Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Universidad del Per (DECANA DE AMRICA)

Facultad de Farmacia y Bioqumica
Escuela Acadmico Profesional de Farmacia y Bioqumica

PRACTICA AMILASA Y
FOSFATASA
INTEGRANTE:
TACUNAN RIVEROS ERIKA LUCIA

CURSO: ANLISIS CLNICO II

PROFESORA: ELIZABETH CARRANZA ALVA

GRUPO: VIERNES 10am 2pm

MESA: N3
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CICLO: 2016-II

2016
AMILASA
(1,4--D-glucan glucanohidrolasa)
FUNDAMENTOS DEL METODO La -amilasa hidroliza el sustrato definido 2cloro-p-nitrofenil- -D-maltotrisido (CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-nitrofenol
(CNP), formndose 2-cloro-nitrofenil--D-maltsido (CNPG2), maltotriosa (G3) y
glucosa. El CNP absorbe a 405 nm y la velocidad de aparicin del color es
directamente proporcional a la actividad enzimtica.

Muestra
Suero o plasma heparinizado libre de hemlisis. La amilasa es estable por 7 das
conservada entre 18 y 25C. Y 2 meses a 4C.
Clculos
Determine el cambio de Absorbancia por minuto (A/min)
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2

Actividad -amilasa (UI/L) =

A/min x 3178

Factor =

Vt x 1000
= 3178
ECNP 405 x P x Vm

Vt = Volumen total de reaccin

ECNP405= Coef. de extincin milimolar del CNP a 405 nm.=12,9
P = Espesor del paso de luz en la cubeta (1 cm.)
Vm = Volumen de muestra utilizado
RESULTADOS:

ABS(INICIAL) = 0.676
ABS(60 SEG)= 0.682
ABS(120SEG)= 0.688

DIFERENCIA DE ABS (A): 0.006

Actividad -amilasa (UI/L) = A/min x 3178
Actividad -amilasa (UI/L) = 0.006/1 X 3178
Actividad -amilasa (UI/L) = 19,068
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Valores Normales: 20 - 96 U/L
No es posible indicar un intervalo de referencia estndar para este anlisis. Dado
que los valores de referencia dependen de muchos factores, incluyendo la edad
del paciente, el sexo, las caractersticas de la poblacin y el mtodo utilizado, los
resultados numricos de los anlisis tienen diferentes interpretaciones en
distintos laboratorios.
Como podemos observar existe una ligera disminucin de los niveles de amilasa,
segn fuente bibliogrfica en caso existiera una disminucin de la concentracin
de amilasa en sangre y en orina en una persona con sntomas de pancreatitis,
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debe pensarse en una lesin permanente de las clulas pancreticas productoras

de amilasa. La presencia de bajas concentraciones de amilasa puede atribuirse
tambin a enfermedad renal o a toxemia del embarazo.
BIBLIOGRAFA:
1.-Mattheieww- Lynch. Stanley S. Raphael. Mtodos de Laboratorios. 2da.
Edicin.Nueva Editora interamericana. Trad. Dr. Roberto Folch Fabre. Mxico D.F.
1984.pp 38-39
2.-Anderson- Cockayne. Qumica Clnica. Mc Gras Hill Interamericana. Trad.Teresa
Aguilar. Mxico D.f. 1993. pp 2 72

Fosfatasa Alcalina
FUNDAMENTOS DEL METODO La fosfatasa alcalina desdobla al fenilfosfato de
sodio en medio alcalino tamponado con aminometil propanol (AMP). El fenol
liberado se determina por reaccin con 4-aminoantipirina y ferricianuro como
agente oxidante. El color desarrollado es directamente proporcional a la actividad
enzimtica y se mide a 520 nm.

P-nitrofenilfosfato

p-nitrofenol +fosfato

PROCEDIMIENTO:

Sustrato (mL)

Bl
St
0,2
0,2
Pre incubar a 37 C x 5'

Suero (mL)
St (mL)

MP
0,2
0,02

0,02
Mezclar e incubar exactamente 10
R. color (mL)
1
1
Retirar los tubos del BM Leer a 405 m
CLCULOS

concentracion calibrador
Factor =
A /min . calibrador
Actividad PAL (UI/L) =factor xAbs.muestra

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factor =

VT X 1000
pnp X P X VM

Vt: volumen total de reaccin

pnp: coeficiente de extincin milimolar del p npp a 405 nm.
El coeficiente de extincin milimolar es 18.54
Fuente: Jos Antonio Brcena Ruiz, Concepcin Garca Alfonso. Caracterizacin
cintica de la fosfatasa alcalina. 30 .pg 05
P: espesor del paso de luz en la cubeta
Vm: volumen de muestra utilizado

O bien puede utilizarse el siguiente factor :

Actividad PAL (UI/L) =

factor =

A /min X factor

1.02 X 1000
=2751
18.54 X 1 X 0.02

RESULTADOS
TIEMPO

ABS

0.0

60 seg

0.218

120 seg

0.318

DIFERENCIA DE ABS (A)

Absorbancia 2-absorbancia 1 =0.218

Absorbancia 3-absorbancia 2 =0.1
0.218+0.1= 0.318/2 = 0.159

Actividad PAL (UI/L) = A/min x 2751

Actividad PAL (UI/L) = 0.159 x 2751
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Actividad PAL (UI/L) = 437.409

RANGOS DE REFERENCIA
mujeres
hombres
Nios hasta 15 aos
Nios hasta 17 aos

64 -306
80-306
Hasta 644
Hasta 483

VIII. INTERPRETACION DE RESULTADOS:

Los valores normales pueden variar ligeramente de un laboratorio a otro, por lo tanto no
es posible indicar un intervalo de referencia estndar ya que varian conforme la edad y el
sexo. Los niveles altos de FA normalmente se observan en nios que presentan un
aumento repentino en su crecimiento y en las mujeres embarazadas. Algunos
laboratorios usan diferentes medidas o pueden evaluar diferentes muestras.
Los resultados elevados de fosfatasa alcalina pueden deberse a una Obstruccin biliar
,Afecciones seas ,Enfermedad heptica o hepatitis ,Leucemia ,Linfoma ,Raquitismo
mientras que los resultados inferiores a los normales puede deberse a Desnutricin ,
Deficiencia de protena ,Enfermedad de Wilson
IX. BIBLIOGRAFA.
1. ALKALINE PHOSPHATASE BR (s.f.). Linear Chemicals,
de: http://www.linear.es/ficheros/archivos/8_1103005C.pdf

S.L.

Recuperado

2. Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", AACC Press, 4th ed.,
2001.
3. Demara, I.; Setta, F.; Lorenzo, L. - Rev. Asoc. Bioq. Arg. 54/3 (1990).
4. Martin P. Approach to the patient with liver disease. In: Goldman L, Schafer AI,
eds. Goldman-Cecil Medicine. 25th ed. Philadelphia, PA: Elsevier Saunders;
2016:chap 146.

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