PRACTICA No.

DETERMINACION CUANTITATIVA DE FOSFATASA ALCALINA.

Objetivo: Ejecuta e interpreta la determinacin de ALP con un anlisis reflexivo de interaccin terico practico en el diagnostico de alteraciones clnico metablicas.
Introduccin: La fosfatasa alcalina (ALP) es una enzima hidrolasa responsable de eliminar grupos de fosfatos de varios tipos de molculas como nucletidos, protenas y alcaloides. El proceso de eliminar el grupo fosftico se denomina desfosforilacin. Como sugiere su nombre, las fosfatasas alcalinas son ms efectivas en un entorno alcalino. La fosfatasa alcalina recibe el nombre de orto-fosfrico-monoster hidrolasa. Estas enzimas proceden de la ruptura normal de las clulas sanguneas y de otros tejidos, muchas de ellas no tienen un papel metablico en el plasma excepto las enzimas relacionadas con la coagulacin y con el sistema del complemento. La fosfatasa es una enzima clasificada dentro de las hidrolasas. Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en huesos, hgado, placenta, intestinos y rin. Tanto el aumento, as como su disminucin en plasma tienen significado clnico. Las causas de un aumento de ALP: Enfermedad sea de Paget, obstrucciones hepticas, hepatitis, hepatoxicidad por medicamentos y osteomalacia. Las causas de una disminucin de ALP: Cretinismo y dficit de vitamina C Fundamento: La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrlisis del p-nitrofenilfosfato (pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, segn la siguiente reaccin:

La velocidad de formacin del p-Nitrofenol, determinado fotomtricamente, es proporcional a la concentracin cataltica de fosfatasa alcalina en la muestra ensayada. Material y reactivos:

REACTIVOS R1 Tampn R2 Substrato

Dietanolamina (DEA) pH 10.4 Cloruro de magnesio p-Nitrofenisfosfato (pNPP)

1 mmol/L 0.5 mmol/L 10 mmol/L

Sistema de extraccin sangunea por mtodo Vacutainer 3 tubos de ensaye 1 gradilla 2 pipetas automticas 3 puntas amarillas para pipeta automtica 1 vaso de precipitado 1 charola 1 chuzo 1 cronometro

Bibliografa.
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003473.htm http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Fosfatasa_alcalina&oldid=64918447 http://www.biosimex.com.mx/pdf/insertos/QUIMICA%20CLINICA/11533.pdf http://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/41280.pdf

PRACTICA No. 10

DETERMINACION CUANTITATIVA DE PROTEINAS TOTALES.

Objetivo: Ejecuta e interpreta la determinacin de PT con un anlisis reflexivo de interaccin terico practico en el diagnstico de alteraciones clnico metablicas.
Introduccin: La protena total en suero, tambin llamada protena total en plasma o protena total, es una prueba bioqumica para medir la cantidad total de protena en plasma sanguneo o suero. La protena en el plasma est compuesta de albmina y globulina. La globulina, a su vez, est compuesta de globulinas 1, 2, , y . Estas fracciones pueden ser cuantificadas usando electroforesis de protenas, pero el examen de protena total, que estima el total de todas las fracciones juntas, es ms rpido y barato. El mtodo tradicional para medir la protena total usa el reactivo de Biuret, pero ahora, hay disponibles otros mtodos qumicos. Usualmente la medida es realizada junto con otros exmenes de laboratorio en analizadores automticos. El rango de referencia para la protena total es de 60-80g/L. Concentraciones debajo del rango de referencia usualmente reflejan la concentracin baja de albmina, por ejemplo en la enfermedad del hgado o la infeccin aguda. Las concentraciones sobre el rango de referencia son encontradas en paraproteinemia, la enfermedad de Hodgkin, o la leucemia. Fundamento: En medio alcalino las protenas dan un intenso color violeta azulado en precensia de sales de cobre; contiene yoduro como antioxidante. La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de protena total en la muestra ensayada Material y reactivos: REACTIVOS R Biuret

T PROTEIN CAL

Potasio sodio tartrato Yoduro sdico Yoduro de potasio Sulfato de cobre (II) Patrn primario de Albumina bovina

15 mmol/L 100 mmol/L 5 mmol/L 19 mmol/L 7 g/dL

Sistema de extraccin sangunea por mtodo Vacutainer 3 tubos de ensaye 1 gradilla 2 pipetas automaticas 3 puntas amarillas para pipeta automtica 1 vaso de precipitado 1 charola 1 chuzo 1 cronometro

Bibliografa.
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/005672.htm http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Prote%C3%ADna_total_en_suero&oldid=64539297 http://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/478970.pdf