Siembra por

dilución

CURSO: MICROBIOLOGIA

NOMBRE :
DOCENTE : CICLO: III AÑO : 2018

GRUPO: 2
Objetivo
Identificar el número de bacterias por milímetros a gramos

a) Agar TSA (triplica su soya) es un medio de cultivo universal

5 x 25 = 125
125x40 = 5
100
40 gr x 1 litro

b) Agar Macconkey es un medio de cultivo selectivo y diferencial ( ENTEROBACTERIA)

5x25=125
125x51.5 = 6.44
51.5gr x 1 litrp 100

Mediante el uso de esta técnica de simple ejecución y fácil interpretación, se pueden evaluar
diferentes grupos bacterianos según el medio de cultivo que contenga el frasco.

Es aplicable para evaluar bacterias heterotróficas, aerobias totales (BAT), bacterias reductoras
de sulfato (BRS), anaerobias heterotróficas totales (BAnT), etc.

Esta técnica está recomendada por el Instituto Americano del Petróleo (API) para evaluar
calidad biológica en aguas de inyección en recuperación secundaria y también es ampliamente
usada en evaluación de problemas microbiológicos en aguas de refrigeración.

Procedimiento.
La técnica de dilución por extinción consiste en inocular una serie de frascos tipo antibiótico
que contienen 9 ml del medio de cultivo apropiado según el tipo de bacteria que se quiera
evaluar.

Se obtiene 1 ml de la muestra usando una jeringa descartable, estéril, de 1 o 2 ml de

capacidad.

Se inocula el primer frasco, sin retirar la aguja se agita el mismo, se invierte y se retira 1 ml que
se inocula en el 2° frasco.

Con una nueva jeringa, se retira 1 ml del frasco N° 2, previamente agitado, y se inocula el
frasco N° 3 y así sucesivamente, utilizando una nueva jeringa para cada frasco..
PASOS EN EL LABORATORIO
1-. calentar constantemente el agar tsa y el agar macconkey parar asi poder homogenisar

2-. en las 5 placa petris echar las 5 muestras con una pipeta y el medio de cultivo agar tsa y moverlo 5
veces para cada lado para que homogenice

3-.en 5 placa petris echar las 5 muestras y el medio de cultivo agar macconkey y moverlo 5
veces para cada lado para que homogenice
4-.Luego tendremos 10 muestras con medio de cultivo ya homogenizados y listo para llevarlo
al refrigerio donde tendremos que esperar 24 horas

MATERIALES

- matraz

- trípode

- AGAR TSA

- AGAR Macconkey

- placa Petri pipetas

- gas
Método para la lectura

1. OBJETIVO

El presente procedimiento tiene como objetivo describir la metodología llevada a cabo por el
Laboratorio de Microbiología para realizar el recuento de microorganismos capaces de crecer y
formar colonias en un medio sólido tras la incubación a 30°C.

2. ALCANCE

Este procedimiento se aplica para realizar un método horizontal para el recuento de

microorganismos capaces de crecer y formar colonias en un medio sólido tras la incubación a
30°C.

El método resulta aplicable para:

a) Productos destinados al consumo humano y la alimentación animal;

b) Muestras ambientales de área de producción y manipulación de alimentos para consumo

humano y alimentación animal.

Recuento y selección de las colonias

Después de la incubación por el período especificado, seleccionar las placas que, de ser
posible, tengan menos de 300 colonias. Contar las colonias, si es necesario utilizando el equipo
contador de colonias. Examinar las placas bajo una luz tenue.

Es importante que las colonias diminutas sean incluidas en el recuento sin confundirlas con
partículas insolubles o precipitado del alimento. Se examinan los objetos dudosos
detenidamente, utilizando lentes de aumento si es necesario, para poder distinguir las colonias
de otros materiales.

Primera lectura macconkey TSA

Agar tsa

15 colonias blancas

Agar macconkey

8 colonias rosadas y 30 colonias blancas

Segundo lectura

Agar tsa

57 colonias blancas

Agar macconkey

23 colonias rosadas 19 colonias blancas

Tercera lectura

Agar tsa

34 colonias blancas

Agar macconkey

15 colonias rosadas 11 colonias blancas

Cuarta lectura

Agar tsa

57 colonias blancas

Agar macconkey

35 colonias rosadas 11 colonias blancas

Quinta lectura

Agar tsa

59 colonias blancas

Agar macconkey

20 colonias rosadas 7 colonias blancas

CONCLUCION