1.3.

1 Resolución
La resolución está dada por las siguientes ecuaciones:

tr y Vr son las diferencias de tiempo de retención y volumen respectivamente entre picos y Wav
es el promedio de la anchura base de ambos picos en sus unidades correspondientes.

Factores que afectan la resolución

Donde N es el número de platos teóricos en la columna, 𝛼 es la retención relativa de los dos picos, es el
factor de capacidad para el componente más retenido y es el promedio de los factores de
capacidad para ambos picos.

1.3.2 Difusión

La constante de proporcionalidad D es el coeficiente de difusión, y el signo negativo se debe a que el flujo neto va
de una región de alta concentración a otra de baja concentración.

Retenci´on relativa o factor de selectividad:

La especie B es mas fuertemente retenida que la especie A, por tanto, 𝛼 siempre va a ser mayor que la unidad.

Altura de plato H : Es una medida de la eficiencia de una columna y viene dado por la ecuación :

Factor de capacidad (K’): Para una especie A:

(1.1)
KA = constante de distribución de la especie A
VS = volumen de la fase estacionaria(analito)

VM = volumen del analito en la fase móvil

 De un cromatograma se puede calcular K’

Reordenando tenemos:

(1.2)

Con esta ecuación se puede calcular para un compuesto A desde un cromatograma.

Tiempo de retención: el tiempo de retención para una especie B viene dada por la siguiente ecuación:

Tiempo de retención ajustado ( :

Para dos sustancias que se desea separar:

Numero de Plato ( N):

El número de plato teórico de una columna con longitud L es:

𝐿 𝐿 𝐿
𝑁= = 𝜎2
= Si hacemos
𝐻 𝜎2
𝑥

ya que

Si expresamos L y W en unidades de tiempo, en vez de longitud N seria adimensional; así obtenemos la expresión
mas útil para N

W1/2 = Anchura de la altura media del pico.

1.4 Velocidades de separación

K = Constante, razón, o coeficiente de distribución.

Cs = Concentración molar del analito en la fase estacionaria.
Cm = Concentración molar del analito en la fase móvil.
Idealmente K debe ser constante en un amplio intervalo de concentraciones, o sea que Cs u Cm

(1.3)
donde V¯ = velocidad lineal media de migración del analito
L = Longitud de la columna

(1.4)
µ = velocidad lineal media de las moléculas de la fase móvil

El factor de capacidad K, para cada uno de los picos en un cromatograma está definido como:

𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑓𝑎𝑠𝑒 𝑚𝑜𝑣𝑖𝑙

𝑉̅ = 𝜇 ∗
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜

(1.5)

1.5 Relación entre tiempo de retención y el coeficiente de partición

La definición del factor de capacidad es equivalente a decir:

Donde tsgfe, tsgfm = tiempo del soluto gastado en la fase estacionaria y tiempo soluto gastado en fase móvil
respectivamente.

Donde Cs es la concentración de soluto en la fase estacionaria, Vs volumen de la fase estacionaria,

Cm, concentración de soluto en la fase móvil y Vm volumen en la fase móvil.

Como entonces,

Como

1.6 Relación entre el tiempo de retención y las constantes de distribución

V¯ = µ x fracción de tiempo que el analito reside en la fase móvil

 Como entonces:

1.9 Bases físicas de la cromatografía

Debido a que la retención relativa (𝛼) puede ser expresada como:

1.9.1 Eficiencia
La desviación estándar de una banda 𝜎 = √2𝐷𝑡.
De donde D = coeficiente de difusión; t = tiempo

Si un soluto viaja a una distancia x a una velocidad de flujo lineal el tiempo que gasta este al viajar por una

columna seria: , por lo tanto:

1.9.2 Ecuación de Van Deemter

(1.7)
H= altura de plato en cm
A= termino de los múltiples pasos, factor de tortuosidad, o difusión de Eddy.
Cux = termino de transferencia de masas, es decir tiempo finito requerido para que el soluto alcance el equilibrio
entre la fase móvil y la fase estacionaria.

µx = velocidad lineal de la fase móvil .

B = difusión longitudinal.

La altura de plato debido al termino de transferencia de masa es: K’= factor de capacidad ;d = espesor de la fase
estacionaria; D = coeficiente de difusion del soluto en la fase estacionaria.

Constante Rf

x= distancia recorrida desde el origen por el compuesto de interes.

f = distancia recorrida por el frente del solvente.
1.10 Ejercicios

1. Considere un experimento cromatografico en la cual dos componentes con factores de capacidad de 4,0 y
5,0 respectivamente, son inyectados en una columna con 1 x 103 platos teoricos. El tiempo de retencion
para el compuesto menos retenido es tr1= 10,0 min.

a)Calcular el tm y tr2
b) Encontrar W1/2 y W
c)Calcular la resoluci´on de los dos picos.

Rta.
a)tm = 2 min.; tr2 = 12 min.
b)w2 = 1,52 min. ;W1 = 1,26;w1/2 pico 1 = 0,74;w1/2 pico 2 = 0,89
c) Resoluci´on = 1,44

2. La retencion relativa de dos compuestos en cromatografıa de gas es 1,068 en una columna con una altura
de pico de 0,520 mm. El factor de capacidad para el compuesto 1 es 5,16.
a)¿Cual serıa la longitud de la columna requerida para separar los compuestos con una resolucion de 1?
b) El tiempo de retencion para el aire en la columna(a) es de 2.0 min. Si el numero de platos es el mismo
para ambos compuestos. Encontrar los tiempos de retencion y la anchura de cada uno de los picos.
c) Si la razon fase estacionaria fase movil es 0,30, encontrar el coeficiente de particion para el componente
1.

Figura 1.6: Aplicacion de la ecuacion de Van Deemter en cromatografıa de gas

 Figura 1.7: Isotermas comunes y formas de las bandas

Figura 1.8: Silanizacion

Rta.
a) L = 2,71 m
b) tr1 = 12,32 min. ; tr2 = 13,02 min. ; W1 = 0,68 min. ; W2 = 0,72 min.
c) K = 17

3. Las areas de picos obtenidas por cromatografıa de gases para una mezcla de acetato de metilo, propionato
de metilo y n-butirato de metilo fueron 17.6, 44.7 y 31.1 respectivamente. Calcular el porcentaje de cada
compuesto si las respectivas respuestas de deteccion relativa fueron 0.65, 0.83 y 0.9