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Acidos Nucleicos
Acidos Nucleicos
Carreras: Farmacia
Profesorado en Qumica
Licenciatura en Qumica
Licenciatura en Alimentos
CIDOS NUCLEICOS
un nucletido
un nuclosido
un puente hidrgeno
un extremo 3
un extremo 5
una desoxirribosa
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4) Cul de las siguientes cadenas tiene la menor temperatura para la
separacin de las hebras y por qu?
a) AGTTGCGACCATGATCTG
TCAACGCTGGTACTAGAC
b) ATTGGCCCCGAATATCTG
TAACCGGGGCTTATAGAC
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15) La longitud de un gen es de 1650 nm. Calcule el peso molecular de la
protena que codifica y el nmero de bases del ARNm codificante de dicha
protena.
18)
A260
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1
Temp.
Seale V o F:
- Ninguna de las tres molculas puede ser degradada por una RNAsa.
- Las tres molculas tienen igual temperatura de fusin (Tm) porque tienen la
misma longitud.
- Las dos hebras de cada una de ellas son antiparalelas.
- Tm a Tm b Tm c
- Tm b Tm a Tm c
- Tm c Tm b Tm a
3
- Tm a Tm c Tm b
Justifique.
a) A qu corresponden TI y TII?
b) A qu corresponden Aa y Ab?
c) Qu diferencia existe entre el DNA de la curva I y el de la curva II?
d) Grafique la curva correspondiente a una muestra de DNA II al doble de la
concentracin original manteniendo igual la concentracin de sales.
21) Usted recibe una muestra de material gentico de origen viral para su
estudio qumico y estructural. La muestra present las siguientes
caractersticas: Fue totalmente insensible a NaOH 0,5 mM, el tratamiento con
una endonucleasa produjo un solo fragmento de masa molecular 8 105 Da y al
elevar la temperatura por encima de la temperatura crtica se produjo un
marcado aumento de la absorbancia a 260 nm. Con los datos precedentes
caracterice tanto como le sea posible a la muestra justificando en cada caso su
respuesta.
22) Usted recibe una muestra de material gentico de origen viral para su
estudio qumico y estructural. La muestra present las siguientes
caractersticas: Fue totalmente hidrolizada en NaOH 0,5 mM, el tratamiento con
una endonucleasa produjo un solo fragmento de masa molecular 2 106 Da y al
aumentar la temperatura por encima de la temperatura crtica no se observaron
variaciones sustanciales en la absorbancia a 260 nm. Con los datos
precedentes, caracterice tanto como le sea posible la muestra justificando su
respuesta.
24) Usted recibe una muestra de material biolgico desconocido que presenta
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las siguientes propiedades: dio negativa la reaccin de biuret, no reaccion con
periodato, no fue afectada por tratamiento con NaOH 0,5 mM, present un pico
de absorbancia a 260 nm, al calentar la muestra hasta 80C la A260 aument 5
veces con un punto de inflexin para la curva de aumento de absorbancia a los
56C. Caracterice lo ms posible la muestra recibida en base a sus
propiedades. Fundamente su respuesta.
25) Usted recibe una muestra de material biolgico desconocido que presenta
las siguientes propiedades: dio negativa la reaccin de biuret, dio positiva la
reaccin de periodato originndose grupos aldehdos, fue totalmente
degradado por tratamiento con NaOH 0,5 mM, al calentar la muestra hasta
80C la A260 no present variaciones significativas. Caracterice lo ms posible
la muestra recibida en base a sus propiedades. Fundamente su respuesta.
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Calcule la masa molecular y la longitud de la muestra. Teniendo en cuenta la
estructura anterior cmo esperara usted que reaccionara la muestra frente a:
los lcalis, exo y endonucleasas y aumentos de temperatura? Si la proporcin
de A es 17%, cul sera la composicin de bases de la muestra?
27) El DNA de una mutante del bacterifago lambda tiene una longitud de 15
en vez de 17 . Una solucin de dicho DNA present una A260 de 0,5. Por
calentamiento de dicha solucin a 90C la A260 fue de 1,5. Este aumento de
absorbancia tambin fue observado cuando el DNA mutante se someti a un
tratamiento con NaOH. La composicin de las bases nitrogenadas de una de
las hebras del DNA del mutante es de 30 % adenina y 24 % guanina. Una
porcin de la secuencia nucleotdica de este DNA fue la siguiente:
5-GATCAAACGCGTTCGAACTACCAT-3
a) Escriba en el sentido 5-->3 la secuencia de bases complementaria a la
secuencia indicada.
b) Calcule la Tm de la secuencia descripta considerando que por cada adenina
presente en la secuencia debe sumar 2C y por cada guanina 4C.
c) Cuntos pares de bases menos tiene el DNA mutante respecto al DNA
original del bacterifago lambda?
d) Cul es el porcentaje de C+T del DNA mutante?
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TRATAMIENTO A B C
NaOH 0,5 mM Insensible Insensible Insensible
Exorribonucleasa Insensible Insensible Insensible
Exodesoxirribonucleasa Hidrlisis total Insensible Insensible
Endorribonucleasa Insensible Insensible Insensible
Endodesoxirribo-nucleasa 3 fragmentos 1 fragmento 1 fragmento
PM: 3, 6 y 8 104 PM 17 104 PM 8 104
Contenido de bases A, T, C, G. A, T, C, G. A, T, C, G.
%G= 20 %G= 32 %G= 60
Efecto hipercrmico S S No
A260 3
Temperatura
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RESPUESTAS
1) b) 150 x 2 x 330 = 99.000
2) 31835000
3) a , c , b .
4) Tiene menor temperatura la a, porque la b presenta una zona unida muy
fuertemente por los pares CG seguidos y entonces se debe aumentar ms la
temperatura para separar las hebras.
5) cadena complementaria: T = 31,5 %, G = 23,7 %, A = 17 %, C= 27,7 %.
Doble cadena: A = 24,25, C = 25,7, T = 24,25, G = 25,7.
6) Nos dice que es un DNA simple hebra, ya que no presenta porcentajes
iguales de A y T, y C y G.
7) 30%.
8) Asumo doble hebra: 32 % A, 32 % T, 18 % C,18% G.
17 % A, 17 % T, 33 % C, 33 % G. Este es el DNA de la bacteria termoflica,
porque tiene un mayor porcentaje de pares de bases CG que forman mayor
nmero de puentes de hidrgeno, que le dan ms estabilidad y aumentan la
temperatura.
9) 9,4 10 -4g
10) 5882 pares de bases.
11) 372. Puede ser mayor, porque se necesitan nucletidos para indicar los
codones de iniciacin y terminacin, etc.
12) 44440, 1212 nucletidos
13) 4545 pares de bases, 1515 aminocidos
14) 68750, 0,6375 m
15) 177941, 4853 bases
16) Porque al ser mayor el nmero de pares de CG. esa doble hlice est
mucho ms estabilizada por la mayor cantidad de puentes de hidrgeno y por
lo tanto se va a requerir una temperatura mayor para desestabilizarla.
17) a) La absorbancia disminuye al enfriar, ya que el DNA se renaturaliza
porque las dos hebras no se separaron totalmente.
b) La absorbancia no cambia porque el DNA no se puede renaturalizar.
c) poli AT, poli CG, DNA circular.
18) Slo es verdadero la c.
19) (A+T)2 + (G+C)4 = Tm
a) 8x2 + 4x4 = 32
b) 6x2 + 6x4 = 36
c) 4x2 + 8x4 = 40
20) a) T de fusin de los DNA I y DNA II
b) Aa Absorbancia a 260nm de las 2 hebras de DNA separadas
Ab Absorbancia a 260 nm de la doble hlice
c) % CG de DNA II %CG de DNA I
21) DNA (porque el RNA se hidroliza), circular (porque origina un solo
fragmento con la endonucleasa), doble hlice (por aumento de absorbancia a
260 nm al elevar la temperatura) y peso molecular 8 105.
22) RNA circular simple hebra, peso molecular 2 106.
23) Peso molecular: 22000, no es protena ni RNA de cadena abierta, RNA,
simple hebra, circular.
24) DNA doble hebra, con Tm= 56C. No es protena (biuret negativo), no tiene
ribosa (periodato negativo). Es cido nucleico (absorbancia a 260), DNA (no se
hidroliz con NaOH), doble hebra (aumento de A260).
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25) ARN simple hebra lineal. Para justificar ver 16.
26) 39600 kDa. 20,4 . No se hidroliza por lcalis. Se hidroliza por exo y
endonucleasas. Aumenta la A260 al aumentar la temperatura.
17 % A, 17 % T, 33 % C, 33 % G.
27) a) 5-ATGGTAGTTCGAACGCGTTTGATC-3
b) 70 C c) 5882 pb d) 46 % si consideramos una hebra (50 % si consideramos
la molcula de DNA completa)
28) A: DNA lineal, PM 17 104, doble hebra, 20 % C, 20 % G, 30 % T, 30 % A.
B: DNA circular, PM 17 104, doble hebra, 32 % G, 32 % C, 18 % A, 18 % T.
C: DNA circular, PM 8 104, simple hebra, 60 % G.
2 corresponde a A, 1 a B y 3 a C.
29) a) 65C b) 100.000 c) 50 %
30) a) 1800/3= 600 aminocidos x 110= 66000 b) 1800 x 100 / 60= 3000 pares de
bases c) NaOH 5 M: se hidroliza totalmente, exorribonucleasa: se degrada totalmente,
endodesoxirribonucleasa: insensible, calentamiento por encima de la Tm: es simple
hebra por lo tanto no aumenta la Abs a 260 nm.
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MATERIAL SUPLEMENTARIO
Notacin taquigrfica
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