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Plantel Campus
Presentan:
Diego Carrillo Xochitl Noemi
Montalvo Mora Israel Adrian
Ramirez Aguilar Laura Cecilia
Introducción
Objetivo
Justificación
Replicación
La síntesis de las cadenas de ADN durante la replicación se lleva a cabo en
dirección 5’ → 3’ tanto en eucariotes como en procariotes. Solamente el carbono de
la posición 3’ de la pentosa posee un radical hidroxilo (OH) libre, con el que puede
formar un nuevo enlace fosfodiéster con otro desoxirribonucleótido y formar así la
hebra creciente de ADN; por esta razón, la cadena de ADN sólo puede crecer en
dirección 3’.
La replicación del ADN cuenta con tres características que la defi nen y permiten
entender el proceso: semiconservadora, bidireccional y antiparalela
Helicasa: enzima encargada de separar las dos hebras del ADN mediante la rotura
de los puentes de hidrógeno que se establecen entre las bases nitrogenadas de las
dos cadenas del ADN. Ocasiona superenrollamientos positivos a los lados de la
burbuja de replicación.
Topoisomerasas: son enzimas isomerasas que actúan sobre la topología del ADN,
pueden cortar o formar enlaces fosfodiéster ya sea una de las hebras
(topoisomerasa I) o en las dos (topoisomerasa II) que forman el ADN. Esta escisión
selectiva permite al ADN liberar la tensión contorsional, con lo que se deshace el
superenrollamiento, el cual en caso de persistir detendría la replicación. De esta
manera se permite el acceso a la cadena de ADN a todas las enzimas involucradas
en la replicación.
Primasa: es una enzima que sintetiza pequeños fragmentos de ARN de entre 8 y
10 nucleótidos de longitud, conocidos como cebadores o primers, complementarios
a un fragmento del ADN. La unión de los cebadores al ADN proporciona un extremo
3´ necesario para que la ADN polimerasa (enzima que sintetiza ADN y que no puede
añadir nucleótidos si no existe un extremo 3´libre) lleve a cabo su acción. Los
cebadores, al ser ARN, luego son degradados por las nucleasas Rnasa H1 y
sustituidos por ADN por acción de otra ADN polimerasa.
Rnasa H1: enzima encargada de retirar los cebadores de ARN durante la síntesis
de los fragmentos de Okazaki y en los procesos de reparación del ADN.
Ligasa: enzima que cataliza la formación del enlace fosfodiéster entre nucleótidos
contiguos.
ADN polimerasa: son las principales enzimas en este proceso. Son capaces de
sintetizar nuevas cadenas de ADN a partir de una hebra patrón o molde y las
unidades estructurales correspondientes (desoxirribonucleótidos). Una
característica importante de esta enzima es que añade los nucleótidos en la
dirección 5’ → 3’ siempre y cuando haya un extremo 3’ disponible. Como
consecuencia de esto, la dirección en la cual leerá la cadena molde de ADN será
de 3’ → 5’. En eucariotes se han descrito por lo menos cinco ADN polimerasas
involucradas en la replicación del ADN, cada una con una actividad específi ca: α,
β, γ, δ y ε. La polimerasa α (ADNpol α), también llamada primasa, inicia la síntesis
del ADN mediante la formación de un cebador ARN. Las polimerasas δ y ε (ADNpol
δ y ADNpol ε) son responsables de la mayor parte de la elongación de ambas hebras
del ADN. La polimerasa β (ADNpol β) no interviene en la replicación y está
involucrada en la reparación de errores o daños en el ADN. Es importante
mencionar que las polimerasas α, β, δ y ε están involucradas en la replicación del
ADN nuclear. La polimerasa γ (ADN pol γ) lleva a cabo la replicación del ADN
mitocondrial. Existen otras polimerasas, como las polimerasas ζ (theta), η (eta) y ι
(iota), cuya función no es muy conocida, pero se cree que están involucradas sobre
todo en mecanismos de reparación y recombinación. De las 5 polimerasas, sólo tres
tienen la actividad de exonucleasa-3’ (pol δ, γ y ε), esto es, son capaces de corregir
los errores cometidos al incorporar los nucleótidos a la hebra que se está
sintetizando, eliminan el nucleótido equivocado y añaden el correcto. Ninguna ADN
polimerasa en eucariotes presenta actividad de exonucleasa-5’. En procariotes la
ADN pol I presenta este tipo de actividad. A diferencia de lo observado en
eucariotes, en la maquinaria para la replicación de los procariotes, sólo tres enzimas
participan en la síntesis del ADN. La polimerasa I es la única que tiene actividad de
exonucleasa de 5’ a 3’. En el cuadro 4-2 se resumen las propiedades de la ADN
polimerasa en eucariotes y en el 4-3, las de procariotes.
Fases de la replicación
Inicio: Las zonas en el ADN donde se producen las burbujas de replicación no son
aleatorias, se sabe que existen secuencias de aproximadamente 300 pb que indican
los lugares precisos donde ha de comenzar la replicación. Estos sitios son ricos en
A y T y son reconocidos por una serie de proteínas llamadas, en conjunto, proteínas
de reconocimiento del sitio de origen. En eucariotes, los orígenes de replicación se
llaman secuencias de replicación autónoma (SRA). Cada burbuja de replicación
posee dos horquillas de replicación, una de las cuales se desplaza hacia la derecha
y otra hacia la izquierda. El proceso de replicación necesita, en primera instancia,
que las dos cadenas del ADN se separen. Para esto, la helicasa se unirá a la cadena
de ADN e hidrolizará los puentes de hidrógeno. La apertura de la doble hélice hace
que las cadenas simples adquieran inestabilidad, que se compensa por la unión de
proteínas estabilizadoras RPA. La ADN polimerasa no puede iniciar la síntesis a
partir de los desoxirribonucleótidos libres; por lo tanto, necesita que la primasa
sintetice un cebador, a partir del cual la ADN polimerasa incorporará los nucleótidos
en forma complementaria a las bases de la cadena patrón.
Transcripción
Una de las funciones de la doble cadena del ADN, representada en el dogma de la
Biología Molecular, es expresar la información contenida en el material genético. El
primer paso en la expresión génica es la transcripción, que consiste en la síntesis
de una cadena de ARN complementaria y antiparalela, a la secuencia de
nucleótidos de una de las cadenas de ADN denominada cadena molde, y por lo
tanto, tiene la secuencia de nucleótidos idéntica a la cadena opuesta del ADN
llamada cadena codificadora, con la premisa de que la timina se sustituye por uracilo
en la molécula de ARN.
ARN POLIMERASA
La enzima protagonista en este proceso es la ARN pol, que sintetiza una cadena de
ARN en dirección 5’ → 3’ al igual que la ADN pol. Esta enzima actúa de manera
continua durante toda la unidad de transcripción: primero sobre el sitio de inicio
indicado en el promotor basal, continúa en la secuencia codifi cadora y fi naliza en
una secuencia de terminación. En las células eucariotas los genes nucleares son
transcritos por tres tipos de ARN pol: I, lI y III, que transcriben diferentes tipos de
genes en lugares específi cos del núcleo.
La ARN pol I reside en una zona definida del núcleo, el nucleolo, donde transcribe
los genes que codifican para los ARNr.
Traducción
Cuando el RNA ha sido procesado, este es capaz de atravesar los poros de la
membrana nuclear y llegar al citoplasma, en donde será traducido. La traducción
consiste en la unión covalente de los aminoácidos para la formación de proteínas,
las cuales están establecidas por secuencias específicas de nucleótidos del mRNA
y de acuerdo con el código genético.
Inicio
Una vez que el ribosoma se une a la cadena de mRNA se mueve hacia el sentido
5’ – 3’ “leyendo” codón por codón en bloques consecutivos de tres nucleótidos los
cuales van a ser para la codificación de un aminoácido. Para que esta lectura se
lleva a cabo se presenta un codón denominado “Codón de Inicio” el cual tiene las
bases nitrogenadas AUG las cuales van a dar paso a la iniciación para la traducción
de las proteínas. La unión a este codón pone al ribosoma de manera automática en
el marco de lectura de tal modo que el ribosoma lee el mensaje entero, de manera
correcta, desde este punto de inicio hasta el punto final.
Traducción en eucariotas
Las células eucariotas necesitan por lo menos 12 factores de iniciación que incluyen
un total estimado de 25 cadenas polipeptídicas, estos factores se unen a la
subunidad 40S que ayuda a la unión con mRNA. El tRNA iniciador unido a una
metionina también se une a una subunidad 40S antes de su interacción con el
mRNA.
El tRNA iniciador entra en el sitio P de la subunidad en asociación con eIF2-GTP.
Una vez que estos sucesos se llevan a cabo, la subunidad ribosómica pequeña con
sus factores de inicio relacionados y el tRNA (que juntos integran un complejo de
preinicio 43S) está listo para encontrar el extremo 5' del mRNA (que tiene el
casquete de metilguanosina).
Una vez que el 43S se une al extremo 5' del mRNA, el complejo recorre el mensaje
hasta alcanzar una secuencia nucleotídica que reconoce que tiene un codón AUG.
Después de que el complejo 43S alcanza el codón AUG se hidrolizan varias
enzimas (eIF2-GTP) y se eliminan, por tanto, la subunidad mayor (60S) se une al
complejo para la iniciación.
Elongación
Paso 1: selección del aminoacil-tRNA
Con el tRNA iniciador cargado y en posición dentro del sitio P, el ribosoma queda
disponible para la entrada de un segundo aminoacil-tRNA en el sitio A vacante, lo
cual representa el primer paso de la elongación.
Paso 3: translocación
La formación del primer enlace peptídico deja un extremo de la molécula de tRNA
del sitio A todavía fijado a su codón complementario sobre el mRNA y el otro
extremo de la molécula fijado a un dipéptido. El tRNA del sitio P queda entonces
desprovisto del aminoácido. El siguiente paso, llamado translocacion, se caracteriza
por un movimiento parecido al de un trinquete de la subunidad pequeña con
respecto a la grande. Como resultado, el ribosoma se mueve tres nucleótidos (un
codón) por el mRNA en sentido 5' a 3'. La translocación se acompaña del
movimiento del dipeptidil-tRNA del sitio A al sitio P del ribosoma, todavía enlazado
por hidrógeno con el segundo codón del mRNA, y del movimiento del tRNA
desacilado del sitio P al sitio E.
Terminación
Cuando el ribosoma alcanza y lee los codones UAG, UAA y UGA la señal
interpretada es la de paro, lo que detiene la traducción de las proteínas y la libera.
Desarrollo metodológico
La aplicación desarrollada se trata de un juego en donde los alumnos podrán elegir
sobre que tema se harán las preguntas, los temas son, replicación, transcripción,
replicación y enzimas. Al elegir el tema aparecerá una ruleta en donde al girar te
hara preguntas al azar sobre ese tema, el alumno obtendrá un punto por cada
respuesta correcta.
Conclusión
Bibliografía
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