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FISIOLOGIA BACTERIANA

Mgs. T.M. Maria Ester Aliaga


Doc. Microbiologa

FISIOLOGIA BACTERIANA
o

El estudio de las funciones realizadas por los


microorganismos.
La funcin fundamental de todo ser vivo es
crecer, esto es :
aumentar en forma ordenada el numero y la
masa de todos sus componentes celulares
y que estn compuestas fundamentalmente por
macromolculas de:
protenas,
polisacridos,
lpidos y
ac. nucleicos

FISIOLOGIA BACTERIANA
Biosntesis proteica:
Es una de las funciones ms importantes, ya
que se sintetizan fundamentalmente dos
clases de protenas:
Estructurales
Funcionales (enzimas)
Corresponden a protenas especializadas
que catalizan las reacciones qumicas del
metabolismo bacteriano

FISIOLOGIA BACTERIANA
Las bacterias:
Sintetizan en forma rpida todos sus
componentes celulares
La mayora son autosuficientes, por
presencia de genoma con la informacin
necesaria para realizar los procesos de:
duplicacin del ADN,
Transcripcin a ARN m
Traduccin a protenas

FISIOLOGIA BACTERIANA

La bacteria incorpora sustancias


necesarias para vivir, una vez en el
interior del citoplasma se producen
una serie de reacciones que en su
conjunto se define como
metabolismo bacteriano
La bacteria adems es capaz de
reproducirse, transmitiendo su
material gentico a la progenie

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
AGUA:
Ms del 80% de la composicin celular
bacteriana es agua.
Es el solvente universal, cumple una funcin
tampn y acta como coenzima de enzimas
hidrolasas.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Fuente de Carbono:
Todos los compuestos orgnicos poseen
carbono.
Las fuentes ms simples de carbono son el:
CO2 y
el CH4.

Fuentes ms complejas son:


aminocidos,
hidratos de carbono y
lpidos

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
De acuerdo a la fuente de carbono
utilizada las bacterias se clasifican en:

Auttrofas (littrofas): Utilizan como


fuente de carbono sustancias simples :
CO2 y CH4
Hetertrofas(organtrofas): Requieren
de
macromolculas
orgnicas
ms
complejas Ej.: Hidratos de carbono.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
NITROGENO:
o Componente principal de protenas y
ac. Nucleicos
AZUFRE:
Es utilizado por la bacteria para
sintetizar
aminocidos
azufrados
tales como la cisteina y metionina.
Tambin forma parte de vitaminas
como la biotina y tiamina.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Dadores y receptores de H2
Las bacterias patgenas para la especie
humana, realizan su metabolismo en base
a reacciones qumicas, obteniendo energa
fundamentalmente por oxido-reduccin.
De modo que requieren de sustratos
oxidables y aceptores finales de electrones

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Iones inorgnicos:
Fsforo
Potasio
Magnesio

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Oligoelementos:
Fierro
Cobre
Molibdeno
Zinc

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Factores de crecimiento:
Son aquellas sustancias indispensables,
pero, que la bacteria es incapaz de
sintetizar:
Bases nitrogenadas
Aminocidos
Colesterol
Vitaminas

Transporte de nutrientes
1.- Transporte pasivo. No consume
energa, ya que es un proceso de
difusin en el que las molculas pasan de
un lado al otro de la membrana a favor
de un gradiente de concentracin o
un gradiente elctrico (cargas
inicas).
Dentro del transporte pasivo se
diferencian:

Transporte de nutrientes

Difusin simple. Las molculas pasan a travs de la


bicapa lipdica de la membrana, sin que intervengan las
protenas. As se difunden el O2, el CO2, el H2O, la
urea, etc.

Transporte de nutrientes
Difusin facilitada. El transporte se
lleva cabo gracias a la intervencin de
Unas protenas transportadoras, que
pueden ser de dos tipos:
Protenas de canal, que son pequeos
poros que permiten el paso
fundamentalmente de iones inorgnicos
(Na+, K+, Cl-, Ca2+), por lo que
tambin se denominan canales inicos,
y se abren o se cierran en respuesta a
estmulos elctricos o a molculas
transmisoras.
Protenas transportadoras
(permeasas) que permiten el paso de
solutos orgnicos mediante un cambio
en la forma de la molcula
transportadora.

Transporte de nutrientes

2.- ACTIVO: Existe un gasto de


energa
Requiere de un sistema enzimtico,
para introducirlo contra una
gradiente de concentracin.
La sustancia que se transporta
se combina en el exterior con un
transportador unido a la membrana
que posteriormente la libera en el
interior de la clula, sin que sufra
ningn tipo de modificacin qumica

Transporte de nutrientes

3.-Translocacin de grupos:

Es el proceso en el que se modifica qumicamente al


compuesto que se transporta a travs de la membrana.
Los ejemplos mejor conocidos de este tipo de transporte
incluyen
a
la
glucosa,
manosa,
fructosa,
Nacetilglucosamina, y -glucsidos; que son fosforilados
durante el transporte, mediante un sistema de
fosfotransferasas.
Ac. Fosfoenol
piruvico

NUTRICION

La nutricin, tiene por objeto el aporte de


sustancias necesarias para el proceso de
biosntesis.
Este proceso requiere de energa la cul se
obtiene de dos fuentes:
Solar
Bacterias fotosintticas
Qumica
Bacterias quimiosintticas

FUENTES DE ENERGIA
COMPUESTOS QUMICOS

LUZ
FOTOTROFIA

QUIMIOTROFIA
COMPUESTOS
REDUCIDOS

FOTOTROFOS

COMPUESTOS
OXIDADOS

QUIMIOORGANOTROFOS

ATP

QUIMIOLITOTROFOS

Microorganismos de
importancia mdica

CLASIFICACION DE LOS ORGANISMOS


(SEGN FUENTE DE OBTENCION DE CARBONO Y ENERGIA)

Organismos

Fuente de Energa

Fototrofos

Luz

Quimiotrofos

Qumica

Fuente de C

Autotrofos

CO2

Heterotrofos

Comp Orgnicos

Fotoautotrofos

Luz

CO2

Fotoheterotrofos

Luz

Comp Orgnicos

Quimioautotrofos

Qumica

CO2

Quimioheterotrofos

Qumica

Comp Orgnicos

Condiciones fsico - qumicas


Condiciones que proporciona el medio
que influyen en el crecimiento
bacteriano:
Temperatura
Presin osmtica
pH

Temperatura

Temperatura de crecimiento Celsius

Bacterium

Minimo

Optimo

Maximo

Listeria monocytogenes

30-37

45

Thiobacillus novellus

25-30

42

Pseudomonas maltophilia
Staphylococcus aureus
Escherichia coli

Streptococcus pyogenes

Streptococcus pneumoniae
Bacillus flavothermus
Thermus aquaticus

Methanococcus jannaschii
Sulfolobus acidocaldarius
Pyrobacterium brockii

4
10
10
20
25
30
40
60
70
80

35

30-37
37
37
37
60

70-72
85

75-85

41
45
45
40
42
72
79
90
90

102-105 115

pH:

Acidfilas
Neutrfilas
Basfilas

1- 5,5
5,5 - 8
8,5- 11,5

Minimo pH

Optimo pH

Maximo pH

Lactobacillus acidophilus

4.0-4.6

5.8-6.6

6.8

Escherichia coli

4.4

6.0-7.0

9.0

Organismo

Staphylococcus aureus

Clostridium sporogenes

4.2

5.0-5.8

7.0-7.5
6.0-7.6

9.3
8.5-9.0

Pseudomonas aeruginosa

5.6

6.6-7.0

8.0

Streptococcus pneumoniae

6.5

7.8

8.3

Presin osmtica (salinidad)

Halfitas
Halfitas leves
Halfitas moderadas
Halfitas extremas

< 1% NaCl
1-6 % (S aureus)
6-15 %
16-30 % (arqueas)

METABOLISMO BACTERIANO
El metabolismo
Es el conjunto de reacciones y procesos
fsico-qumicos que ocurren en una clula,
son la base de la vida a nivel molecular, y
permiten las diversas actividades de las
clulas:
crecer,
reproducirse,
mantener sus estructuras,
responder a estmulos, etc.

METABOLISMO BACTERIANO

Endoenzimas: Comandan y regulan todas las reacciones de


sntesis y degradacin: Oxidasas, reductasas, Transaminasas
Exoenzimas: Degradan macromolcula: Hidrolasas

Sntesis de enzimas:
Constitutivas: Sntesis independiente del medio externo, se
sintetizan siempre Ej. Enzimas que degradan la glucosa.

Inducidas: Sntesis depende de la presencia de o ausencia


del sustrato en el medio Ej.: -galactiosidasa solo se sintesiza
cuando existe lactosa en el medio.

METABOLISMO BACTERIANO

Las sustancias capaces de acelerar una reaccin


qumica se denominan catalizadores
En las clulas vivas los catalizadores biolgicos
son las enzimas
Cada enzima acta sobre un sustrato especfico y
cataliza exclusivamente una reaccin
La funcin crucial e las enzimas consiste en
acelerar las reacciones bioqumicas a una
temperatura compatible con el funcionamiento
normal de la clula

METABOLISMO BACTERIANO
Clase de enzima

Tipo de reaccin
qumica que cataliza

Ejemplo

Oxidorreductasa

Ox red con ganancia


o perdida de oxigeno e
hidrgeno

Citocromo oxidasa
Lactato
deshidrogenasa

Hidrlisis agregando
agua

Lipasa, sacarasas etc

Transferasas

Hidrolasas
Isomerasas
Ligasas

Transferencias de
grupos funcionales
como grupos: aminos,
acetilo o fosfatos

Reordenamiento de los
tomos en el interior
de la molcula

Acetato cinasa
Alanina desaminasa

Glucosafosfatoisomerasa

Unin de dos molculas Acetil CoA sintetasa,


DNA ligasa

Regulacin metablica
La sntesis proteica esta regulada a travs del
sistema de operones, que es un grupo de genes
estructurales cuya expresin esta regulada por
elementos de control o genes (promotor operador )
y genes reguladores los cuales corresponden a
unidades regulatorias gnicas

un gen regulador: controla


el tiempo y velocidad de
trascripcin de otros genes
Codifica para una protena
que se pega al operador,
obstruyendo el promotor

Un promotor: donde la ARN


polimerasa reconoce el sitio
de inicio de la transcripcin

un operador: controla el acceso


de la ARN polimerasa al promotor

un gen estructural:
codifican las enzimas
relacionadas o las protenas
estructurales

METABOLISMO
BACTERIANO

El metabolismo se puede dividir en dos clases de


reacciones qumicas: las que liberan energa y las
que consumen energa

Reacciones de degradacin CATABOLICAS


Proceso de degradacin de los sustratos orgnicos (H
de C, lpidos y proteinas) y de su conversin en
energa utilizable ATP
Reacciones de sntesis
ANABOLICAS
La energa obtenida del catabolismo es empleada en
la sntesis de componentes celulares (pared celular,
protenas, ac. Grasos, y ac. Nucleico

METABOLISMO BACTERIANO
ANABOLISMO

POLISACARIDOS

PEPTIDOGLICANO

Piruvato

ACIDOS
NUCLEICOS

PROTEINAS

LIPIDOS

METABOLISMO BACTERIANO
CATABOLISMO

ANABOLISMO

Fuentes de energa

macromolculas
ATP

ADP
Productos metablicos

Nutrientes externos

pool precursores
intracelulares

METABOLISMO BACTERIANO

La energa se requiere continuamente


para:
Catabolismo
Anabolismo (Biosntesis).
Transporte Activo.
Traslocacin de protenas a travs de la
membrana citoplasmtica.
Movimiento flagelar.

METABOLISMO BACTERIANO
En las bacterias de inters mdico
los sistemas de oxido-reduccin
que transforman la energa qumica
de los nutrientes en una forma
biolgicamente til, incluyen :
La fermentacin
La respiracin.

METABOLISMO BACTERIANO

En la fermentacin tanto la molcula


dadora como la aceptora de electrones,
son compuestos orgnicos,
En la respiracin hay un aceptor final
exgeno, que cuando es el oxgeno
hablamos de respiracin aerobia, y
cuando es un compuesto inorgnico
hablamos de respiracin anaerobia

METABOLISMO BACTERIANO

En las bacterias el aceptor final de electrones


puede ser: O2, nitratos, sulfatos, o sustancias
orgnicas.
Esta capacidad de aceptor final de electrones
permite clasificar las bacteria en tres grupos:

METABOLISMO BACTERIANO

Aerobio estricto

Receptor final es el O2.

Anaerobio estricto

Receptor final es SO4 o NO3.

Aerobio facultativo

respiracin aerbica

anaerbica
fermentacin
(Mayora de bacterias

Ej: Mycobacterium tuberculosis


Ej: Clostridium perfringens)

patgenas para le especie


humana)

BACTERIAS HETEROTROFAS
RUTAS CATABOLICAS QUE PRODUCEN ENERGIA
FOSFORILACION A NIVEL DE SUSTRATO

* fermentacin

oxidacin parcial
molec orgnica

ATP
FOSFORILACION OXIDATIVA

* respiracin

fuerza motriz
de protones

FERMENTACION

Va Embden Meyerhoff

(Ausencia de oxigeno)

glucosa -6-P

piruvato

c lctico

butanediol

etanol
mixta

butanolacetona

c
propionico

FOSFORILACION A NIVEL SUSTRATO

Fase
preparatoria

Fase
Conservacin
de energa

ATP

ATP

Fosforilacin oxidativa

Ciclo de Krebs

Regulacin metablica

En un medio optimo, la clula regula sus


vas metablicas tan eficientemente que
ningn intermediario es sintetizado en
exceso
Si existe una fuente de carbn en exceso,
se pone en juego toda la maquinaria
enzimtico para utilizarla
Si un aminocido esta en exceso, se
reprime su biosntesis.

Regulacin metablica
La regulacin enzimtica se
realiza fundamentalmente en dos
niveles:
Actividad enzimtica: enzimas
alostricas, fosforilacin
Sntesis enzimtica : regulacin
de la expresin gnica, operones

Multiplicacin Bacteriana
Como resultado del metabolismo bacteriano, el
microorganismo crece y se multiplica.
La multiplicacin implica el aumento del
nmero, pero no del tamao bacteriano. Estas,
se reproducen normalmente por fisin binaria.

Divisin
Celular
El primer paso es la duplicacin
del ADN.
Posteriormente, la membrana
citoplasmtica y la pared celular se
invaginan, separando en dos
regiones el ADN cromosmico.
Finalmente, las paredes en
crecimiento se unen formando dos
clulas individuales, cada una de
las cuales es esencialmente
idntica a la clula parental.

TIEMPO DE GENERACION (G)


Es el intervalo de tiempo que transcurre en que una
clula se divide y da origen a la formacin de dos
clulas. Ej. Escherichia coli el G = 20 min. Se dice
que las bacterias crecen en forma exponencial o
logartmica:
1 generacin
2 generaciones
3 generaciones
4 generaciones
5 generaciones
6 generaciones
n generaciones

2 clulas
4 clulas
8 clulas
16 clulas
32 clulas
64 clulas
2n

CURVA DE CRECIMIENTO
oSe observa el crecimiento de una bacteria
en un medio lquido (Bach), al que no se
agregan ni se quitan sustancias,
oEst representado por una serie de fases o
etapas
o El perodo de tiempo que dura cada fase
depender de las caractersticas de las
bacterias y medio de cultivo.

CURVA DE CRECIMIENTO

Latencia : La fase de
latencia dura
aproximadamente 4 hrs.
No hay crecimiento
visible y de hecho puede
haber una reduccin en el
nmero de bacterias.
Es un perodo de
adaptacin, en que las
bacterias tienen una gran
actividad metablica, pero
no se dividen

CURVA DE CRECIMIENTO

Logartmica : Despus de
6 hrs., aproximadamente,
de haber sembrado las
bacterias en un medio
ptimo, las bacterias
comienzan a dividirse en
forma constante y mxima.
El nmero de bacterias
aumenta en progresin
geomtrica y la resultante
es una lnea recta
ascendente. Este perodo
termina ms o menosa las
12 hrs, debido a la
disminucin de los
nutrientes disponibles

CURVA DE CRECIMIENTO

Estacionaria : Debido a la
acumulacin de desechos
metablicos y disminucin de
los nutrientes, la actividad
metablica decae.
Las bacterias se dividen con
menor frecuencia y el nmero
total de bacterias vivas
permanece constante, puesto
que el nmero de muertes se
equilibra con el de
multiplicacin.
En la mayora de las bacterias
esta fase se produce entre las
18 a 24 hrs.

CURVA DE CRECIMIENTO

Regresin : En esta fase,


conocida tambin como
fase de muerte, las
bacterias dejan de
multiplicarse y mueren con
el tiempo, debido al
trmino de nutrientes,
acumulacin de material
de desecho y disminucin
del espacio fsico.
No todas las bacterias del
cultivo se encuentran en
esta fase al mismo tiempo,
por lo tanto se representa
como una pendiente, que
no llega a 0
Esta curva slo se produce
en condiciones de
laboratorio.

Factores que afectan el


crecimiento bacteriano
Temperatura
pH

Agua

Concentracin de sales
Oxgeno

MEDICION CRECIMIENTO BACTERIANO


1. Conteo del nmero de clulas (microscopio).
2. Por la turbidez del cultivo en medio lquido.
3. Medicin del peso seco de la masa celular.
4. Medicin de la concentracin de nitrgeno.
5. Recuento en placa de bacterias viables.
6. Filtracin por membrana
7. Mtodo de los tubos mltiples.

Medicin del Crecimiento


(Cmara de Neubauer)

Medicin del Crecimiento (Tubos Mltiples)

Medicin del crecimiento

Espectrofotmetro en medida del crecimiento

GRACIAS

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