ppm and wavelength and this is comparison with the absorbance of the test solution described
above, determining the unknown concentration was 3.65 ppm.

Keywords: Concentration, wavelength, absorbance

1
1. INTRODUCCIN

La colorimetra es un mtodo muy usado a nivel industrial y en la parte de anlisis de laboratorios

bioqumicos, esto debido a la informacin cuantitativa y cualitativa que esta puede ofrecer. Se
basa en la intensidad del color de las soluciones, que es una propiedad de las mismas.

El mtodo de la colorimetra tiene como objetivo determinar la concentracin del analito en la

solucin estudiada, para este fin el colormetro pasa un haz de luz monocromtica, a travs de la
muestra, a mayor intensidad de color, la absorbancia ser mayor, esto debido a que se relaciona
mayor intensidad de color, con mayor con concentracin, as pues a mayor intensidad de color,
mayor ser la cantidad de luz absorbida por la solucin. Sin embargo, para un resultado
apropiado, este mtodo requiere de la realizacin de dos curvas, la curva espectral, que determina
longitud de onda ms apropiada para el experimento, y la curva de calibracin, la cual va a
permitir finalmente determinar la concentracin aproximada del analito presente en la solucin.
Este mtodo tiene como base terica la ley de Beer-Lambert, la cual se expresa a continuacin:

= (1)

Donde A es la absorbancia, la absortividad molar, C la concentracin de la muestra y b el

camino ptico.

Para poder desarrollar este mtodo solo se puede emplear soluciones de baja concentracin, si se
utilizan soluciones con alta concentracin es necesario diluirlas o de lo contrario el haz de luz
quedar totalmente retenido en la solucin. [2]

2. PARTE EXPERIMENTAL

Para el desarrollo de esta prctica se parti de una disolucin problema de azul de metileno con
concentracin desconocida y una solucin stock con concentracin de 20 ppm.

2.1. Determinacin curva espectral disolucin problema

Se realiz una grfica que exhibi la variabilidad de la absorbancia de una disolucin de azul de
metileno con concentracin desconocida a diferentes longitudes de onda (entre 300 hasta 700
nm); para ello se emple un espectrofotmetro marca Thermo scientific 20 con capacidad de una
nica celda de 1 cm de ancho la cual se llen hasta partes con la sustancia problema; en
primera instancia se ajust el 0 de absorbancia con agua destilada (el solvente menos el analito)
y luego se procedi a registrar las medidas reportadas por el dispositivo.

2.2. Preparacin de soluciones estndar para la curva de calibracin

2
Para la preparacin de las soluciones a diferentes concentraciones, utilizadas para la curva de
calibracin se hizo uso de la siguiente ecuacin:

= (2) [1]

Donde Vi era el volumen inicial de la alcuota, Ci, la concentracin inicial, y Vf, el volumen final
de la dilucin y Cf la concentracin deseada.

Haciendo uso de la ecuacin (2), se realizaron cuatro diluciones seriadas, iniciando de una
disolucin con concentracin de 20 ppm y utilizando un factor de dilucin de , con ello se
obtuvieron cuatro soluciones de 10 , 5, 1.5 y 1.3 ppm. Posteriormente se realizaron dos diluciones
ms: una con factor de dilucin 4/5 iniciando de la solucin con concentracin de 20 ppm dando
como resultado una solucin de 16 ppm y finalmente se diluy esta ltima con un factor de
dilucin de .

A continuacin se determin la absorbancia con el espectrofotmetro de cada sustancia a la

longitud de onda a la que la disolucin problema present mayor absorbancia (660nm). Con los
datos registrados se desarroll una grfica que evidenci la relacin entre absorbancia y
concentracin.

2.3. Determinacin de la concentracin de la muestra problema

Se compararon las dos grficas y se interpolo la absorbancia de la disolucin problema en la

curva espectral de las diluciones. Adems se calcul matemticamente empleando la ecuacin de
la recta y reemplazando la variable de absorbancia.

2.4 Determinacin absortividad

Se calcul la absortividad del azul de metileno usando la ecuacin de Beer- Lambert (ecuacin
1) y reemplazando las variables obtenidas durante todo el proceso experimental.

3. DISCUSIN DE RESULTADOS

3.1 Curva espectral disolucin problema

3
 Figura 1. Curva espectral del mtodo de colorimetra.

La grfica describe que la disolucin problema absorbe mayor cantidad de luz con longitud de
onda de 660nm, es decir absorbe luz roja (longitud de onda de los rojos: 605-750 nm [4]); esto
adems de reafirmar que la sustancia es azul (pues la sustancia transmite el color complementario
del rojo: azul [4]), sugiere que slo es posible relacionar la absorbancia con la concentracin de
una disolucin de azul de metileno a esta longitud de onda, pues es all donde el analito tiene
mayor interaccin con la luz.
La naturaleza del compuesto no permite mayor interaccin con las dems longitudes de onda y en
consecuencia se descartaron para el siguiente procedimiento experimental.

3.2 Curva espectral diluciones

Figura 2. Curva de calibracin del mtodo de colorimetra.

4
La grfica describe que la lnea de tendencia inicia por debajo del cero en el eje Y y no en el
origen del plano cartesiano, esto quiere decir que: Como la variable Y (absorbancia) es
dependiente de la variable X (concentracin) el valor del intercepto de Y (b) es menor a cero
porque seguramente todas o alguna de las diluciones tuvo una concentracin menor a la reportada
lo que se justifica en la adicin de ms volumen de agua durante el proceso de dilucin.

3.3 Determinacin de la concentracin

Se interpolo la absorbancia de la disolucin problema en la figura 2. El punto describi una

concentracin de aproximadamente 3,60 ppm. Matemticamente el clculo dio como resultado:
3,65 ppm. Sin embargo la absorbancia que se registr por primera vez de la disolucin problema
a 660 nm fue de 0,423 y la que se registr durante la creacin de la figura 2 fue de 0,408; este
cambio se puede justificar en que el blanco de reactivos que se us en alguno de los
procedimientos se contamin y calibr el 0 de absorbancia diferente entre los procesos
experimentales.

3.4 Determinacin absortividad

El clculo determin que la absortividad del azul de metileno es: 3,6e^4 /cm* M. La literatura
reporta que la absortividad es: 7,6e^4 [5]. Lo que quiere decir que el dato experimental tiene un
porcentaje de error del 52,6%

4. CONCLUSIONES

Se determin que la concentracin aproximada de la muestra problema fue de 3.65 ppm.

La disolucin de azul de metileno con concentracin de 3,65 ppm tienen una absorbancia
de 0,408 a una longitud de onda de 660 nm.
El coeficiente de absortividad es de 3,6e ^4 con un porcentaje de error del 52,6%

5. BIBLIOGRAFA
[1] Trujillo. C.A, Snchez.J.E (2007). Tcnicas y medidas bsicas en el laboratorio de qumica.
Universidad Nacional de Colombia.
[2] Plummer, D. T. Introduccin a la Bioqumica prctica, p. 94-97.
[3] Hernndez, L. y Gonzles, C. (2002). Introduccin al anlisis instrumental. , p. 46-47.
[4] Christie.R.M. (2001) La qumica del color. Madrid- Espaa. Captulo 1.
[5] Recuperado de pagina web: http://omlc.org/spectra/mb/mb-water.html