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UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES


ZARAGOZA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA CELULAR Y


DE TEJIDOS I

Practica 3: “Extracción e identificación de


carbohidratos de reserva en animales y plantas”

Equipo: 5 Grupo: 2451


Integrantes: García Rodríguez Omar
Hernández Tinajero Mariana
Mota Cordero Juan Antonio

Miércoles 18 de marzo del 2015


Objetivos
 Analizar la importancia biológica de los carbohidratos de reserva.
 Extraer polisacáridos de muestras diferentes.
 Identificar a estos con la prueba de lugol y Benedict, antes y después de su
hidrolisis.

Resultados

Experimento 1

Después de realizar el tratamiento previo del hígado y dejándolo reposar


durante 24 hrs en el refrigerador, se decanto el líquido y se centrifugo el
sedimento a 2000 rpm durante 5 min, se separo el precipitado y se dejo
secar, inmediatamente se disolvió una cantidad de glucógeno en 4 mL de
agua destilada, se tomaron dos muestras de 0.5 mL de esta solución y se
realizaron las pruebas de lugol y benedict utilizando 2 gotas en cada caso
para la prueba de lugol se obtuvo una coloración negro-verdosa lo cual
indicaba una prueba positiva, y la reacción de benedict fue un color azul
claro dando un resultado negativo.
Posteriormente se procedió a realizar la hidrolisis para la cual se agrego 3
gotas de HCl en dos tubos con la muestra y se dejo calentar a ebullición en
baño maría durante 15 min. Después se neutralizo con una solución
concentrada de NaOH y se realizaron las pruebas en las cuales para lugol
dio una coloración un tanto café-rojiza teniendo un resultado negativo
mientras que para la prueba de benedict se obtuvo un coloración azul muy
clara para obtener un resultado negativo.

Experimento 2

Se cortó un pedazo de papa y para la prueba de presencia de almidón se


le agregaron dos gotas de lugol, las cuales dieron una coloración entre
verdosa y negra.
Experimento 3

Usando los 0.5 mL de extracto de arroz en cada tubo antes de la hidrolisis


se agregaron 2 gotas de lugol en uno y 2 gotas de reactivo de Benedict en
el otro, en el caso del reactivo de benedict se tuvo una coloración azul
clara lo cual indicaba un resultado negativo, mientras que en la prueba de
lugol se obtuvo una coloración negra-verdosa mostrando un resultado
positivo.

Posteriormente de realizo la hidrolisis con 2 mL del extracto de arroz y se


agregaron para esto 3 gotas de HCl en cada tubo y se calentó en baño
maría por 15 min, al terminar se dejo enfriar y se neutralizo con una
solución de NaOH de sodio concentrado y se procedió a hacer las prueba
de lugol y benedict las cuales tuvieron resultados negativo para lugol y
positivo para benedict.
Análisis de resultados
La solución de Benedict es de color azul claro porque contiene sulfato de
cobre. Cuando se mezcla y se calienta con un azúcar, si ese azúcar tiene
electrones libres para donar, el cobre acepta estos electrones y se reduce,
con lo cual se vuelve marrón anaranjado la llamamos azúcar reductor.
El color que dan los polisacáridos con el lugol (solución de I2 y de IK) se debe a que
el I2 ocupa espacios vacíos en las hélices de la cadena de unidades de glucosa, el
lugol da con el almidón color azul verdoso y con glucógeno rojo caoba.

Con el glucógeno antes de la hidrólisis dio positivo al lugol y negativo a Benedict,


después de la hidrólisis dio positivo a lugol y negativo a Benedict por lo que el
glucógeno no es un azúcar reductor.
La prueba de lugol en una rodaja de papa dio positivo por lo que hay presencia de
almidón.
En la prueba con arroz antes de la hidrólisis dio positivo para lugol y negativo a
Benedict y después de la hidrólisis dio negativo a lugol y positivo a Benedict por lo
que el almidón en hidrólisis es capaz de donar electrones y reducir al cobre.

Conclusiones
Al llevar a cabo las pruebas se pudo observar en cada una de las muestras el
carbohidrato presente, en el caso del hígado de la rata (glucógeno) con la prueba de
lugol indico positivo, mientras que el Benedict dio negativo, con la hidrólisis dio negativo
para ambas pruebas. Para el caso de la papa al agregarle el lugol dio positivo lo cual
muestra la presencia de almidón. Para la muestra de arroz en la prueba de Benedict
dio negativo (no tenía azúcar con grupo reductor), mientras que el lugol mostro un
resultado positivo (muestra la presencia del polisacárido). Después de la hidrólisis del
arroz se mostraron resultados diferentes en el caso de Benedict dio positivo y para el
lugol dio negativo.
Con esta práctica aprendimos pruebas para identificar los carbohidratos presentes en
animales y plantas y cuál es su fundamento para saber cuándo utilizar cada una de las
pruebas

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