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IDENTIFICACIÓN BACTERIANA

EL TAMAÑO DE LAS BACTERIAS ES MUY


PEQUEÑO

AL MICROSCOPIO SON MUY PARECIDAS

LA IDENTIFICACION INICIA CON LA


OBSERVACIÓN MORFOLOGICA PERO SE
BASA ESPECIALMENTE EN
CARACTERISTICAS FISIOLOGICAS

Para la identificación de un genero o especie, se requiere determinar algunas


propiedades del mo, lo que no quiere decir que se deban conocer todas las
propiedades del microorganismo.
Conociendo el origen de una bacteria, se restringe el campo a unas cuantas
especies.
Los kits comerciales y las sondas de ADN permiten la identificación rápida y
sencilla de algunas especies
TAXONOMÍA BACTERIANA

La biología molecular ha permitido un mejor conocimiento de las relaciones


evolutivas entre las bacterias, lo que significa que ahora es posible realizar
esquemas naturales de taxonomía.
Pero lo esquemas naturales agrupan a las bacterias en unidades que no pueden
ser identificadas fácilmente por los procedimientos habituales de laboratorio.
El esquema artificial más utilizado es publicado por la, Sociedad Americana de
Microbiología (ASM).
Este organismo, en los inicios del siglo XX, decidió realizar un manual de
bacteriología, el cual en su edición inicial fue realizada por el bacteriólogo H.
Bergey: Manual de Bergey de bacteriología determinativa (Bergey’s Manual of
determinative bacteriology) en 1923.
En 1984, después de cambios sustanciales de contenido, el nombre es
modificado a: Manual de Bergey de bacteriología Sistemática (Bergey’s Manual
of Systematic Bacteriology.
En 1994 se publicó un volumen único abreviado, la novena edición:
Manual de Bergey de bacteriología determinativa
Se volvió al titulo original debido a que el manual sigue el estilo original.
El manual de Bergey, sigue una aproximación práctica para la clasificación de
bacterias implicando que en algunos casos ignora las relaciones evolutivas
conocidas.

Agrupa conjuntamente todas las bacterias fototrofas no obstante que estudios


con el ARN ribosomal indican una lejanía evolutiva entre los miembros de éste
grupo.
Considera todas la bacterias dentro de un único reino incluyendo a las
arqueobacterias que evolutivamente son tan distantes de las eubacterias como
de los eucariotas
EL ESQUEMA DEL MANUAL DE BERGEY DE SISTEMÁTICA BACTERIANA

El manual incluye a las bacterias en cuatro divisiones basándose en la


composición de su pared celular:
1.  Gram(-): Peptidoglicano
2.  Micoplasmas: Carecen de pared celular rígida
3.  Arqueobacterias: Pared celular de componentes diferentes al peptidoglicano
4.  Paredes constituidas por proteínas
La principal característica del manual, es la subdivisión totalmente pragmática
denominada: sección; consta de 33 secciones y las especies bacterianas se
asignan a una o en algunos casos dos secciones:
Halobacterium, arqueobacteria halófila se encuentra en las secciones 4 y 25, ya
que las bacterias halófilas se consideran en la sección 4 y las
arqueobacterias en la 25.
Las secciones se basan en propiedades de fácil identificación, indicadas por
nombres no latinizados:
La sección 13 es: “Bacilos y cocos Gram positivos formadores de endosporas”
Las secciones NO son categorías taxonómicas son grupos de organismos que
comparten ciertas propiedades.
ESPIROQUETAS Las espiroquetas (sección 10) son
bacterias Gram negativas, con una
forma y un mecanismo de motilidad
poco usuales, son alargadas y
helicoidales, parecen un sacacorchos.
Poseen flagelos típicos, se denominan
endoflagelos, se encuentran en el
periplasma.
Se insertan en una estructura
denominada filamento axial.
Las espiroquetas poseen dos
filamentos axiales cada uno en un
extremo de la célula y envuelve
helicoidalmente el cilindro
protoplasmático o cuerpo celular,
para solaparse con el otro filamento
axial en la zona celular ecuatorial.
El número de endoflagelos de un
filamento axial es variable desde 2
hasta 200.
Bacterias Gram negativas helicoidales/vibroides, móviles, aerobias/microaerofilicas

Todos los integrantes de la sección 2, son aerobios o microaerofílicos y helicoidales


o vibrioides.
Los miembros helicodiales poseen forma de sacacorchos, como las espiroquetas,
pero sus flagelos son normales. Los miembros vibrioides poseen forma de coma.
A este grupo pertenece Campylobacter jejuni,uno de los causantes de diarreas de
mayor importancia, C. Fetus provoca abortos en vacas y ovejas.
Las especies de Campylobacter son microaerofilas y poseen formas de S, de
espiral o curvada.

Un género muy relacionado, es Helicobacter y particularmente H. Pilori causa úlcera


gástricas en humanos.

Las especies de Azospirillum son aeróbicas y helicoidales y son importantes para el


mantenimiento de la fertilidad de los suelos tropicales, son fijadoras de N2.
Un mo muy relacionado con el anterior, Aquaspirillum magnetotacticum contiene
magnetosomas, con los que siguen los campos magnéticos hacia el fondo de los
sistemas acuáticos, los ci¡uales son su ambiente óptimo.
Bacilos y cocos Gram negativos aeróbicos

Las bacterias de la sección 4, no se diferencian morfológicamente.


Incluye muchas especies patógenas, como Bordetella pertussis (tos ferina),
Neisseria gonorrhoae (gonorrea), Neisseria meningitidis (meningitis meningocócica).
También incluye bacterias de importancia biotecnológica como Xanthomonas
(xantana), Acetobacter (ácido acético),.

Miembros del género Agrobacterium, producen


Tumoraciones cancerosas en las plantas
denominadas “agallas”.
A.  tumefaciens penetra a través de una herida en el
cuello de la planta. El mo contiene genes
denominados T-DNA en un plásmido
denominado Ti o plásmido inductor de
tumores. Estos genes permiten integrarse al
plásmido en el genoma de la célula volviendo la
aplásica.
Así, se producen las agallas, de cuyas células se
producen las opinas.
Bacilos Gram negativos anaeróbios facultativos

Las bacterias de la sección 5, se dividen en tres familias:


1.  Enterobacteriaceae
2.  Vibrionaceae
3.  Pasterurellaceae

1. Este grupo incluye a los patógenos humanos: Salmonella typhi (tifoideas), varias especies
del género Shigella (shigelosis≈disentería), Vibrio cholerae (cólera), Yersinia pestis (peste
bubónica), Escherichia coli (disenteria).
La fermentación ácido-mixta, produce
una mezcla de ácidos orgánicos
Los de la butanodiólica son menos
ácidos y además se produce
butanodiol

Ambas fermentaciones se diferencian en tres factores: 1.- La ácido-mixta produce grandes


cantidades de ácido. 2.- Algunos fermentadores ácido-mixtos, convierten el ácido fórmico en
CO2 y H2, produciendo gas. 3.- La fermentación butanodiólica produce butanodiol y
pequeñas cantidades de ácido.

E. Coli realiza
fermentación
ácido-mixta

Fermenta la lactosa, utiliza el ácido cítrico y convierte al


triptofano en indol, lo que da el olor característico a los cultivos
y a las heces fecales.
Estas son pruebas para determinar contaminaciones en agua
o alimentos.
En medio EMB-lactosa, produce colonias con brillo metálico
por la fermentación de la lactosa.
3. Pasteurellaceae.
Son un grupo de bacilos pequeños e inmóviles.
Incluyen dos géneros de patógenos devastadores: Pasteurella y Haemophillus.
Pasteurella en honor a Louis Pasteur, quién identificó a P. multocida como el agente
causal del cólera aviar incluye muchas has especies que causan diferentes
enfermedades a animales y a humanos.
Haemphillus son parásitos obligados que causan muchas enfermedades en
humanos desde infecciones menores en ojos, hasta meningitis mortalwes
Otro género de este grupo, Zymomonas produce etanol, poco común en bacterias.
Puede producir en una hora cinco veces su peso seco en etanol. El pulque, es
obtenido por fermentación del jugo del agave realizado por Zymomonas.
Micoplasmas

En la sección 10, se incluyen los micoplasmas eubacterianos. Estos se agruparon de forma


conjunta debido a que todos carecen de pared celular. Actualmente por biología
molecular, se ha confirmado la relación entre los integrantes del grupo .

Cuando las condiciones de crecimiento no son óptimas, las células se deforman, formando
filamentos parecidos a los de los hongos (de aquí su nombre mico significa hongo.

Al carecer de pared, pueden atravesar los filtros de membrana para


esterilizar. Por esto, se adiciona a los medios penicilina o
estreptomicina.
M. pneumoniae causa la neumonía atipica primaria, que es benigna.
Muchos micoplasmas atacan animales: rinitis de las gallinas y pavos
Ureaplasma pneumoniae es un ahbitante inocuo de la vagina del 60 % de
las mujeres sanas. Si penetra al torrente sanguíneo en el parto,
produce una fiebre posparto benigna.
Tambien esta incluido el género Thermoplasma, arqueobacterias que
viven en regiones volcánicas.
Cocos Gram positivos

Estos, son un amplio grupo incluido en la sección 12. Tienen una morfología similar, pero
poca relación evolutiva.
Todos son esféricos o casi esféricos, variando las especies en su tamaño.
Algunos géneros se clasifican por su tipo de agrupamiento: paquetes, cadenas o racimos.
Estas agrupaciones reflejan el modelo de división celular

Staphylococcus. Racimo de uvas Streptococcus. Cadenas alargadas Sarcina. Paquetes cúbicoas


Micrococcus (aerobios obligados) y Staphylococcus (anaerobios facultativos)
forman parte de la microflora de la piel.
S. aureus es un patogeno humano importante son anaerobios facultativos,
produciendo ácido láctico como producto final. Causa diversas infecciones en la
piel,como la denominada impétigo, así como diviesos y abscesos.
Tres géneros de esta sección, Streptococcus, Leuconostoc y Pediococcus, suelen
agruparse como bacterias del ácido láctico. Son anaerobias aerotolerantes;
crecen bien en oxígeno, pero no lo utilizan en su metabolismo. Sol obtienen
energía por fermentación, produciendo ácido láctico como producto final.
Estas han sido utilizadas por la humanidad para producir algunos alimentos.
Dentro de los Streptococcus, hay especies patógenas para los humanos, se dividen
en especies en función de su efecto en el medio agar-sangre y alos antígenos
que poseen:
S. pyogenes, causa diversas enfermedades tales como la faringitis, fiebre
reumática y endocarditis. S. pneumoniae, causa neumonía y S. mutans,es la
causa principal de la caries dental.
Bacilos y cocos Gram negativos formadores de esporas

La sección 13 consta de siete géneros, todos producen estructuras de resistencia llamadas


endosporas.
Dos géneros: Bacillus y Clostridium, son de importancia clínica. Ambos son bacilos y algunas
especies son móviles por medio de flagelos peritricos.
Todas las especies de Clostridium (suelos y sedimentos) son anaerobios estrictos y las de
Bacillus, (suelos y ambientes acuáticos) realizan una respiración aeróbica, algunas
especies son anaeróbios facultativos, fermentan y /o realizan respiración anaeróbia.

Algunas especies producen también, cristales de


naturaleza proteica, tóxicos para insectos, como
B. thuringensis.
Ambos géneros incluyen patógenos importantes,
como B. anthracis (carbunco) que se reproduce
en sangre. C. tetani, C. Botulinum, C.
perfringens. y C. dificcile (diarrea) cuando la
ingesta de un antibiótico desequilibra la flora
intestinal.
Bacilos Gram positivos regulares no esporulados

De los siete géneros de la sección 14, cuatro son de especial interés: Lactobacillus,
Erysipelothrix y Listeria.
Junto con tres géneros de la sección 12, las especies de Lactobacillus constituyen
las bacterias del ácido láctico.
Caryophanon lactum era notable por el gran tamaño de sus células pero
actualmente (1992), se descubrió una bacteria de mayor tamaño:
tentativamente denominada Epulopiscium (invitado a un banquete de pez),
simbionte en el intestino del pez cirujano y que aun no esta clasificada en el
manual de Bergey (2009) tiene 500 nm de longitud.
El grupo tiene dos patógenos: Erysipelothrix rhustopathiae que infecta
principalmente cerdos pero causa lesiones rojizas dolorosas en humanos y
Listeria monocytogenes que provoca listeriosis, enfermedad transmitida por
alimentos. En adultos es benigna, pero en niños, ancianos y enfermos
inmunocomprometidos, puede causar un tipo de meningitis.
Bacilos Gram positivos irrregulares no esporulados

Las especies de la sección 15, tienen morfologías poco usuales: ramificadas, forma
de maza o de grosor variable. A veces la forma de la célula cambia
dependiendo de las condiciones del medio ambiente.
Pueden ser aerobias o anaerobias.
El génbero Arthrobacter cambia su morfología a lo largo de su crecimiento.

Es responsable en gran medida de


la mineralización de la materia
orgánica.
En fase estacionaria tiene forma
de coco, cuando alguna célula
empieza a crecer, se torna en
bacilo que se divide generando
más bacilos.

Al envejecer el cultivo las células se hacen más irregulares en su grosor; las regiones
globosas parecen cocos unidos por un fino hilo, hasta que se separan como cocos
uniformes nuevamente.
Micobacterias y grupo nocardiforme

Los miembros de las secciones 16 y 17, las micobacterias y los nocardiformes


tienen una estructura de la pared celular poco corriente.
El peptidoglicano normal esta unido a una capa de polisacárido que a su vez, esta
unido por enlaces tipo éster a ácidos micólicos, ácidos graso que poseen
grupos hidroxilo.

Medio sólido Mycobacterium tuberculosis Medio líquido

Dos géneros: Mycobacterium y Nocardia poseen ácidos micólicos de cadenas muy


largas, por lo que sus células tienen una superficie externa ceruminosa, esto las
protege de ambientes hostiles. Esta superficie afecta la permeabilidad, incluyendo
a los colorantes, por lo que para su tinción, se deba calentar a 75ºC. Se les
conoce como ácido-alcohol resistentes.
Bacterias quimiolitótrofas aeróbias y organismos relacionados

Las bacterias quimiolitótrofas (“compuestos químicos-mineral alimentación”) obtienen energía


por oxidación de compuestos inorgánicos. Toda su fuente de carbono es a partir del CO2
gaseoso. Litótrofo es sinónimo de autótrofo. Se agrupan en la sección 20 y en ella se
subdividen dependiendo del compuesto inorgánico oxidado.

Hay dos grupos de bacterias nitrificantes, uno incluye los generos: Nitrosomonas,
Nitrosococcus y Nitrosolobus, oxida el amoniaco hasta nitrito:
NH3 + 1,5 O2 NO3 + H2O + H+

El otro grupo, que incluye a los géneros: Nitrobacter, Nitrococcus y Nitrospina, oxida el nitrito
a ión nitráto: NO2 + 0,5 O2 NO3
Bacterias con yemas y/o apéndices

En la sección 21 se incluyen bacterias que no tienen una morfología esférica, bacilar o


helicoidal.
También se incluyen bacterias que se dividen por gemación.
Posiblemente las bacterias que poseen una morfología más inusual son las bacterias con
apéndices o bacterias con prostecas, encontradas en ambientes acuáticos. Tienen una
o varias extensiones, filamentosas o cónicas; les da una apariencia de araña.

No se sabe su función biológica, pero se dan dos


posibilidades: la primera es que ya que son aerobias
e inmóviles, las prostecas pueden ayudarles a
disminuir su tasa de sedimentación e incluso
elevarlas del fondo.
La segunda es en función de la mayor superficie de la
bacteria para poder tener mayor área de contacto con
el medio ambiente y así, mayor contacto con los
nutrientes.
Una de estas bacterias, Caulobacter, tiene un ciclo de vida complicado. Prospera
en ambientes acuáticos con pocos nutrientes. Se fija a superficies sólidas
mediante una estructura denominada disco adhesivo, localizado en el extremo
de una prosteca que se extiende desde un extremo de la célula, que tiene forma
de riñón.
Se dividen por gemación, dando lugar a una célula denominada célula nadadora,
que posee un flagelo, la cual puede dividirse o, después de un breve período de
motilidad activa, el flagelo es reemplazado por una prosteca con disco adhesivo.
Ha sido un modelo de estudio de la diferenciación celular.
Bacterias con vainas

En la sección 22 se incluyen bacterias que se desarrollan


dentro de vainas, que son tubos largos transparentes
de polisacáridos, cuando las condiciones de cultivo
son favorables.
Cuando no lo son, las células se liberan dejando la vaina
vacía.
Siendo células nadadoras, cuando encuentran un
ambiente favorable nuevamente, se asocian
formando nuevamente las vainas

Se encuentran en arroyos contaminados y estanques de tratamiento de aguas residuales.


Algunas oxidan hierro y manganeso. Las vainas pueden llegar a tener grandes cantidades de
estos metales, con lo que se forman grandes masas de bacterias.
Las masas de Sphaerotilus spp, crecen en plantas de tratamiento de aguas llegan a ser tan
abundantes que incrementan el volumen de los lodos, proceso denominado
hinchamiento y que no permite el asentamiento adecuado de los lodos e interfiere con la
clarificación del agua tratada.
Bacterias deslizantes no fructificantes, no fotosintéticas

Estas bacterias se encuentran en la sección 23, y se agrupan en conjunto en función de su


inusual forma de motilidad, conocida como movimiento por desplazamiento, aunque
hay otras secciones que incluyen bacterias deslizantes (24 bacterias fructificantes y 19
cianobacterias deslizantes).
Pueden moverse únicamente cuando están en contacto con una superficie sólida
Algunas se mueven a alta velocidad: 600 µm / min que equivaldría a un hombre de 1,80 mts
de altura moviendose a 60 km / h.
Otras, a velocidades muy lentas de 1 µm / min, que es en comparación, la velocidad de
desplazamiento de los continentes.
No se conoce el mecanismo de motilidad, sin embargo hay una hipótesis que no ha sido
demostrada: estas bacterias contienen una membrana externa fluida que refluye
continuamente dentro de la pared de peptidoglicano; la célula se desliza cuando la
membrana externa en movimiento se une a una superficie sólida.
Otras bacterias de este tipo, son de importancia ecológica.
Baggiata desempeña un papel esencial en el ciclo del azufre.
Cytophaga ayuda a degradar la celulosa de las plantas.
Las especies de Lysobacter son depredadores microbianos; lizan algas y cianobacterias.
Bacterias deslizantes fructificantes
También se les denomina mixobacterias
Son organismos del suelo que experimentan un grado de diferenciación celular poco
frecuente en procariotes.
Se deslizan en masa sobre superficies, consumiendo a su paso microorganismos vivos o
muertos.
Cuando se agotan los nutrientes, forman agregados y sufren una diferenciación en cuerpos
fructíferos que están recubiertos de una capa mucosa y contienen esporas
denominadas mixosporas.
Estos cuerpos se ven a simple vista.

Los que forman las especies de Myxococcus son


estructuras sencillas, con forma de colina o
cúpula.
Las del género Stigmatella poseen forma de árbol
ramificado.
La superficie de estiércol en un área húmeda es un
buen lugar para encontrar mixobacterias, por el
gran contenido de bacterias presentes que son su
alimento.
Arqueobacterias

En la sección 25 se agrupan las arqueobacterias, que aunque desde un punto de vista


evolutivo sufucientemente diferentes a las demás bacterias, como para ser consideradas
un reino biológico diferente, el manual solo les asigna una sección separada
denoiminada Archaeobacteria.
Son parecidas a las eubacterias. Se dividen en tres subgrupos: Metanógenos, halófilos y
termoacidófilos.
METANOGENOS
Formadores de metano a partir de hidrógeno y dióxido de carbono o acetato. Esto se realiza
solo en ambientes anaeróbios en donde otros microorganismos producen éstos
compuestos.
Este grupo incluye muchos géneros de los cuales Methanococcus es el más estudiado.
HALOFILOS
Son incapaces de crecer en ambientes en los que haya menos del 10% de sal. Son aerobios
y algunos hacen fotosíntesis primitiva
La membrana de Halobacterium sufre una diferenciación, se pigmenta con manchas
denominadas membranas purpúreas, que contienen bacteriorodopsina, la cual al
actuar junto a un cofactor el retinal, convierte la luz en energía química.
TERMOACIDOFILOS
Viven en ambientes extremadamente hostiles. Crecen a T = 85ºC y pH = 1.0
Se encuentran en fuentes geotermales que contienen ácido sulfúrico.
Los miembros de este grupo tienen en común su adaptabilidad a ambientes extremos, sin
embargo son muy diversos.
Las especies del género Sulfolobus tienen células lobuladas extrañamente irregulares:

Los miembros de otro género, Thermoplasma parece que carecen por completo de una
pared celular, de forma parecida a los micoplásmas.
Actinomicetes con esporángios multiloculares

El manual incluye varias secciones de actinomicetes, bacterias que crecen como micelios,
masas de células filamentosas ramificadas que se parecen a los hongos miceliares.
Las bacterias de la sección 27, se caracterizan por formar esporas en un esporángio
multilocular, un engrosamiento con muchas cámaras en el extremo de un filamento
(loculus = pequeña cámara).

El grupo consta de tres géneros:


Geodermatophilos se encuentra en suelo.
Dermatophilus infecta animales y ocasionalmente a
humanos en la piel.
Frankia fijadores de nitrógeno, varias de sus especies
tienen importancia ecológica. Viven en nódulos en
las raíces de plantas de 17 géneros diferentes entre
las cuales se incluyen los alisos de las riberas de
los rios. Estas, pueden vivir en suelos sin nada de
N2, subsistiendo solo por el nitrógeno fijado apor la
Frankia.
Streptomyces y géneros relacionados

Las bacterias de la sección 29, son también actinomicetes.


Los miembros del género Streptomyces abundan en suelos. Producen un olor agradable a
suelo recientemente removido húmedo, debido a los compuestos volátiles que producen.
En placas de agar se reconocen fácilmente por sus colores “pastel”, textura característica
(una masa dura que se extiende en el agar) y el olor como a suelo.

Algunos de los El resto, fuera de el, formando cadenas de


micelios crecen esporas en los extremos.
dentro del agar

Aunque el crecimiento es
micelial, son procariotas.
Tienen mucho interés tanto
ecologico como industrial.

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