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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA, MANAGUA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS


DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS
SECCIÓN DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR

GUÍA DE SEMINARIO #2

TEMAS A EVALUAR:
 Replicación del ADN
 Transcripción
 Código Genético.

OBJETIVOS:

 Enunciar el dogma central de la biología molecular y sus excepciones


 Indicar la importancia biológica de la replicación del ADN.
 Explicar los conceptos asociados a la replicación del ADN.
 Describir las etapas, eventos y proteínas más importantes de la replicación
del ADN.
 Establecer las diferencias entre replicación procariótica y eucariótica.
 Describir en términos generales las distintas etapas que conlleva a la
síntesis del ARN
 Comprender la importancia biológica de estos procesos a nivel procariota y
eucariota.
 Establecer diferencias de estos procesos a nivel de los procariotas y
eucariotas.
 Describir las características del código genético.

METODOLOGÍA

Para alcanzar los objetivos del seminario se hará uso del ABC del Aprendizaje
Cooperativo; donde Ferreiro R. (2010); plantea que el trabajo activo,
bidireccionalidad y cooperación en el proceso de enseñanza aprendizaje es una
experiencia significativa que exige trabajar juntos para lograr beneficios mutuos en
la construcción social del conocimiento.

Nota: Estos objetivos serán evaluados mediante el siguiente cuestionario

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CUESTIONARIO
1. Explique el dogma central de la biología molecular y sus excepciones.
La información genética contenida en el ADN experimenta dos procesos claves:
replicación y expresión genética. A través de la replicación, el ADN se duplica, lo
que permite repartir equitativamente el material genético a las células hijas durante
el proceso de división celular. En la expresión genética, los genes son leídos por un
conjunto de enzimas, siendo generalmente la síntesis de proteínas el producto final
de dicho proceso.
La expresión genética, a su vez, incluye: la transcripción y traducción. La
trascripción es la síntesis de ARN mensajero (ARNm), a partir de la secuencia
nucleotídica de un gen. Este proceso ocurre dentro del núcleo en los organismos
eucariontes. Luego, el ARNm experimenta ciertas modificaciones localizándose,
finalmente, en el citoplasma, en donde sirve como molde en el proceso de
traducción. La traducción es la lectura del ARNm para generar una proteína.
En síntesis, el ADN se auto replica, generando más ADN, o bien se transcribe,
resultando en la producción de ARNm, el que a su vez experimenta traducción
durante la síntesis de proteínas. En 1958, Francis Crick planteó que la información
genética fluye del ADN al ARN y luego a las proteínas, nunca en sentido inverso, lo
que se conoce como el dogma central de la biología molecular. Este dogma
constituye la piedra angular de la biología a nivel celular. No obstante, otros
procesos escapan a este dogma, como, por ejemplo, la transcripción inversa que
ocurre en ciertos virus, donde el ARN genómico puede ser copiado en forma de
ADN.
2. Distinga entre la importancia biológica del ADN y la de su proceso de
replicación.
El DNA (ADN) es una macromolécula: un ensamblaje de un gran número de átomos
que permanecen unidos a un ordenamiento definido cuya estructura tridimensional
puede preciarse mediante distintas técnicas y que tiene como principal fin, funcionar
como un almacén de información (genética). La suma de información genética que
un organismo individual hereda de sus padres es equivalente a la suma de todos
los segmentos de DNA presentes en el huevo fecundado que inicia la vida.

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La poliploidización es un proceso en el cual se produce una descendencia que
tiene dos veces el número de cromosomas en cada célula que sus padres diploides;
la descendencia tiene 4 homólogos de cada cromosoma en lugar de 2. Se cree que
la poliploidización ocurre en una de dos maneras: dos especies relacionadas se
aparean para formar un organismo híbrido que contiene los cromosomas
combinados de ambos progenitores; en la otra alternativa, un embrión unicelular
experimenta duplicación cromosómica, pero en lugar de separarse en células
separadas los duplicados se conservan en una sola célula que evoluciona en un
embrión viable.
Es posible, que la duplicación de un gen ocurra por varios mecanismos diferentes,
pero más a menudo por un proceso de entrecruzamiento desigual. El
entrecruzamiento desigual se observa cuando un par de cromosomas homólogos
quedan juntos durante la meiosis, de tal forma que no se unen por completo. Como
resultado de esta mala unión, el intercambio genético entre los homólogos da lugar
a que un cromosoma adquiera un segmento adicional de DNA (duplicación) y el otro
cromosoma lo pierda (deleción). Si la duplicación de una secuencia particular se
repite en las subsecuentes generaciones, se crea un grupo de segmentos repetidos
en tándem y se localiza dentro de ese cromosoma.
3. Enuncie los conceptos asociados a la replicación del ADN.
En la replicación intervienen numerosas enzimas con función diversa. La acción
eficaz de todas ellas se consigue porque forman parte de un gran complejo
nucleoproteico, el replisoma, que coordina su actividad en la horquilla de replicación.

Las primeras enzimas del replisoma que actúan son las helicasas y las
topoisomerasas que desenrollan la doble hélice, rompen los puentes de hidrógeno
que unen las dos cadenas complementarias y evitan que se formen
superenrollamientos de la hélice en zonas adyacentes.

Una vez que las bases de cada cadena quedan expuestas en la horquilla
dereplicación, los ADN polimerasas pueden utilizarlas como molde para incorporar
los nucleótidos complementarios en la cadena que se está sintetizando.

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Distintos ADN polimerasas intervienen en momentos distintos de la replicación, pero
todas ellas utilizan las formas trifosfato de los desoxirribonucleótidos (dATP, dCTP,
dGTP y dTTP) para hacer crecer la nueva cadena en sentido 5’ –> 3’, y cada
nucleótido que se incorpora libera dos fosfatos al unirse al nucleótido anterior. No
obstante, los ADN polimerasas sólo pueden añadir nucleótidos a una cadena ya
existente, no tienen la capacidad de iniciar la síntesis de una cadena. La síntesis se
inicia a partir de unos cebadores o primers de ARN que son fragmentos de 8 a 12
ribo-nucleótidos sintetizados por una primasa que copia la cadena de ADN.

Debido a que las dos cadenas de la doble hélice son antiparalelas y que la
incorporación de nucleótidos sólo se realiza en sentido 5’ –> 3’, a medida que va
avanzando la horquilla de replicación, sólo una de las dos nuevas cadenas puede
sintetizarse de forma continua2. La cadena que avanza en sentido contrario al que
avanza la horquilla de replicación, se sintetiza de forma discontinua en fragmentos
cortos que se conocen como fragmentos de Okazaki. La cadena que se sintetiza de
forma continua se conoce como cadena líder o adelantada y la cadena que se
sintetiza de modo discontinuo es la cadena retrasada.

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4. Enuncie de forma ordenada las proteínas y enzimas involucradas en la
replicación del ADN
Proteína Enzima
Desoxiadenilato (A), adenina. Helicasa: abre el ADN en la horquilla de
replicación.
Desoxiguanilato (G), guanina. Proteínas de unión a cadenas sencillas.
(Topoisomerasa, evita el súper
enrollamiento)
Desoxicitidilato (C), citosina. Primasa: sintetiza cenadores ARN
complementarios a la cadena de ADN.
Desoxitimidilato (T), timina. ADN polimerasa III: extiende cebadores
y forma la mayor parte del nuevo ADN.
ADN polimerasa I: se sustituye por ADN
ADN ligasa: sellamiento.

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5. Dibuje un esquema de la replicación del ADN.

6. Diga usted qué sentido tiene la metilación post-replicativa del ADN.


En los organismos diploides, cada gen autosómico cuenta con dos copias que se
expresan simultáneamente. No obstante, en los mamíferos se observa que una
pequeña proporción de genes manifiestan impronta genética: sólo expresan una de
las dos copias, dependiendo de su origen parental. Estos genes, por tanto, se
comportan funcionalmente como si fueran haploides. Se ha visto que los e-nes
improntados forman grupos en diversas regiones del genoma. Los genes
improntados responden a herencia epigenética, resultado de la me-tilación
diferencial del ADN en cada sexo durante la formación de los gametos.

Las marcas de metilación del ADN son heredadas de una generación celular a la
siguiente, pero son borradas en las células que originarán las células germinales.
Una vez formados los gametos, los genes improntados reciben las marcas
específicas de cada sexo, que decidirá si el gen será activo o no en la siguiente
generación.

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7. Diga usted cuál es la importancia de las enzimas de restricción en la
postreplicación del ADN.
 Las enzimas de restricción son enzimas que cortan ADN. Cada enzima
reconoce una o un número pequeño de secuencias blanco y corta el ADN en o
cerca de esas secuencias.
 Muchas enzimas de restricción hacen cortes escalonados que producen extremos
sobresalientes de ADN de cadena sencilla. Sin embargo, algunos producen
extremos romos.

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 El ADN ligasa es una enzima que une ADN. Si dos fragmentos de ADN tienen
extremos complementarios, la ligasa puede unirlos para formar una molécula
única e intacta de ADN.
 En la clonación de ADN, se utilizan enzimas de restricción y ADN ligasa para
insertar genes y otros fragmentos de ADN en plásmidos.

8. Indique las diferencias entre procariotas y eucariotas, respecto de la


replicación del ADN
En los procariotas la duplicación de su cromosoma circular comienza en un lugar
especial llamado origen de replicación. Una vez duplicado el cromosoma, las dos
copias se separan hacia extremos opuestos y la pared celular crece separándolos
y formando dos nuevas células. En condiciones óptimas, algunas bacterias pueden
completar un ciclo de división cada 20 minutos. Esto nos permite, en el laboratorio,
obtener colonias o suspensiones de células con millones de bacterias idénticas (o
clones) en muy pocas horas, pero también supone un problema cuando se quiere
acabar con alguna infección.
El ciclo celular en los eucariotas, incluye los distintos estados por los que atraviesa
la célula empezando tras la división celular que la ha originado y acabando en otra
división celular que originará dos células hijas nuevas. Básicamente podemos dividir
el ciclo celular en: Interfase y Mitosis. Durante la interfase, la célula crece y se
desarrolla preparándose para entrar en una nueva división celular o mitosis.

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9. Diga cuál es la diferencia entre replicación y transcripción del ADN.
Conocemos como replicación del ADN al proceso por el cual una molécula de ADN
se duplica. La replicación del ADN se enfrenta a dos necesidades: la fidelidad de
copia y la rapidez. Para ello, la célula despliega una compleja maquinaria enzimática
de alta precisión. Tal como demostraron los experimentos de Meselson y Stahl
(1958), la replicación del ADN es semiconservativa. Cada una de las dos cadenas
de ADN sirve como molde para sintetizar su cadena complementaria. De este modo,
se obtienen dos moléculas de ADN, cada una de las cuales estará formada por una
cadena original y otra sintetizada de nuevo.

Cada cromosoma está formado por una molécula de doble cadena de ADN que
contiene la información de multitud de genes distintos, codificada en su secuencia
de desoxirribonucleótidos. Muchos de estos genes codifican para la síntesis de
proteínas. La maquinaria que interviene en la síntesis de proteínas, sin embargo, no
lee esta información directamente del ADN, sino que utiliza una molécula
intermediaria de ARN mensajero (ARNm). Cada molécula de ARNm contiene la
información de un gen para la síntesis de una única proteína, codificada en su
secuencia de ribonucleótidos. El código usado por ADN y ARN es básicamente el
mismo, una secuencia de nucleótidos, por lo que el paso de ADN a ARN se conoce
como transcripción.

10. Describa los elementos del operón.


 Gen regulador: codifica una proteína reguladora, el represor. El represor Lac,
codificado por el gen lac I, es la proteína reguladora del operón lac.
 Operador: Región del ADN en el operón a la que se une la proteína
reguladora.
 Promotor: Secuencia del ADN en el operón reconocida por el ARN
polimerasa dependiente del ADN. En lugar de iniciación para la síntesis del
ARN está situado inmediatamente tras el promotor. El gen de ARN
polimerasa dependiente de ADN no es parte del operón, ya que el ARN
polimerasa transcribe todos los operones bacterianos.

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 Genes estructurales: El operón contiene uno o más genes que codifican
enzimas inducibles. El operón lactosa codifica las enzimas necesarias para
el metabolismo de lactosa, incluyendo B-galactosidasa, B-galactósido,
permeasa y B-galactócido transacetilasa.

11. Elabore del proceso de transcripción.

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12. Describa la etapa postranscripcional a nivel de los eucariotas.
El control postranscripcional, regula la expresión de un gen en el paso de ARN a
proteínas. La atenuación de la transcripción es un fenómeno que se da durante
la transcripción. En el control de procesamiento del ARN los intrones son
retirados del ARNm precursor, dejando los exones (secuencia intrónica ambigua).
 Splicing diferencial: proceso realizado durante corte y empalme y se conoce
como control de procesamiento del ARN. Los nitrones son retirados del
ARNm precursor, dejando exclusivamente las secuencias exónicas. Es
utilizado particularmente por algunos virus, y permiten diversos tipos de
relaciones entre un gen y su producto ARNm.
 Elección del sitio de poliadenialción: La posibilidad de obtener varios tipos de
ARNm a partir de un mismo transcrito primario reside en la variabilidad de
elección del sitio de poliadenialción.
 Almacenamiento de ARNm: El almacenamiento de ARNm tanto en el núcleo
como en el citoplasma es una manera de regulación. La complejidad de los
ARN nucleares es alrededor de 20 veces mayor que la de los mensajeros
citosólicos. Estímulos hormonales.
 Exportación a través de poros nucleares: Los ribosomas y los RNPs. Solo
1/20 de la masa total de los ARNhn abandona el núcleo. Casi la mitad de los
transcritos primarios se degrada en el núcleo y jamás producen ARNm
maduros para ser exportados.

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13. Mencione las diferencias del proceso de transcripción entre organismos
procariotas y eucariotas.

14. Diga qué es el código genético.


La unidad básica del código genético es el codón, la secuencia de nucleótidos que
codifica para un aminoácido. Si una secuencia de 4 nucleótidos distintos codifica
para 20 aminoácidos distintos, debe hacerlo, como mínimo, utilizando grupos de 3
nucleótidos, o tripletes, por aminoácido5. Con un código de tripletes se dispone de
4 x 4 x 4 = 64 codones distintos (Tablas 4.2 y 4.3). El código genético, cuenta con 3
codones de paro, o STOP, y 61 codones con sentido. Se dice que el código genético
es degenerado porque algunos aminoácidos están codificados por diversos
codones (hay codones sinónimos).
El código genético (equivalencia entre tripletes de ácido nucleico y aminoácidos en
las proteínas) es común en la mayoría de organismos. Por ello decimos que el
código genético es universal (Tabla 4.2), aunque existen algunas excepciones. La

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mayoría de las excepciones se encuentran en los genes de las mitocondrias,
aunque también hay en el ADN nuclear de algunos organismos. La mayoría de los
codones implicados en las excepciones son codones de STOP.

15. Diga las propiedades y características del código genético. Ejemplifique.


Como cada aminoácido viene codificado por un triplete, existen 3 pautas de lectura
posible. Las proteínas que se podrían sintetizar a partir de cada una de estas pautas
son muy distintas (Figura 4.5). Así pues, la maquinaria encargada de la traducción
debe reconocer un punto de inicio (codón de iniciación) para la síntesis de proteína
que marcará qué pauta de lectura es la correcta. El codón de iniciación es el primer
triplete del ARNm que específica para un aminoácido. Generalmente se trata del
codón AUG que codifica para metionina, aunque en ocasiones más raras también
puede ser un codón GUG o UUG.

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Bibliografía:
 Apuntes de clases
• Gerald K. (2009). Biología celular y molecular. Mc Graw Hill Interamericana.
5° Edición.
• Robert K. Murray et al. (2011). Bioquímica Ilustrada de Harper. 28ª Edición.
México. Editorial Manual Moderno.
• Champe, P.; Harvey, R. y Ferrier, D. (2006). Bioquímica (3° ed.).México:
McGraw-Hill. Interamericana Editores.
• Trudy M., James R., M. (2009). Bioquímica “Las Bases Moleculares de la
Vida” (4ª ed.). México: McGraw-Hill. Interamericana Editores.

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