Introducción a la

Biotecnología
Problemas

Clase II
Licenciatura y Tecnicatura en Biotecnología
1er Cuatrimestre 2017

- Problemas Clase II

Universidad Nacional de Moreno - Av. Bartolomé Mitre Nº 1891

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Clase 2 problemas

1. Sugiera un método para diferenciar ADN de cadena simple de ARN.

2. Describa el proceso de replicación del ADN y explique por qué al producirse

la estructura en Y (horquilla de replicación) una de las cadenas hijas se
sintetiza en fragmentos.

3. ¿Qué resultados experimentales (dibuje la posición de las bandas en los

gradientes de cloruro de cesio CsCl) habrían obtenido Messelson y Stahl si
hubieran alimentado a las bacterias primero con N14 (liviano) pasándolas
luego a N15 (pesado), analizando entonces el ADN al cabo de la primera,
segunda y tercera generaciones?

4. En un tubo de ensayo se agregaron los siguientes componentes para una

reacción de amplificación de ADN por PCR (reacción en cadena de la
polimerasa):

ADN molde: genoma del virus de la viruela

Primer A de 20 nucleótidos, cuya secuencia es complementaria de la hebra

de abajo (sentido) del molde en la región A

Primer B de 22 nucleótidos, cuya secuencia es complementaria de la hebra

de arriba (antisentido) del molde en la región B

dNTPs (los 4 desoxiribonucleosidos trifosfato), Buffer conteniendo Magnesio

Mg2+

Taq polimerasa (ADN polimerasa de Thermus aquaticus). La distancia entre

los extremos 5´ prima de cada primer es de 320 nucleótidos.

Se realizan 30 ciclos de amplificación en un termociclador, cada ciclo consiste

en:

1-Desnaturalización: 30 seg a 94° C

2-Apareamiento: 60 seg a 42° C
3- Extensión: 120 seg a 72° C

Preguntas:
¿Cuál es el tamaño en pares de bases del producto de PCR?
¿Cuál es el peso molecular del producto de PCR? Dato: 1 par de bases pesa
650 Daltons
¿Cuál sería el producto de PCR si se omitiera:
¿Uno de los primers?

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¿Los dos primers?

¿El ADN molde?

¿Cuál sería el producto de PCR si se reemplazara:

¿El genoma del virus de la viruela por el del virus Herpes simplex?
¿El ADN molde por un ARN de la misma secuencia?
¿El primer A por otro de 20 nucleótidos, pero de secuencia complementaria
a la hebra de arriba (antisentido) de la región A?
¿La Taq polimerasa por la ADN polimerasa de E. coli?

JUSTIFIQUE SUS RTAS.

5. ¿Qué consecuencias tendría para una bacteria la perdida por mutación de la

actividad 3´ prima – 5’ prima nucleasa de la ADN polimerasa III?

6. Describa las características de las siguientes uniones que se encuentran en

proteínas: a) peptídica, b) Puente de hidrogeno, c) fuerzas de Van der Waals,
d) Puentes disulfuro, e) Unión hidrofóbica, f) Unión iónica o electrostática.

7. ¿Cuáles de estas son necesarias para formar una α hélice o una hoja plegada
β?

8. Defina estructura primaria, secundaria y terciaria de una proteína.

9. ¿Cuál es el efecto de los siguientes tratamientos sobre una proteína nativa:

urea, mercaptoetanol, SDS, hidrólisis acida fuerte, calentamiento a 90
grados?

10. Mencione las características de las enzimas. Defina: sustrato, producto, sitio
activo, energía de activación, cofactor.

11. Dibuje un esquema de una proteína con tres dominios estructurales y otra
con tres subunidades.

12. ¿Provoca la sustitución de un aminoácido por otro, forzosamente una

disminución en la actividad biológica de una proteína?

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