Taller de Instrumental II

Osma Camilo Ordoñez. 1089556449

Profesor: Jhon Jairo Ríos

1) Defina:
A: la elución es el proceso de extraer un material de otro lavando con un solvente; como
en el lavado de resinas de intercambio iónico cargadas para eliminar los iones capturados.
B: y C: La cromatografía es un método físico de separación en el cual los componentes a
separar se distribuyen entre dos fases, una que es estacionaria (fase estacionaria)
mientras que la otra, (la fase móvil) se mueve en una dirección determinada.
D: La constante de distribución es la concentración de un compuesto en o sobre la fase
estacionaria, dividida por su concentración en la fase móvil.
Constante de distribución (Kc) En el caso general, la concentración en la fase estacionaria
se expresa en relación al volumen de fase. Este término se aplica fundamentalmente a la
cromatografía de reparto con una fase estacionaria líquida, aunque también se puede
utilizar con una fase estacionaria sólida:

Constante de distribución (Kg) En el caso de una fase estacionaria sólida, la constante de

distribución se puede expresar en relación a la masa (peso) de la fase sólida seca:

Constante de Distribución (Ks) En el caso de la cromatografía de adsorción, con un

adsorbente bien caracterizado y de superficie conocida, la concentración en la fase
estacionaria se puede expresar en relación con la superficie.

E: Tiempo de Retención (tR): En cromatografía líquida y cromatografía de gases, el tiempo

de retención, tR, se define como el tiempo transcurrido entre la inyección de la muestra y
la aparición de la respuesta máxima
F: el factor de retención (K):  es la relación entre la cantidad de tiempo que un analito
pasa en la fase estacionaria y el tiempo que el analito pasa en la fase móvil
G: El factor de selectividad se describe como el grado de separación de dos componentes
(A y B) en la columna: Para aplicar la fórmula, el componente A debe eluir antes que el B.
Por tanto, el factor de selectividad es siempre mayor que uno.
 H: La altura del plato H, es la distancia que el soluto se mueve mientras se lleva a cabo un
reparto. La altura del plato es una buena forma de expresar la eficiencia de la columna en
unidades de longitud, sin especificar la longitud de la columna.
I: La difusión longitudinal, movimiento molecular aleatorio dentro de la fase móvil es un
segundo proceso que produce ensanchamiento del pico. La contribución de la difusión
longitudinal a la altura del plato es significativa sólo a velocidades bajas de fase móvil.
J: Difusión en remolino se evidencia cuando las moléculas en disolución pueden atravesar
la columna siguiendo trayectorias de distinta longitud con tiempos de retención
diferentes; es directamente proporcional al diámetro de las partículas que componen el
relleno de la columna y no se ve afectada por la velocidad de difusión de la fase móvil,
cuando éstas son suficientemente altas.
K: La resolución indica la capacidad de una columna para separar los picos de interés.
Sobre la resolución influyen la eficiencia (N), la selectividad (α) y la retención (k). Debe
tener como mínimo un valor igual a 1 para que se produzca una separación medible y se
pueda realizar una cuantificación adecuada
L: el eluyente, es un solvente o mezcla de solventes usados para mover los compuestos a
través de la columna.
2) Describa el problema general de la elución
En muestras complejas de un gran número de componentes, en muchas ocasiones resulta
difícil encontrar unas condiciones experimentales únicas que consigan la resolución de
todos los picos de los analitos y además permitan la perfecta cuantificación de los mismos.
Una solución frecuente consiste en cambiar las condiciones que afectan a k mientras tiene
lugar la separación. En cromatografía de líquidos se recurre a variaciones en la
composición de la fase móvil durante la elución (elución en gradiente). En cromatografía
de gases, el incremento de temperatura permite conseguir las condiciones óptimas para
las separaciones

3) Enumere las variables que originan el ensanchamiento de banda en cromatografía.

En la columna el ensanchamiento se produce por:
1: diámetro de partícula grande para fases estacionarias
2: columna de grandes diámetros
3: altas temperaturas (importantes solamente en GC)
 4: para líquidos fases estacionarias, gruesas capas del líquido inmovilizado
5: caudales muy altos o muy bajos
4) Que variables tienen más probabilidad de afectar al factor de selectividad
correspondiente a un par de analitos
Las variables que afectan el factor α selectividad incluyen la composición de la fase móvil,
la temperatura de la columna, la composición de la fase estacionaria, y químicas
interacciones entre la fase estacionaria y uno de los solutos están separados.
5) Explique de que manera se puede manipular el factor de retención de un soluto
En GC, el factor de retención se varía mediante el cambio de la temperatura de la columna
como se hace en la programación de la temperatura. En LC, las variaciones se logran
mediante la alteración de la composición del disolvente como en el gradiente de elución
6) Por qué el mínimo en la gráfica de la altura de plato frente a tasa de flujo se encuentra a
tasas de flujo menores en cromatografía de líquidos que en cromatografía de gases
Difusión longitudinal es mucho más importante en GC que en LC. Difusión
longitudinal es una gran contribución a H a velocidades de flujo bajas. Los descensos
iniciales de H en tramos de altura de la placa frente a la velocidad de flujo son, pues, en
gran parte el resultado de la difusión longitudinal. Debido a que los coeficientes de
difusión gaseosa son órdenes de magnitud más grande que los valores de
líquidos, el fenómeno se hace evidente a velocidades de flujo más altas en GC que en LC.
El mínimo a veces no se observa en todos en LC.
7) Qué es la elución con gradiente
La elución en gradiente es un método de llevar a cabo cromatografía de líquido en el que
la composición de la fase móvil se cambia continuamente o en pasos con el fin de
optimizar las separaciones
8) Qué efecto causaría en un pico cromatográfico introducir la muestra a una velocidad
demasiado baja
Daria lugar al ensanchamiento de la banda
9) Los siguientes datos corresponden a una columna cromatográfica de líquidos

Un cromatograma de una mezcla de las especies A, B, C y D proporciona los siguientes

datos:

A: Numero de platos para cada pico.

 B: La media y desviación estándar
de N

C: Altura del plato y de columna

10) Con los datos del problema 9 calcule para A, B, C y D

A: Factor de retención
B: Constante de distribución

11) Con los datos del problema 9 calcule para las especies B Y C.
A: La resolución
B: El factor de selectividad
 C: La longitud de
columna
necesaria para
separar las dos especies con una resolución de 1.5.
D: El tiempo necesario para separar las dos especies con una resolución de 1.5.

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