UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

Biología celular y molecular

Fecha: 17 de Abril 2020

Grupo: 6

Nombres: Paola Andrea Ospina Sanchez, Julian Esteban Pecha Ramirez, Laura Cristina
Heredia Torres, Diego Iván Gamba Luengas

Taller 4: Replicación del DNA

Art. 1. Cunningham, E. L., & Berger, J. M. (2005). Unraveling the early steps of prokaryotic
replication. Current opinion in structural biology, 15(1), 68-70. Table 1; Fig1 and Fig2.

1. ¿What does 'Origin Firing' mean?

RTA/: 'Origin Firing' (Disparo de origen), es el medio más importante de regulación del
proceso de replicación del ADN (da inicio al proceso), a través de la unión de nucleótidos y la
hidrólisis, que ocurre en lugares especializados, donde el ADN primero debe abrirse y
desarrollarse, antes de comenzar con la replicación. No todos los orígenes de replicación se
disparan al mismo tiempo.

2. ¿What is a replisome?
RTA/: Es un complejo molecular que lleva a cabo la replicación del ADN. Comprende varios
sub-componentes (helicasa, primosoma, ADN.Pol- II y III, proteínas SSB, abrazaderas) , cada
uno realiza una función específica durante el proceso de replicación.

3. ¿What are repetitive, non-palindromic sequences?

RTA/: Las secuencias no palindrómicas son aquellas secuencias que al leerse en ambas
direcciones (de 5’ a 3’ y de 3’ a 5’) no es idéntica, por ejemplo:
La secuencia palíndromo en color rojo

...AATGCATGCAATGGCATAGCTA...
...TTACGTACGTTACCGTATCGAT…

4. ¿What are the oriC sites?

RTA/: El oriC es un origen de replicación del cromosoma donde se inicia la replicación de la
cadena de ADN. Se trata, por lo tanto, de una determinada secuencia de nucleótidos a partir
de la cual se desarrolla la horquilla de replicación que dará lugar a las dos cadenas idénticas
de ADN resultantes.

5. Describe briefly the functions of the proteins that are involved in the replication of
bacterial chromosoma
RTA/: Las enzimas encargadas de catalizar el proceso de replicación, se denominan ADN
polimerasas. En E. coli se conocen 3 ADN polimerasas distintas. La responsable de la mayor
parte de los procesos de replicación es la llamada polimerasa III, mientras que las
polimerasas I y II cumplen fundamentalmente roles en la reparación de rupturas o de
errores en las moléculas de ADN. También participan otras enzimas, como son las llamadas
helicasas, responsables de “desenrollar” el ADN en el origen o cerca de él, paso que resulta
indispensable para iniciar la replicación. Esquemáticamente, podemos decir que la
replicación consta de 3 fases: iniciación, elongación y terminación. La iniciación, se da a
partir del origen del replicón donde se forma la o las horquillas de replicación, por la acción
de helicasas que “desenrollan” la estructura del ADN, formándose así una porción
monocatenaria que estará en condiciones de formar un complejo con ciertas proteínas de
unión al ADN encargadas de estabilizar la cadena sencilla, evitando la formación de
puentes de hidrógeno. Se sintetiza un corto oligonucleótido de ARN con un grupo 3´
oxhidrilo libre, que actuará como cebador o “primer”, sobre el que la ADN polimerasa
agrega los nucleótidos. Para la replicación del ADN hacen falta varias enzimas.La ADN
polimerasa III necesita para iniciar la síntesis un cebador o primer que es sintetizado por una
ARN polimerasa especial. Algunas proteínas desenrolla la hélice de ADN y otras se unen a
los fragmentos de ADN unicatenario para estabilizar. Como la polimerasa solo sintetiza
ADN en dirección 5’ a 3’, una de las cadenas se sintetiza en forma discontinua, DN y de
huecos sin replicar. La ADN polimerasa I rellena los huecos y una enzima ligasa sella los
fragmentos entre sí.
Las proteínas de unión a cadenas sencillas cubren el ADN alrededor de la horquilla de
replicación para evitar que el ADN se vuelva a enrollar dejando una serie de fragmentos.
Proteinas SSB: estabilización de cadenas separadas, union cooperativa, el ADN se mantiene
en un estado alargado.

6. In the replication process, ¿what is a Leading strand? ¿What is a lagging strand?

RTA/: El ADN es direccional en ambas hebras, significadas por un extremo 5’ y 3’ . Esta
notación significa que grupo lateral está unido el esqueleto de ADN. El extremo 5’ tiene un
grupo fosfato (P) unido, mientras que el extremo 3’ tiene un grupo hidroxilo (OH) adjunto.
Esta direccionalidad es importante para la replicación, ya que sólo progresa en la dirección
5’ a 3’ . Sin embargo, el tenedor de replicación es bidireccional; una hebra está orientado en
la 3’ a 5’ (filamento principal) mientras que el otro está orientado 5’ a 3’ (filamento de
revestimiento) . Por consiguiente, los dos lados se replican con dos procesos diferentes para
dar cabida a la diferencia direccional.
El filamento principal es el más simple de replicar. Una vez que las hebras de ADN se han
separado, una pieza corta de ARN llamado un cebador se une al extremo 3’ de la cadena. El
cebador siempre se une como punto de partida para la replicación. Los cebadores se
generan por la enzima primasa de ADN.
El filamento de revestimiento comienza la replicación mediante la unión con múltiples
cebadores. Cada cebador es sólo varias bases de diferencia. ADN polimerasa añade
entonces piezas de ADN, llamados fragmentos de Okazaki , a la hebra entre los cebadores.
Este proceso de replicación es discontinua como los fragmentos recién creados son
inconexo.

7. ¿What is the Origin recognition complex ORC, and why is it important in the early
steps of the replication process?
RTA/: Es un complejo multiproteico formado por seis proteínas que son importantes para
mantener la vitalidad de la célula y que en cada especie varía el orden en que se ensamblan,
en los humanos las ORC 2-5 se unen de forma estable mientras que las demás de unen de
forma lábil.
Su principal función es iniciar el proceso de replicación, primero recluta la proteína Cdc6, así
como el complejo de mantenimiento de minicromosomas y el factor de licencia del ADN
todo esto para formar un complejo pre-replicativo, durante la transición a la fase S del ciclo
celular aumenta la presencia de enzimas que regulan el correcto desarrollo del ciclo celular
y a la vez fosforila las proteínas cdc6 y cdt1 de esta manera se pierde la afinidad por el
complejo y por el ADN causando que la Helicasa deje de ser inhibida y así puede comenzar a
abrir la doble cadena de ADN para que se inicie la replicación