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Etanol
Líquido transparente e incoloro
Bajo punto de congelación -40 °C
Punto de fusión: -114,1 °C,
Punto de ebullición 78,5 °C ,
Densidad relativa 0,789 a 20 °C.
Etanol comercial (95%),
Etanol absoluto (extracción del agua residual).
Producción de etanol
• Proceso sencillo: A partir del etileno
o del acetileno. Tratamiento con agua,
catalizador a elevadas temperaturas.
Síntesis química
• OMS prohíbe el uso del etanol
obtenido por síntesis química para la
elaboración de alimentos y fármacos.
Procesos inorgánicos
Procesos Orgánicos
Bioprocesos
Tipos de procesos
χ = χο x µt
Ln χ = Lnχο + µt
S
µ = µ máx
Ks + S
µmax
crecimiento
Velocidad específica de
0.5µmax
Ks Concentración de Sustrato
Crecimiento microbiano
• rx = µX Velocidad de crecimiento
microbiano
• µ = Velocidad específica
• X = concentración de biomasa
S S
µ = µ máx rx = µ máx X
Ks + S Ks + S
Crecimiento microbiano y
utilización del sustrato
− rx S
rs = = µ máx X
Y Y ( Ks + S )
rx = Velocidad de crecimiento microbiano (M/VT)
rs = Velocidad utilización de sustrato
Y = Coeficiente bruto de producción celular (M/M)
rx = −Yrs
Cinéticas de Inhibición
0 1/[S] docencia.izt.uam.mx
Producción de metabolitos
microbianos
Inóculo
Es la preparación de una población de
microorganismos, a partir de un cultivo stock, en
un estado útil, para introducirlo en una etapa
productiva final.
No asociadas Consecutivas
Escalonadas
25
X,S,P (g.L-1)
Biomasa 20
20 Biomasa
Sustrato 15 Sustrato
15
Producto 10 Producto
10
5
5
0 0
0 24 48 72 96 120
0 24 48 72 96 120
Tiempo (horas)
tiempo (horas)
No asociadas Producción de Celulasas fúngicas.
Trichoderma viride en paja de trigo
Producción de proteína unicelular
30
X,S (g.L-1), P ( Ux103)
5
0
0
24
48
72
96
120
144
168
192
Tiempo (horas)
Producción de Penicilina
Penicillium notatum, en glucosa-lactosa
Clasificación de los procesos
microbianos
Simples
Simultáneas
30 35
25 30
X,S,P (g.L-1)
20 25
X,S P (g.L-1)
15 20
15
10
10
5
5
0
0
0 24 48 72 96 120
0 24 48 72 96 120
Tiempo (horas) Tiempo (horas)
Biomasa Sustrato Producto Biomasa Sustrato
Producto I Producto II
Producción de etanol
Saccharomyces cerevisiae a partir de glucosa Acumulación de grasa y proteína
Rodhotorula glutinis con glucosa.
Clasificación de los procesos
microbianos
Consecutivas Escalonadas
X ,S ,I (g .L -1 ) P u .m L
35
30 35
30
X,S (g.L-1)
25
25
x 1 0 -2
20 20
15 15
10 10 Diauxia
5 5
0 0
0 24 48 72 96 120
48
96
0
2
14
19
Tiempo (horas)
Tiempo (horas)
Biomasa Sustrato Biomasa Sustrato
Intermediario Producto
Erlenmeyers
Esquema general de procesos
microbianos
I. Transferencia en el laboratorio
30 – 50 L
1000 L ó más
Reactor semilla
Reactor industrial
Microorganismos productores de
etanol
No patógeno
Altos rendimientos a partir de
diversos sustratos
Estabilidad fisiológica
Resistencia a altas concentraciones
de etanol: Daños celulares mínimos,
mecanismos de resistencia
No producción de sustancias
colaterales indeseables
Microorganismos productores de
etanol
Candida pseudotropicalis
C. utilis
Kluyveromyces fragilis
Características de una cepa “ideal”
Formación de
etanol
Azúcares Crecimiento
celular
Formación de
subproductos
www.praj.net
Metabolismo de Glucosa
Ruta bioquímica
Glucosa
de S. cerevisiae
Glicolisis
Piruvato
Mg +2
Acetil CoA NADH2 Piruvato
ATP descarboxilasa TPP
CO2
acetaldehido
Cadena respiratoria
O2 aceptor final Ciclo de Krebs NADH2
Alcohol
de electrones
deshidrogenasa
NAD+
Etanol
FUNCIÓN:
Activador enzimático de reacciones
de metabolismo.
Su deficiencia provoca problemas en
desprendimiento de células hijas.
Tiene acción antagónica con el Calcio.
Mantiene permeabilidad de las
membranas.
Zinc
Calcio
• En alta concentración inhibe la
absorción de los aminoácidos.
Hierro
nutrientes %
Na3 PO4 0.02 - 0.05 %
K3 PO4
Jugo Claro
Mezclado Pasterización
Levadura Fermentación
Vinaza
7 - 9 %v/v
Concentración
Destilación
de Vinaza
95 %v/v
Deshidratación Compostaje
ALCOHOL
ANHIDRO
(99.5 %v/v)
CO2 a la atmósfera
Agua de lavado
Columna
lavadora de
Mezcla alimento CO2
Jugo Claro
Enfriador de
Miel B Tanque de
Placas
alimento
Mezclador
Báscula
Separador de Vino
Levadura
Tanque de
Agua
Vino
Vino
Mosto Mosto
Fermentador I Fermentador II Fermentador III
Tanque de H2SO4
Vino + levadura
Activación Nutrientes
Levadura Agua
Vinaza Aire
Levadura Levadura
Antiespumante
Agua
Condensador
Livianos hacia columna
Columna
de Aldehídos
desgasificadora
Agua
Livianos
Columna de Aldehídos
Vino
Condensador
Vapor de Alcohol
Vapor de diluido
Despojadora
Alcohol
Columna
diluido
Alcohol
Fusel Liviano Rectificado
Vinaza
Rectificadora
95%
Columna
Vino
Vapor
Fusel Pesado Alcohol Rectificado
Calentador (95%) Sobrecalentador
de vino
Vapor de
Rehervidor Alcohol
flubex
Vinaza de vinaza recuperado
Condensados a
tratamiento
Flemazas
Vinaza
Columna
a
Evaporador
Molec
ular 1
Molec
ular 2
Tamiz
Tamiz
a flubex
Vapor
Evaporador
Vapor de Vapor de Condensados a
Flubex flubex flubex tratamiento
Vapor
Alcohol Anhidro
Separador Separador (99.5 % v/v)
Alcohol Rectificado
(95%)
Flemazas
Evaporador Evaporador Precalentador
Alcohol Rectificado
(95%)
Vapor Vapor
Condensados Tanque
Condensados Tanque
Vinaza Vinaza
concentrada concentrada
Adecuación de materias prima
Mezcla alimento
Jugo Claro
Meladura Tanque
Tanque de
Miel B
alimento
Enfriador
Mezclador
Báscula
Fermentación Agua
Mosto Mosto
Fermentador Fermentador Fermentador
I II III
Mosto final
Vinaza
Levadura
Fermentación CO2 a la atmósfera
Agua de lavado
CO2 a lavador
Vino + levadura
Vino
Separador de
Levadura
Tanque
de
Vino
Vino
7-9 %v/v
Tanque de H2SO4 EtOH
Activación Nutrientes
Levadura Agua
Aire
Antiespumante
Levadura
Composición de las mieles
• Agua : 20-30%
• Solidos :70-80%
20-30%
40%70-80%
RENDIMENTO DA
Rendimiento en fermentación
FERMENTAÇÃO
Perfil de crecimiento
Balance estequiométrico
H
C 12 H 22 O 11 + H 2O +
→ 2C 6 H 12 O 6
C 6 H 12 O 6
→ 2C 2H 5OH + 2CO 2
∆
180 92 44
1 0,51 0,24
Fermentación
Glucosa +
Fructuosa Levadura Etanol Gas Carbónico
C6H12O6 --------> 2C2H5OH + 2 CO2 + calor
180 gr 2 (46) gr + 2(44) gr
Acción Efecto
El tiempo de retención y la higiene de los equipos permiten
Extracción y manejo del jugo
crecimiento de bacterias y formación de ácidos.
El tiempo de retención y la adición de químicos deciden el
Clarificación de jugos
crecimiento de bacterias y la formación de ácidos.
www.praj.net
Evidencia de la acidez
Los ácidos lácticos y acéticos son tóxicos para la
levadura en concentraciones de 1-4% (peso/vol.) Y 0.05-
0.9% (peso/vol.), respectivamente (Makanjoula, 1992)
El ácido acético producido durante la fermentación
heterolactica por si solo no causa la inhibición de la
levadura (Huango,1996); pero el ácido láctico y el ácido
acético actúan sinergeticamente para inhibir el
crecimiento de la levadura (Moon, 1983).
Debido a que estos no se disocian como los ácidos
orgánicos, se convierten en antimicrobicidas (Abrid-
Parque, 1980)
Los Lactobacilos metabolizan concentraciones
comprendidas entre 100-250 mg/L. Para
concentraciones por encima de 500 mg/L, se produce
un efecto tóxico.
Contaminación bacteriana
Tamaños:
Cocos: 0,5 A 1 µM
Bacilos:
Ancho: 0,3 A 1 µM
Largo: 1 A 5 µM
Bacterias ácido lácticas
Cocos o bacilos
Gram postitivas
Anaerobias, microaerofílicas
Producen ácido láctico a partir de
metabolismo de azúcares
Algunos producen etanol y/o
polisacáridos
Bacterias ácido lácticas
son las más frecuentes en la
fermetación
Rápida reproducción (10 a 30 min)
Tolerancia a la temperatura (optimo
45°c)
Resistentes a bajos pH (acidófilas)
Bacterias ácido lácticas
TIPO DE
EJEMPLOS
FERMENTACIÓN
L. delbruechii
Homofermentativas
L. acidophilus
obligadas
P. damnosus
Heterofermentativas L. plantarum, L. casei
Facultativas L. pentosus, L. Sake
Heterofermentativas L. brevis, L. Buchneri
obligadas L. fermentum
Bacterias ácido lácticas
Lactobacillus plantarum
Lactobacillus fermentum
Bacullus subtilis
Bacilllus stearothermophilus
Leuconostoc mesenteroides
Bacterias ácido lácticas
Bacillus coagulans
Bacillus cereus
Bacillus subtilis
Bacillus stearothermoplilus
Bacillus liqueniformis
BIBREC, 1992
Inactivación de esporas
CELULA
ESPORAS
BACTERIA VEGETATIVA
Hasta Hasta minutos
B. subtilis 50°C 100°C 15 - 20
95°C 13.7
B coagulans 55°C
117°C 0.05
B. licheniformis 35°C 95°C 5.1
B. stearothermophilus 65°C 117°C 4 - 5
B. thermosaccharolyticum Termofila 117°C 3-4
B. nigrificans Termofila 117°C 2 - 3
Bacterias acéticas
Las bacterias acéticas de la especie:
Acetobacter y Gluconobacter son muy similares
morfológicamente con idénticas formas, se tiñen
con la coloración de Gram y tienen motilidad
característica.
Acetobacter Gluconobacter
Gram negativas. Cel. Alargadas Gram negativas. Cel. Alargadas
Metabolismo de carbohidratos Metabolismo de carbohidratos
Rendimiento a ácido acético Rendimiento a ácido acético
Prefiere alcohol como sustrato Prefiere el azúcar como sustrato
Oxida acetatos a CO2 y agua No oxida los acetatos
Funciona HMP y TCA Funciona HMP
Requerimientos simples para crecer Complejidad para su crecimiento
HMP: Hexose monophosphate Pathway
TCA: Tricarboxilic acid cycle
Levaduras nativas
“Cualquier
levadura
desconocida o
contaminante
que aparece en el
proceso de
fermentación”
Levaduras salvajes
Floculación
Formación de
espuma
Altos residuales
en los vinos
Inhibición por
competencia
Actividad Killer
Levaduras salvajes
• Saccharomyces cerevisiae • Schizosaccharomyces pompe
Formación de espuma
80 0,6
% LEVEDURAS
g/L ÁLCOOL
60 0,5
40 0,4
20 0,3
0 0,2
18 40 87 108 150 176 197
DIAS
LEVEDURA SELECIONADA SELVAGENS ANTIESPUMANTES
Antibióticos
Mecanismos de acción:
Los agentes antimicrobianos actúan por una
serie de mecanismos, muy diferentes entre
ellos y cuyos blancos se encuentran en
diferentes regiones de la célula atacada.
Pared bacteriana
Membrana bacteriana
Síntesis de proteínas
Síntesis de ácidos nucleicos
Mecanismo de acción
Otros compuestos para el control del
crecimiento de bacterias lácticas
Características
Compuesto Referencias
químicas
Dicarbonato de Threlfall y Morris
(CH3OCO)2O
dimetilo (DMDC) Divol
Ácido gálico
(+)-Catequina
Derivados del
Ácidos del lúpulo Betatec
Lupulo
Sanitización
Programa de sanitización y limpieza