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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829 Junio de 2020

Aplicar microorganismos en procesos de descontaminación ambiental


Biotecnología ambiental
Artículo de proyecto de biotecnología

_________________________________________________
Biorremediación de suelos contaminados con
Furadan por la bacteria Pseudomona sp.
50432 y el uso de la metodología de
Bioventilación, buscando alternativas para
sustituir el uso de este microorganismo en
particular.
Bioremediation of soils contaminated with
Furadan by the bacterium Pseudomona sp
50432 and the use of the Bioventilation
method, looking for alternatives to replace the
use of this particular microorganism.
Betancourth, Hernando1
Buritica, Andrés Julián1
Gaviria, Brian1
Londoño, Juan Carlos1
Moreno, Natalia Jesenia1
1
Aprendices SENA
Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829

Instructor
Rios, Juan Felipe

Servicio Nacional de Aprendizaje, Centro de diseño Tecnológico Industrial, Programa de


Tecnología en Control Ambiental.

Junio de 2020

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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829 Junio de 2020

RESUMEN

Como proyecto de biorremediación en nuestro Tecnólogo en Control Ambiental y para la


competencia de aplicar microorganismos en procesos de descontaminación ambiental,
elegimos el Furadan, este compuesto es un carbofurano, de la familia de los N-
metilcarbamatos, es un plaguicida ampliamente utilizado en el sector agrícola para el control
de plagas, este compuesto y producto químico es altamente tóxico, la ineficacia en su
aplicación y la sobreutilización causan gran deterioro en los suelos agrícolas, así como
graves impactos negativos en los ecosistemas y en la salud humana. Esto crea un
xenobiótico que es una sustancia química que no se produce naturalmente en los
ecosistemas y que no debería estar presente en el medio ambiente. En este artículo
científico investigamos sobre la biorremediación, la cual aparece como una alternativa para
biodegradar este plaguicida tóxico en compuestos más simples y poco contaminantes,
usando el potencial metabólico de los microorganismos. Por lo antes mencionado, el
objetivo de este proyecto de biotecnología fue descubrir los microorganismos, como lo son
las bacterias que están presentes en la biorremediación de los carbofuranos (Furadan)
usados en suelos cultivables por medio de una revisión sistemática de la literatura científica
de fuentes de información confiable y los aportes del señor instructor Juan Felipe Rios,
biólogo del SENA con la guía de aprendizaje de biotecnología y el enlace proporcionado de
la Universidad de Minnesota sobre la base de datos de las vías de degradación metabólica
de los diferentes contaminantes del medio ambiente a nivel mundial y los procesos físico-
químicos alternativos como por ejemplo la bioventilación y sus subprocesos consiguientes
como lo son la bioaumentación y la bioestimulación, cuando no se cuenta con una bacteria
en particular debido a circunstancias que están fuera de nuestro control. La bacteria que
identificamos para la biorremediación del Furadan en suelos agrícolas contaminados fue la
Pseudomona sp. 50432. Concluimos que el éxito de esta biorremediación depende en su
totalidad de la capacidad competitiva de la bacteria Pseudomona sp. 50432, de la
biodisponibilidad de los microorganismos nativos del suelo contaminado a biorremediar y la
concentración del plaguicida Furadan, del pH, la temperatura, la humedad, el tiempo
requerido para la bioaumentación y la bioestimulación y el tipo de suelo, también el
suficiente oxigeno disponible, los nutrientes y la concentración del inóculo, ósea, el
microorganismo que se transfiere al suelo contaminado por medio de la inoculación.

PALABRAS CLAVE: Furadan, suelo, xenobióticos, biorremediación, Pseudomona sp.


50432, bioventilación.

ABSTRACT

As a bioremediation project in our Environmental Control Technologist and for the


competence of applying microorganisms in environmental decontamination processes, we
chose Furadan, this compound is a carbofuran, from the family of N-methylcarbamates, it is
a pesticide widely used in the sector agricultural for pest control, this compound and
chemical is highly toxic, ineffective in its application and overuse cause great deterioration
in agricultural soils, as well as serious negative impacts on ecosystems and human health.
This creates a xenobiotic that is a chemical that does not occur naturally in ecosystems and
should not be present in the environment. In this scientific article, we investigate
bioremediation, which appears as an alternative to biodegrade this toxic pesticide into

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simpler and less polluting compounds, using the metabolic potential of microorganisms. For
the aforementioned, the objective of this biotechnology project was to discover
microorganisms, such as bacteria that are present in the bioremediation of carbofurans
(Furadan) used in cultivable soils by means of a systematic review of the scientific literature
on sources of reliable information and the contributions of the instructor Juan Felipe Rios,
biologist from SENA with the biotechnology learning guide and the link provided by the
University of Minnesota on the basis of data on the pathways of metabolic degradation of
the different environmental pollutants worldwide and alternative physical-chemical
processes such as bioventilation and its consequent threads such as bioaugmentation and
biostimulation, when there is no particular bacterium due to circumstances that are beyond
our control. The bacterium that we identified for the bioremediation of Furadan in
contaminated agricultural soils was Pseudomona sp. 50432. We conclude that the success
of this bioremediation depends entirely on the competitive capacity of the bacterium
Pseudomona sp. 50432, on the bioavailability of the native microorganisms in the
contaminated soil to bioremedy and the concentration of the pesticide Furadan, on the pH,
temperature, humidity, the time required for bioaugmentation and biostimulation and the
type of soil, also sufficient available oxygen , the nutrients and the concentration of the
inoculum, bone, the microorganism that is transferred to the contaminated soil through
inoculation.

KEY WORDS: Furadan, soil, xenobiotics, bioremediation, Pseudomona sp. 50432,


bioventilation.

INTRODUCCIÒN

Los problemas ambientales no se pueden Trataremos la biotecnología ambiental


analizar ni entender si no se tiene en que está relacionada con la gestión del
cuenta una perspectiva global, ya que medio ambiente, con el aprovechamiento
surgen como consecuencia de múltiples de los recursos naturales y la mejora en
factores que interactúan entre sí. Nuestro los procesos de biodegradación para
actual modelo de vida supone un gasto de compuestos contaminantes.
recursos naturales y energéticos cada vez Para eliminar estos xenobióticos
más creciente e insostenible, así mismo el presentes en el medio ambiente se
continuo uso de contaminantes que realizan acciones con el objetivo de
producen compuestos llamados prevenir, mitigar o eliminar estos
xenobióticos que impactan negativamente compuestos tóxicos de los sistemas
el medio ambiente como por ejemplo biológicos.
plaguicidas, insecticidas, nematicidas, En este artículo científico describiremos el
fungicidas y herbicidas de todo tipo. Las problema en detalle, identificaremos las
formas y técnicas agrícolas de causas y las consecuencias del problema,
producción y consumo masivos de hablaremos sobre los antecedentes
alimentos que lo hacen posible están biotecnológicos del problema de la
generando de manera progresiva la contaminación con este plaguicida,
destrucción del planeta, la contaminación repasaremos la metodología de
es uno de los problemas ambientales que biorremediación ambiental y
más impactan y afectan a nuestro mundo. subrayaremos los objetivos y la
(Frers, 2010)1. justificación del proyecto.

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Primero identificamos un problema de acabando con la biodiversidad. Otros


contaminación del suelo, con el uso, a nombres comerciales del Furadan son:
veces ineficaz y sobreutilizado del Bay 70143, Carbodan, Carbosip,
Furadan. Chinofur, Curaterr, D 1221, ENT 27164,
El Furadan es un pesticida agrícola Furacarb, Kenafuran, Pillarfuron,
común que pertenece a la familia del N- Rampart, Nex y Yaltox. La
metilcarbamatos. Se utiliza para controlar sobreutilización del Furadan puede
los insectos que viven en el suelo y se causar un gran deterioro en el suelo
alimentan de las hojas. Tiene una alta donde se hace su aplicación,
toxicidad en los mamíferos debido a la desafortunadamente los beneficios
inhibición de la acetilcolinesterasa, es un aportados por estos compuestos han
plaguicida neurotóxico. Se ha informado ido acompañado de graves daños,
que el valor oral de LD50 del carbofurano algunos de ellos tan graves que ahora
en ratones y otros animales varía de 2 a 9 representan una amenaza para la
mg / kg de peso corporal. supervivencia de importantes
Es comercializado por FMC Corporation y ecosistemas a largo plazo.
Curater, entre otras empresas. Está Existen tecnologías utilizadas para
prohibido en varios países como Canadá, recuperar suelos contaminados entre los
U.S.A., la Unión Europea, Brasil, Ecuador, cuales se encuentra la biorremediación
Argentina, Kenia y otros países de África. como una alternativa, esta aprovecha el
Es usado en gran variedad de cultivos potencial metabólico de los
como por ejemplo la caña de azúcar, microorganismos para transformar
maíz, sorgo, café, cereales, arroz, frutas y contaminantes orgánicos en compuestos
hortalizas y otros. más simples.
Este producto se comercializa desde los
años 60`s en U.S.A. y en los años 80’s se 1
www.ecoportal.net
expandió su uso a otros países.
Se vende en forma granular y liquida Figura 1. Estructura química del
siendo la forma granular prohibida Furadan (Carbofurano).
totalmente en varios países por ser
peligroso para las aves y la cadena trófica,
la versión granular tiene en la etiqueta la
palabra “PELIGRO” y la versión liquida la
palabra “PRECAUCIÓN”. Dado que es
soluble en agua y móvil en los ambientes
del suelo, es muy probable que contamine
los lagos y el agua subterránea, por lo que
una exposición peligrosa es beber agua
contaminada. Debido a esto, es
importante encontrar formas de
biodegradarlo.
El Furadan es usado para el control de
plagas de insectos en abundante
variedad de cultivos. Son sustancias
https://www.google.com/imgres?imgurl=https
químicas altamente toxicas, liposolubles y %3A%2F%2Fc8.alamy.com%2Fcompes%2Fd65
volátiles, características que facilitan su 32y%2Fel-carbofurano-molecula
absorción y causan graves daños para la
salud humana y el medio ambiente Formula C12H15NO3

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MATERIALES Y MÈTODOS buscando microorganismos alternativos


que usen la enzima hidroxilasa u otra
En este proyecto de biotecnología, bajo enzima, incluso si esta enzima no puede
una revisión sistemática, se fundamentó ser identificada, en el caso que la bacteria
entre otras un tipo de bacteria que realiza pseudomona sp. 50432 no esté disponible
la degradación del Furadan en suelos para ser usada en el momento de la
contaminados, identificando la especie de biorremediación in situ, incluso dado que
bacteria que participa en la se administra un organismo que puede
biorremediación del plaguicida en el iniciar la vía, pero otros organismos
suelo. De acuerdo a la información también pueden llevar a cabo pasos
recopilada en la ruta degradadora del posteriores. (Junfeng Gao et al, 2008)2.
compuesto, extraída del enlace de la _________________________________
2
Universidad de Minnesota suministrada http://eawagbbd.ethz.ch/cbf/cbfmap.ht
por el instructor líder Felipe Rios con la
base de datos de las vías de degradación
metabólica, se analizó una bacteria ETOLOGÍA DEL MICROORGANISMO
usada para la degradación del PSEUDOMONA SP. 50432
Furadan, la pseudomona sp. 50432 es
capaz de hacer la biorremediación del La Pseudomona sp. 50432, es una
Furadan (carbofurano) a la posición bacteria genéticamente alterada en
4-hidroxicarbofurano y nos muestra como laboratorio, pertenece a un género de
transforma el xenobiótico mediante un bacilos rectos o ligeramente curvados,
mecanismo que involucra procesos Gram negativos, oxidasa positivos,
oxidativos e hidrolíticos y biodegrada aeróbicos estrictos, vemos la presencia
el compuesto contaminante usando la de plásmidos y no forman esporas.
enzima hidroxilasa, la cual es una enzima
oxidorreductasa y a partir de aquí degrada Taxonomía
el 4-hidroxicarbofurano en dióxido de
carbono (CO2), usando una enzima que  Dominio: Bacteria
aún no ha sido identificada incluso por la  Filo: Proteobacteria
biotecnología.  Clase: Gammaproteobacteria
En la revisión sistemática descubrimos  Orden: Pseudomonadales
que se usa también la técnica de la  Familia: Pseudomonadaceae
bioventilación y sus procesos  Género: Pseudomonas
subsecuentes, que son la bioestimulación
y la bioaumentación, donde se adiciona
oxígeno y nutrientes al suelo con la RESULTADOS Y DISCUSIÒN
modalidad in situ mediante bombeo a
presión en la zona vadosa (no saturada) y A los efectos negativos del Furadan como
bajo las condiciones idóneas de pH, por ejemplo los impactos que genera en
temperatura, humedad, poblaciones los ecosistemas biológicos, las aguas
microbianas nativas aptas y tiempo superficiales y subterráneas, el suelo y la
requerido para la bioestimulación y la biodiversidad, también debemos tener en
bioaumentación, se toma muestras de cuenta los efectos negativos en la salud
suelo y se analiza e identifica los humana. Sabemos que están expuestos a
microorganismos que comienzan un intoxicación personas que laboran en la
proceso de biodegradación del fabricación y venta, agricultores que
compuesto contaminante presente, en manipulan y aplican Furadan y
este caso de estudio, el Furadan y

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consumidores de vegetales tratados con


este producto.
El Furadan (carbofurano) actúa sobre el
sistema enzimático colinesterasa, dando
lugar a alteraciones en la transmisión de
los impulsos nerviosos en casos de
ingestión y exposición prolongada.
En el caso de Colombia, los plaguicidas
Oxidorreductasa
inhibidores de colinesterasa (carbamatos)
son el grupo de insecticidas más
utilizados en el control de plagas. En el
2005 se notificaron en Colombia 4.234
casos de intoxicación causados por
plaguicidas, la gran mayoría de los cuales
ocurrió por los inhibidores de
colinesterasa (Vásquez 2010).
Para el primer objetivo, se buscó la
información que diera cuenta de las
características químicas, el mecanismo
de acción y la vida media del Furadan.
Esta información se encontró en fuentes
de información confiable, como lo es el
enlace con la Universidad de Minnesota,
donde está la base de datos con las vías
de degradación metabólica para
diferentes sustancias químicas
contaminantes y sus respectivos
microorganismos biorremediadores y se
complementó con otra literatura científica. Oxidorreductasa
Posteriormente, con base en los
resultados de las búsquedas
bibliográficas y el microorganismo
identificado en estas, se describió el
proceso de biorremediación del Furadan
con la bacteria Pseudomona sp. 50432
(ver figuras 2, 3 y 4).

Figura 2. Mapa de ruta de


biodegradación del Furadan por la
Pseudomona sp. 50432 usando la
enzima hidroxilasa (oxidorreductasa).

Figura 3. Biodegradación del Furadan a


la posición 4-hidroxicarbofurano.

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Figura 4. Biodegradación del Furadan CONCLUSIONES


de la posición 4-hidroxicarbofurano a
CO2. En la agricultura a nivel mundial, los
plaguicidas más contaminantes como por
ejemplo los organoclorados (de lenta
degradabilidad y gran bioacumulación)
dieron paso al uso de los carbofuranos
que son altamente tóxicos, de poca
estabilidad química y nula acumulación en
tejidos (Yufra 2013).
El carbofurano más usado es el Furadan,
X elaborado a base de carbamato y es
conocido como un insecticida sistémico y
de contacto, y es catalogado como uno de
los controladores de plagas más tóxicos
CO2 que tenemos en la actualidad (RCN radio,
2018).
http://eawag-bbd.ethz.ch/cbf/cbf_map.html
El Furadan por ser muy usado en el sector
Nota: una "X" junto a una flecha de agrícola también ha sido de los pesticidas
reacción significa que la enzima que más investigados en cuanto a su
cataliza la reacción aún no se ha degradación por microorganismos.
identificada por la biotecnología. Encontramos que la biotecnología está
También tuvimos en cuenta los procesos limitada en la biorremediación del
alternativos cuando no se cuenta con esta Furadan por unos parámetros y factores
bacteria en particular, como lo es la físico-químicos que afectan a los
bioventilación en suelos contaminados y microorganismos y la disponibilidad de
sus subprocesos consiguientes, la carbofuranos (Furadan) como tal.
bioestimulación y la bioaumentación (ver Estos parámetros y factores físico-
figura 5). químicos son por ejemplo, el pH, la
temperatura, la humedad, la
Figura 5. Biorremediacion de suelos concentración del plaguicida, el tipo de
con el proceso de bioventilación. suelo, la presencia o ausencia de
suplementos y nutrientes y la
concentración del inoculo.
La mejor temperatura para degradar el
Furadan se encuentra entre 25 °C y 37 °C,
y la óptima es de 30 °C. El tamaño del
inóculo es un factor determinante, debido
a que los microorganismos exógenos
cuando se añaden al suelo, corren el
riesgo de quedar fuera de competencia
por las comunidades microbianas
autóctonas, en especial por protozoos. La
aplicación del inóculo en cantidades
óptimas no solo aumenta las posibilidades
de éxito de la biorremediación, sino que
también disminuye el costo del proceso
(Hong et al. 2007). Las investigaciones
revelaron que, en el caso de

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suplementación con nutrientes, se identificar algunas de las bacterias,


presenta una degradación más rápida en hongos y consorcios microbianos que
comparación con tratamientos sin adición. pudieron haber estado implicados en la
Esto podría deberse al hecho de que los restauración de los ambientes
carbofuranos sujetos a la acción contaminados cuando se utiliza la
microbiana no generan un crecimiento bioventilación y los subprocesos
sustancial de las poblaciones siguientes, que son la bioaumentación y la
responsables. Por tanto, es probable que bioestimulación.
los microorganismos estén consumiendo Como ya lo dijimos el éxito o el fracaso de
el sustrato fácilmente biodegradable la biorremediación depende de varios
(nutrientes adicionados), mientras factores, tales como la capacidad
degradan el Furadan (Betancur 2013), lo competitiva de los microorganismos, la
que explica la rápida degradación con biodisponibilidad, la concentración del
adición de nutrientes. En cuanto al pH, las compuesto a biodegradar, en este caso
bacterias tienen la capacidad de degradar de estudio es el Furadan, la humedad, el
los carbofuranos en un rango de 5 a 8, con pH, la temperatura del suelo, el tipo de
un pH óptimo de 7. El Furadan es suelo a biorremediar, la presencia o
degradado en mayor porcentaje en pH ausencia de suplementos nutricionales y
ácido. la concentración del inóculo.
Así mismo, cuando usamos la La biotecnología con la biodegradación
bioventilacion, también debemos tener en por microorganismos de los plaguicidas
cuenta estos parámetros y los factores carbofuranos sigue, una ruta principal que
físico-químicos que puedan alterar los es la biodegradación por medio de la
resultados. enzima hidroxilasa que es una
Se encontró que la Pseudomona sp. oxidorreductasa.
50432 es una de las bacterias más Como ya lo dijimos los consorcios
propicias para biodegradar el Furadan, microbianos biorremedian mejor a los
más aun sabiendo que es una bacteria suelos contaminados con Furadan que
modificada genéticamente en laboratorio. una población individual, puesto que un
Además se analizó que estos consorcio actúa con la suma de sus
microorganismos hacen una mejor partes. Las relaciones fisiológicas y
biodegradación en consorcios que biodegradadoras entre los
individualmente. microorganismos permiten que estos
La capacidad degradadora de un coexistan y desarrollen funciones
consorcio microbiano es equiparable con complejas que garantizan la
la sumatoria de la capacidad degradadora biodegradación de sustratos difíciles de
de los microorganismos que lo asimilar en mayores porcentajes para
conforman. Un consorcio puede poblaciones individuales.
desempeñar funciones complejas que Se recomienda investigar con mayor
poblaciones individuales no podrían. profundidad la ruta de degradación del
Se concluye según la revisión sistemática Furadan y los procesos enzimáticos
que en laboratorio solo se pueden aislar llevados a cabo durante la ruta
del 1% al 10% de todos los degradadora con la Pseudomona sp.
microorganismos que crecen en el suelo, 50432 y por otros microorganismos al
razón por la cual algunos utilizar la bioventilación.
microorganismos que interfieren en los Dentro de los consorcios microbianos se
procesos de degradación en ambientes recomienda investigar más a fondo cuáles
naturales no se pueden obtener a escala microorganismos llevan a cabo los
de laboratorio. Por lo tanto, quedan sin procesos oxidativos e hidróliticos en la

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biorremediación del Furadan y cuales la Gina María Hernández Ruiz et al. 2016.
biodegradación completa hasta Biorremediación de organofosforados por
transformarlo en CO2. hongos y bacterias en suelos agrícolas:
revisión sistemática. Recuperado de
http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=
AGRADECIMIENTOS S012287062017000100009&script=sciab
stract&tlng=pt. Consultada junio 3 de
Al SENA CDTI Pondaje, al instructor Juan 2020.
Felipe Rios, instructor líder de la ficha
1903829 del programa Tecnólogo en Cristian Frers. 2010. El tema ambiental es
Control Ambiental por sus aportes al un problema serio… si no se lo encauza.
desarrollo de este proyecto de https://www.ecoportal.net/temasespeciale
biotecnología. A todos los instructores de s/contaminacion/eltemaambientalesunpro
la ficha, Geovanny Adolfo Lugo, Lola blemaseriosinoseloencauza/. Consultada
Viviana Montilla, Julián Naranjo y demás mayo 25 de 2020.
instructores del SENA, porque de cada
uno aprendimos habilidades diferentes de RCN Radio. 2018. El ICA advierte que el
acuerdo a su instrucción y competencia. A compuesto Carbofurano debe ser vendido
todo el personal administrativo y logístico bajo supervisión de expertos. Agosto/
del SENA. 2014.
https://www.rcnradio.com/colombia/el-
ica-advierte-que-compuesto-carbofuran-
REFERENCIAS debe-ser-vendido-bajo-supervision-de-
expertos. Consultada junio 1 de 2020.
Junfeng Gao et al. 2008. Mapa de la ruta
del carbofurano.
http://eawag-
bbd.ethz.ch/cbf/cbf_map.html.
Consultada mayo 26 de 2020.

ANEXOS

Anexo 1

En estos enlaces de internet pueden encontrar la hoja de seguridad del Furadan en algunas
de sus diferentes versiones donde encontraremos su nivel de toxicidad y las medidas de
bioseguridad para su correcto manejo:

http://innovacionagricola.com/wp-content/uploads/2016/10/Furadan-350-L-FICHA-
TECNICA.pdf

http://www.farmagro.com.pe/media_farmagro/uploads/hoja_seguridad/furadan_5g.p
df

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Anexo 2

Imágenes diversas sobre el Furadan y aspectos relacionados con este compuesto y su


biorremediacion usando la biotecnología:

Figura 6 y 7. Furadan en su versión liquida y granulada.

http://www.farmagro.com.pe/p/furadan-4f-pf/ https://spanish.alibaba.com/product-detail/nematode-
pesticide

Figura 8 y 9. Aplicación de plaguicidas y problemática de contaminación.

imgurl=http%3A%2F%2Fwww.capitanplaneta.com%2Fwp
https://www.salyroca.es/media/salyroca/images/2018/03/22//

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Figura 10. Pseudomonas sp. 50432

https://www.google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2Fupload.wikimedia.org%

Figura 11 y 12. Bioventilación de suelos contaminados, bioestimulación y


bioaumentación.

https://es.slideshare.net/MariaAlejandraMejiaM/biorremediacin
google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2F

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