Fosforilacin a nivel de sustrato

Fosforilacin a nivel de sustrato.

La fosforilacin a nivel de sustrato es una reaccin qumica que se puede definir como
la produccin de ATP (o GTP) a partir de ADP (o GDP) combinada a una transformacin
enzimtica de un sustrato, reaccin en la que no est implicada la fosforilacin oxidativa ni
una ATP sintasa.1 Lo que generalmente ocurre es que un sustrato de alta energa
fosfatado, cede su fosfato de alta energa al ADP.2Nota 1

Mecanismo bioqumico[editar]
En la fosforilacin oxidativa la energa necesaria para la fosforilacin del ADP procede de
la cascada de electrones en la cadena de transporte electrnico y es debido al gradiente
de protones que se forma. Por el contrario, en la fosforilacin a nivel de sustrato la energa
necesaria para la fosforilacin procede de la propia reaccin enzimtica que sufre el
sustrato orgnico. La fosforilacin a nivel de sustrato es la forma que tienen
las fermentaciones de producir ATP.

Ejemplos
En la gluclisis
Un ejemplo de fosforilacin a nivel de sustrato es la conversin
de fosfoenolpiruvato a piruvato en la ltima reaccin de la gliclisis, con produccin de
ATP. La enzima que cataliza esta reaccin es la piruvato quinasa. El fosfato que se
encontraba unido al fosfoenolpiruvato acaba unindose a ADP, formando ATP, mientras
que el fosfoenolpiruvato se convierte inicialmente en enolpiruvato, pero este al pH reinante
en el interior celular casi inmediatamente origina cetopiruvato (o simplemente piruvato,
como se acuerda en denominar). Esta transformacin de la forma enol a la forma ceto es
muy exergnica, lo que impulsa todo el conjunto de la reaccin a la derecha.
Fosfoenolpiruvato + ADP piruvato + ATP

En el ciclo de Krebs
Otro ejemplo de reaccin en la que se produce una fosforilacin a nivel de sustrato es la
formacin de succinato a partir de succinil-CoA en el ciclo de Krebs, con formacin
simultnea de GTP.1 La enzima implicada es la succinil-CoA sintetasa. En este caso, el
sustrato implicado, el succinil-CoA es una molcula que tiene un enlace tioster muy
energtico, entre la CoA y el grupo succinil. La hidrlisis del tioster es una reaccin muy
exergnica, que sirve para impulsar la reaccin. Primero, un fosfato inorgnico pasa al
grupo succinilo, y despus es transferido a un residuo de histidina de la enzima, para
pasar finalmente al GDP, formando GTP. Despus, el GTP, en otra reaccin posterior,
puede originar enzimticamente ATP, al cederle un fosfato al ADP.
Succinil-S-CoA + GDP succinato + GTP + CoA-SH
GTP + ADP GDP + ATP
Este es el nico ATP que se forma directamente en el ciclo de Krebs, ya que el resto del
ATP generado en la respiracin celular se produce en dos fosforilaciones de la gliclisis
citoslica y sobre todo, en la fosforilacin oxidativa que ocurre en la membrana
mitocondrial interna, la cual es un proceso completamente diferente.

Fosforilacin oxidativa
La fosforilacin oxidativa es un proceso metablico que utiliza energa liberada por
la oxidacin de nutrientes para producir adenosina trifosfato (ATP). Se le llama as para
distinguirla de otras rutas que producen ATP con menor rendimiento, llamadas "a nivel de
sustrato". Se calcula que hasta el 90% de la energa celular en forma de ATP es producida
de esta forma.1
Consta de dos etapas: en la primera, la energa libre generada mediante reacciones
qumicas redox en varios complejos multiproteicos -conocidos en su conjunto
como cadena de transporte de electrones- se emplea para producir, por diversos
procedimientos como bombeo, ciclos quinona/quinol o bucles redox, un gradiente
electroqumico de protones a travs de una membrana asociada en un proceso
llamado quimiosmosis. La cadena respiratoria est formada por tres complejos de
protenas principales (complejo I, III, IV), y varios complejos "auxiliares", utilizando una
variedad de donantes y aceptores de electrones. Los tres complejos se asocian en
supercomplejos para canalizar las molculas transportadoras de electrones, la coenzima
Q y el citocromo c, haciendo ms eficiente el proceso.
La energa potencial de ese gradiente, llamada fuerza protn-motriz, se libera cuando se
translocan los protones a travs de un canal pasivo, la enzima ATP sintasa, y se utiliza en
la adicin de un grupo fosfato a una molcula de ADP para almacenar parte de esa
energa potencial en los enlaces anhidro "de alta energa" de la molcula de ATP mediante
un mecanismo en el que interviene la rotacin de una parte de la enzima a medida que
fluyen los protones a travs de ella. En vertebrados, y posiblemente en todo el reino
animal, se genera un ATP por cada 2,7 protones translocados. Algunos organismos tienen
ATPasas con un rendimiento menor.
Existen tambin protenas desacopladoras que permiten controlar el flujo de protones y
generar calor desacoplando ambas fases de la fosforilacin oxidativa.
Aunque las diversas formas de vida utilizan una gran variedad de nutrientes, casi todas
realizan la fosforilacin oxidativa para producir ATP, la molcula que provee de energa
al metabolismo. Esta ruta es tan ubicua debido a que es una forma altamente eficaz de
liberacin de energa, en comparacin con los procesos alternativos de fermentacin,
como la gluclisis anaerbica.
Pese a que la fosforilacin oxidativa es una parte vital del metabolismo, produce una
pequea proporcin de especies reactivas del oxgeno tales como superxido y perxido
de hidrgeno, lo que lleva a la propagacin de radicales libres, provocando dao celular,
contribuyendo a enfermedades y, posiblemente, al envejecimiento. Sin embargo, los
radicales tienen un importante papel en la sealizacin celular, y posiblemente en la
formacin de enlaces disulfuro de las propias protenas de la membrana interna
mitocondrial. Las enzimas que llevan a cabo esta ruta metablica son blanco de muchas
drogas y productos txicos que inhiben su actividad.

La hiptesis quimiosmtica[editar]
Peter Mitchell propuso la "hiptesis quimiosmtica" en 1961.1 Esta teora propone
esencialmente que la mayor parte de la sntesis de ATP en la respiracin celular, viene de
un gradiente electroqumico existente entre la membrana interna y el espacio
intermembrana de la mitocondria, mediante el uso de la energa de NADH y FADH2 que se
han formado por la ruptura de molculas ricas en energa, como la glucosa.
Las molculas como la glucosa, son metabolizadas para producir acetil-CoA como un
intermediario rico en energa. La oxidacin de acetil-CoA en la matriz mitocondrial est
acoplada a la reduccin de una molcula transportadora como NAD+ y FAD.2
Los transportadores traspasan electrones a la cadena transportadora de electrones en la
membrana mitocondrial interna, que luego los traspasan a otras protenas en la cadena
transportadora. La energa disponible en los electrones se usa para bombear protones
desde la matriz, a travs de la membrana mitocondrial interna, guardando energa en
forma de un gradiente electroqumico transmembrana. Los protones se devuelven a travs
de la membrana interna, mediante la enzima ATP-sintasa. El flujo de protones de vuelta a
la matriz mitocondrial mediante la ATP-sintasa, provee de suficiente energa para que el
ADP se combine con fsforo inorgnico para formar ATP. Los electrones y protones en la
ltima bomba proteica de la cadena transportadora son llevados al oxgeno (O2) para
formar agua (H2O).
sta fue una propuesta radical en su tiempo, y no fue bien aceptada. La visin que
prevaleca era que la energa de la transferencia electrnica se almacenaba es un
intermediario estable de alta energa, un concepto mas conservativo del punto de vista
qumico. El problema de ste viejo paradigma fue que nunca se encontr aquel
intermediario, y la evidencia del bombeo de protones por los complejos de la Cadena de
Transporte de electrones creci de forma tal, que no pudo ser ignorada. Eventualmente, el
peso de la evidencia comenz a favorecer la hiptesis quimiosmtica, y en 1978, el Premio
Nobel de qumica fue entregado a Peter Mitchell.3
El acoplamiento quimiosmtico es importante en la produccin de ATP en el cloroplasto4 y
muchos tipos de bacteria.5