Grupo de anticuerpos del receptor de acetilcolina (AChR Ab,

anticuerpo anti-AChR)

Fundamento inmunológico en el cual está basada la técnica

Los anticuerpos para AChR pueden provocar un bloqueo de la transmisión neuromuscular

al interferir con la unión de la acetilcolina (ACh) con su receptor (AChR) en la membrana
muscular, de tal modo que no es posible la contracción muscular. Este fenómeno es
característico de la miastenia grave (MG). Esta afección es una enfermedad autoinmunitaria
ocasionada casi siempre por anticuerpos que bloquean o destruyen los receptores del
neurotransmisor acetilcolina, lo cual produce debilidad muscular y fatiga.
En este ensayo, receptores de acetilcolina para humanos son usados como antígenos. Los
receptores son marcados con 125I-alfa-bungarotoxina. Este veneno de serpiente se une a
los receptores en forma específica e irreversible. Autoanticuerpos presentes en el suero del
paciente se unen a los receptores marcados. Los inmuno complejos resultantes se
precipitan con anti IgG humano. La cantidad de radioactividad del sedimento es
directamente proporcional a la concentración de autoanticuerpos de receptores de
acetilcolina de la muestra

Desarrollo de la técnica
Interpretación de los Resultados

Muestras de suero y plasma EDTA de un total de 130 (129) voluntarios aparentemente

sanos fueron ensayadas (vea el cuadro a continuación). Los valores normales para
donantes de sangre sanos se encuentran entre 0.013 y 0.116 nmol/L en muestras de suero,
y entre 0.013 y 0.086 nmol/L en plasma EDTA. El límite superior del rango para valores
normales es de 0.110 nmol/L en suero y 0.081 nmol/L en plasma EDTA (correspondiente
al percentil 99%). Una concentración de anticuerpo mayor a 0.4 nmol/L es una indicación
inequivoca de myasthenia gravis [3,4]. Valores entre 0.25 y 0.4 nmol/L deben ser
considerados como ambiguos, no determinantes. Con estos valores, la especificidad
calculada es del 100% y la sensibilidad del 93.3% (vea 17. Sensibilidad Clínica /
Especificidad
Bioseguridad

la presencia de agentes infecciosos no puede ser excluída de forma absoluta de las

muestras que contienen suero o plasma humano por lo que estos reactivos deben ser
tratados como potencialmente biopeligrosos a los efectos de su manipulación y eliminación.

Los materiales radiactivos deben ser confinados en áreas específicamente diseñadas para
ello, monitoreadas frecuentemente y limitadas sólo para el personal autorizado Use ropa de
laboratorio desechable, cubiertas de mesa de trabajo absorbentes desechables. Emplee
siempre vigilancia radiológica individual, batas de laboratorio y guantes desechables.
Elimine cualquier salpicadura inmediatamente, limpiando el área contaminada con un
descontaminante y elimine los materiales contaminados como desechos radiactivos.

No fumar, beber, comer ó utilizar cosméticos en el área de trabajo. No pipetear con la boca.

Control de Calidad

Pre-analítico

Se deben observar las precauciones usuales para la venipuntura.

Es importante preservar la integridad química de la muestra de sangre desde el momento

de su toma hasta el ensayo.

No emplee muestras fuertemente hemolizadas, lipémicas o ictéricas.

Las muestras que presenten turbidez deben centrifugarse antes de ensayar para eliminar
cualquier material particulado.

Analítico

Los valores de los controles del ensayo deben encontrarse dentro de los rangos de
aceptación indicados en las etiquetas y el Certificado QC. Si este criterio no se cumple, el
ensayo no es válido y debe repetirse. Cada laboratorio debe emplear muestras conocidas
como controles adicionales. Se recomienda participar en los programas de aseguramiento
de la calidad adecuados

Evite la contaminación de los reactivos, pipetas pocillos y/o tubos. Emplee una punta
desechable nueva para cada reactivo, Calibrador o muestra. No intercambie las tapas. Tape
siempre los viales que no estén en uso. No reutilice los pocillos, tubos o reactivos
Cualquier manipulación inadecuada de las muestras o modificación del procedimiento de
ensayo puede alterar los resultados. Los volúmenes a pipetear, los tiempos de incubación,
las temperaturas y etapas de pretratamientos tienen que ser efectuados estrictamente
siguiendo las instrucciones. Use sólo pipetas u otros dispositivos calibrados

Se recomienda ensayar las muestras por duplicado para poder identificar errores
potenciales de pipeteo.

Se recomienda etiquetar todos los tubos.

Post Analítico

Verificación de los cálculos en el reporte final 2.

Revisión de los resultados para detectar posibles errores de transcripción.

3. Revisión que los reportes sean legibles 4

. Información de casos que requieran atención inmediata 5.

Vigilancia de la entrega de los resultados en tiempo

Buenas Prácticas de Laboratorio

Principales principios que abarcan las BPL. Basado en las descripciones de Goldman
son:

1. Facilidades Adecuadas. Desde el punto de vista del trabajo, para que éste
pueda ser realizado por los trabajadores en forma segura y apropiada. Se debe
contar con suficientes salas, para que el personal trabaje sin limitaciones de
espacio. El propósito y el tipo de producto a analizar deben ser considerados en el
diseño de un laboratorio (3-5).

2. Personal Cualificado. Es importante contar con personal cualificado. Esto es

una decisión de manejo basada en trabajo de calidad.

3. Equipamientos Mantenidos y Calibrados. Emplear equipos mantenidos y

calibrados de manera apropiada. Además disponer de los registros de los
mantenimientos.
 4. Procedimientos Estándares de Operación (SOPs). Procedimientos
operacionales estándares escritos. Ellos aseguran que cada uno obedezca al único
procedimiento al mismo tiempo, porque no es lo mismo dar las indicaciones en forma
oral, o decir que se sigan las indicaciones que aparecen en alguna literatura, donde
muchas veces la traducción no es la más adecuada, que si están establecidas por
escrito. Es importante esta práctica, tanto para las operaciones de muestreo como
en las del procedimiento analítico, porque es una manera de asegurar que la
muestra, está en condiciones para el análisis. Se debe considerar que: sólo lo que
está escrito existe.

 Anotar los datos y observaciones en un cuaderno, no en papeles sueltos.

 Asegurar que muestras, estándares y reactivos han sido etiquetados.
 Siempre usar material de vidrio limpio.
 Nunca calentar el material calibrado de vidrio.
 Usar reactivos para análisis, a menos que se estipule lo contrario. y que todos los
reactivos contengan garantía de sus límites máximos de impurezas.
 Tener cuidado de no contaminar estándares, muestras y reactivos.
 Hacer muestras en duplicado. como análisis, cuando sea posible.
 Evaluar críticamente todas las mediciones y reacciones si algo está sospechoso.
 Usar los métodos estándares para evaluar datos cuantificados.

Bibliografía
Buenas Pácticas de Laboratorio. (s.f.). Obtenido de Aula Virtual del Agua:
http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02
/44/GLP.htm

DIAsource ImmunoAssays SA . (s.f.). Acetylcholine Receptor Autoanticuerpos. Obtenido de

https://www.diasource-diagnostics.com/var/ftp_diasource/IFO/KIPIB21021.pdf

Pagana, K., & Pagana, T. (2015). Laboratorio Clínico Indicaciones e Interpretación de

Resultados (Primera ed.). Manual Moderno.
Salazar, L. C. (s.f.). UNAMAMYD Facultad de Química. Obtenido de Universidad Nacional
Autónoma de México Facultad de Química - Departamento de Programas
Audiovisuales:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Control_Calidad_22753.pdf