Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Carreras: Farmacia
Profesorado en Química
Licenciatura en Química
Licenciatura en Alimentos
ÁCIDOS NUCLEICOS
un nucleótido
un nucléosido
un puente hidrógeno
un extremo 3´
un extremo 5´
una desoxirribosa
b) ¿Qué peso molecular promedio tiene un DNA de cadena doble de 150 pares
de bases de longitud? (PM promedio de un nucleótido: 330)
1
4) ¿Cuál de las siguientes cadenas tiene la menor temperatura para la
separación de las hebras y por qué?
a) AGTTGCGACCATGATCTG
TCAACGCTGGTACTAGAC
b) ATTGGCCCCGAATATCTG
TAACCGGGGCTTATAGAC
2
15) La longitud de un gen es de 1650 nm. Calcule el peso molecular de la
proteína que codifica y el número de bases del ARNm codificante de dicha
proteína.
18)
A260
2
1
Temp.
Señale V o F:
- Ninguna de las tres moléculas puede ser degradada por una RNAsa.
- Las tres moléculas tienen igual temperatura de fusión (Tm) porque tienen la
misma longitud.
- Las dos hebras de cada una de ellas son antiparalelas.
- Tm a Tm b Tm c
- Tm b Tm a Tm c
- Tm c Tm b Tm a
3
- Tm a Tm c Tm b
Justifique.
21) Usted recibe una muestra de material genético de origen viral para su
estudio químico y estructural. La muestra presentó las siguientes
características: Fue totalmente insensible a NaOH 0,5 mM, el tratamiento con
una endonucleasa produjo un solo fragmento de masa molecular 8 105 Da y al
elevar la temperatura por encima de la temperatura crítica se produjo un
marcado aumento de la absorbancia a 260 nm. Con los datos precedentes
caracterice tanto como le sea posible a la muestra justificando en cada caso su
respuesta.
22) Usted recibe una muestra de material genético de origen viral para su
estudio químico y estructural. La muestra presentó las siguientes
características: Fue totalmente hidrolizada en NaOH 0,5 mM, el tratamiento con
una endonucleasa produjo un solo fragmento de masa molecular 2 106 Da y al
aumentar la temperatura por encima de la temperatura crítica no se observaron
variaciones sustanciales en la absorbancia a 260 nm. Con los datos
precedentes, caracterice tanto como le sea posible la muestra justificando su
respuesta.
24) Usted recibe una muestra de material biológico desconocido que presenta
4
las siguientes propiedades: dio negativa la reacción de biuret, no reaccionó con
periodato, no fue afectada por tratamiento con NaOH 0,5 mM, presentó un pico
de absorbancia a 260 nm, al calentar la muestra hasta 80ºC la A260 aumentó 5
veces con un punto de inflexión para la curva de aumento de absorbancia a los
56ºC. Caracterice lo más posible la muestra recibida en base a sus
propiedades. Fundamente su respuesta.
25) Usted recibe una muestra de material biológico desconocido que presenta
las siguientes propiedades: dio negativa la reacción de biuret, dio positiva la
reacción de periodato originándose grupos aldehídos, fue totalmente
degradado por tratamiento con NaOH 0,5 mM, al calentar la muestra hasta
80ºC la A260 no presentó variaciones significativas. Caracterice lo más posible
la muestra recibida en base a sus propiedades. Fundamente su respuesta.
3’
Calcule la masa molecular y la longitud de la muestra. Teniendo en cuenta la
estructura anterior ¿cómo esperaría usted que reaccionara la muestra frente a:
los álcalis, exo y endonucleasas y aumentos de temperatura? Si la proporción
de A es 17%, ¿cuál sería la composición de bases de la muestra?
27) El DNA de una mutante del bacteriófago lambda tiene una longitud de 15 µ
en vez de 17 µ. Una solución de dicho DNA presentó una A260 de 0,5. Por
calentamiento de dicha solución a 90ºC la A260 fue de 1,5. Este aumento de
absorbancia también fue observado cuando el DNA mutante se sometió a un
tratamiento con NaOH. La composición de las bases nitrogenadas de una de
las hebras del DNA del mutante es de 30 % adenina y 24 % guanina. Una
porción de la secuencia nucleotídica de este DNA fue la siguiente:
5’-GATCAAACGCGTTCGAACTACCAT-3’
a) Escriba en el sentido 5’-->3’ la secuencia de bases complementaria a la
secuencia indicada.
b) Calcule la Tm de la secuencia descripta considerando que por cada adenina
presente en la secuencia debe sumar 2ºC y por cada guanina 4ºC.
c) ¿Cuántos pares de bases menos tiene el DNA mutante respecto al DNA
original del bacteriófago lambda?
d) ¿Cuál es el porcentaje de C+T del DNA mutante?
5
TRATAMIENTO A B C
NaOH 0,5 mM Insensible Insensible Insensible
Exorribonucleasa Insensible Insensible Insensible
Exodesoxirribonucleasa Hidrólisis total Insensible Insensible
Endorribonucleasa Insensible Insensible Insensible
Endodesoxirribo-nucleasa 3 fragmentos 1 fragmento 1 fragmento
PM: 3, 6 y 8 104 PM 17 104 PM 8 104
Contenido de bases A, T, C, G. A, T, C, G. A, T, C, G.
%G= 20 %G= 32 %G= 60
Efecto hipercrómico Sí Sí No
A260 3
Temperatura
6
RESPUESTAS
1) b) 150 x 2 x 330 = 99.000
2) 31835000
3) a , c , b .
4) Tiene menor temperatura la a, porque la b presenta una zona unida muy
fuertemente por los pares CG seguidos y entonces se debe aumentar más la
temperatura para separar las hebras.
5) cadena complementaria: T = 31,5 %, G = 23,7 %, A = 17 %, C= 27,7 %.
Doble cadena: A = 24,25, C = 25,7, T = 24,25, G = 25,7.
6) Nos dice que es un DNA simple hebra, ya que no presenta porcentajes
iguales de A y T, y C y G.
7) 30%.
8) Asumo doble hebra: 32 % A, 32 % T, 18 % C,18% G.
17 % A, 17 % T, 33 % C, 33 % G. Este es el DNA de la bacteria termofílica,
porque tiene un mayor porcentaje de pares de bases CG que forman mayor
número de puentes de hidrógeno, que le dan más estabilidad y aumentan la
temperatura.
9) 9,4 10 -4g
10) 5882 pares de bases.
11) 372. Puede ser mayor, porque se necesitan nucleótidos para indicar los
codones de iniciación y terminación, etc.
12) 44440, 1212 nucleótidos
13) 4545 pares de bases, 1515 aminoácidos
14) 68750, 0,6375 µm
15) 177941, 4853 bases
16) Porque al ser mayor el número de pares de CG. esa doble hélice está
mucho más estabilizada por la mayor cantidad de puentes de hidrógeno y por
lo tanto se va a requerir una temperatura mayor para desestabilizarla.
17) a) La absorbancia disminuye al enfriar, ya que el DNA se renaturaliza
porque las dos hebras no se separaron totalmente.
b) La absorbancia no cambia porque el DNA no se puede renaturalizar.
c) poli AT, poli CG, DNA circular.
18) Sólo es verdadero la c.
19) (A+T)2 + (G+C)4 = Tm
a) 8x2 + 4x4 = 32
b) 6x2 + 6x4 = 36
c) 4x2 + 8x4 = 40
20) a) T de fusión de los DNA I y DNA II
b) Aa Absorbancia a 260nm de las 2 hebras de DNA separadas
Ab Absorbancia a 260 nm de la doble hélice
c) % CG de DNA II %CG de DNA I
21) DNA (porque el RNA se hidroliza), circular (porque origina un solo
fragmento con la endonucleasa), doble hélice (por aumento de absorbancia a
260 nm al elevar la temperatura) y peso molecular 8 105.
22) RNA circular simple hebra, peso molecular 2 106.
23) Peso molecular: 22000, no es proteína ni RNA de cadena abierta, RNA,
simple hebra, circular.
24) DNA doble hebra, con Tm= 56ºC. No es proteína (biuret negativo), no tiene
ribosa (periodato negativo). Es ácido nucleico (absorbancia a 260), DNA (no se
hidrolizó con NaOH), doble hebra (aumento de A260).
7
25) ARN simple hebra lineal. Para justificar ver 16.
26) 39600 kDa. 20,4 µ. No se hidroliza por álcalis. Se hidroliza por exo y
endonucleasas. Aumenta la A260 al aumentar la temperatura.
17 % A, 17 % T, 33 % C, 33 % G.
27) a) 5’-ATGGTAGTTCGAACGCGTTTGATC-3’
b) 70 ºC c) 5882 pb d) 46 % si consideramos una hebra (50 % si consideramos
la molécula de DNA completa)
28) A: DNA lineal, PM 17 104, doble hebra, 20 % C, 20 % G, 30 % T, 30 % A.
B: DNA circular, PM 17 104, doble hebra, 32 % G, 32 % C, 18 % A, 18 % T.
C: DNA circular, PM 8 104, simple hebra, 60 % G.
2 corresponde a A, 1 a B y 3 a C.
29) a) 65ºC b) 100.000 c) 50 %
30) a) 1800/3= 600 aminoácidos x 110= 66000 b) 1800 x 100 / 60= 3000 pares de
bases c) NaOH 5 M: se hidroliza totalmente, exorribonucleasa: se degrada totalmente,
endodesoxirribonucleasa: insensible, calentamiento por encima de la Tm: es simple
hebra por lo tanto no aumenta la Abs a 260 nm.
8
MATERIAL SUPLEMENTARIO
Notación taquigráfica
9
10