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FISIOLOGÍA Y METABOLISMO BACTERIANO

Las bacterias son seres vivos y están compuestas al igual que las células eucariotas por proteínas,
polisacáridos, lípidos, ácidos nucleicos, entre otros.
Estas moléculas a su vez forman parte de estructuras celulares más complejas, como por ejemplo la pared
celular y la membrana citoplasmática.

El crecimiento bacteriano se define como:


1. El aumento ordenado de todos los constituyentes químicos de la célula.
2. La replicación de todas las estructuras y componentes celulares a partir de nutrientes exógenos y
transmite su material genético a la progenie, a través de reproducción asexual denominada FISION
BINARIA O BIPARTICIÓN.
3. Incorpora las sustancias necesarias, en el interior (citoplasma) se producen la reacciones, que se
define como METABOLISMO BACTERIANO.

La fisiología y del metabolismo bacteriano tiene algunas aplicaciones prácticas


– Permite conocer el modo de vida y el hábitat de diferentes especies bacterianas. El ser humano
actuando como hospedero por ejemplo, ofrece una variedad de nichos ecológicos que se diferencian
entre sí por aspectos físicos y químicos (temperatura, concentración de O2, pH, presión osmótica, etc.)
en los cuales pueden crecer y multiplicarse distintas especies bacterianas, de acuerdo a sus
requerimientos nutricionales.
– Permite formular medios de cultivo para el aislamiento e identificación de los patógenos participantes.
– Desde el punto de vista terapéutico nos permite conocer y entender el modo de acción de algunos
antimicrobianos que bloquean una vía metabólica o la síntesis de alguna macromolécula esencial para
la bacteria.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES

– Punto de vista de los fines de aprovisionamiento de energía:


Litotrofía: Solo requieren sustancias inorgánicas sencillas donantes de electrones: SH 2, SO, NH3, NO2-
Fe2+
Organotrofía: Requieren compuestos orgánicos (hidratos de carbono, hidrocarburos, lípidos,
proteínas, alcoholes)

– Punto de vista biosintético (fuente de carbono):


Autótrofos: Crecen sintetizando sus materiales a partir de sustancias inorgánicas simples (fijación del
metano y CO2)
Heterótrofos: Fuente de carbono es orgánica

Todas las bacterias necesitan captar elementos químicos que según las cantidades en que son requeridas
se clasifican en:
– Macronutrientes: C, H, O, N P, S, K, Mg, Ca, Fe
– Micronutrientes (trozos): Mn, Co, Cu, Zn, Mo, Ni

Fuente de carbono (todos los compuestos orgánicos lo poseen):


Fuentes más simples:
– Dióxido de carbono (CO2)
– Metano (CH4)
Fuentes más complejas:
– Aminoácidos
– Hidratos de carbono
– Lípidos
Agua
– Más del 80% de la composición celular bacteriana. Cumple función de tampón y actúa como coenzima
de enzimas hidrolasas
– Principal constituyente del protoplasto bacteriano;
– Medio universal donde ocurren las reacciones biológicas.
– Reactante en exceso (es decir, un producto resultante de algunas reacciones bioquímicas).
Fuentes de agua:
– Endógena (procedente de oxido-reducciones)
– Exógena (la mayoría) procedente del medio, y que difunde a través de las membranas.

Nitrógeno
– Componente principal de proteínas y Ácidos Nucleicos

Azufre
– Es utilizado por la bacteria para sintetizar aminoácidos azufrados tales como la cisteina y metionina.
También forma parte de vitaminas como la biotina y tiamina.

Ion Potasio K+:


– Activación de enzimas y Asociado con Ac. teicoicos de Gram+

Ion Magnesio Mg2+:


– Estabiliza ribosomas, membranas y ácidos Nucleícos, Cofactor en reacciones con ATP, en clorofilas y
bacterioclorofilas

Ion Calcio Ca2+:


– Cofactor de enzimas como proteinasas

El Hierro como ion Fe2+:


– En citocromos, FeS-proteínas y Cofactor en enzimas

Factores de Crecimiento: Moléculas orgánicas, esenciales que no pueden ser sintetizadas por el M.O.,
requeridas en pequeñas cantidades.
Aminoácidos: síntesis de proteínas.
Purinas-pirimidinas: síntesis de ácidos nucleicos. Vitaminas: Cofactores enzimático.
Factores Estimulantes: son aquellos que acelera el proceso de crecimiento de las bacterias, no son
imprescindible.

CLASIFICACIÓN DE LOS ORGANISMOS


(Según fuente de obtención de carbono y energía)

Organismos Fuente de energía Fuente de carbono


Fotótrofos Luz
Quimiotrofos Química
Autótrofos CO2
Heterótrofos Compuesto orgánico
Fotoautótrofos Luz CO2
Fotoheterótrofos Luz Compuesto orgánico
Quimioautótrofos Química CO2
Quimioheterótrofos Química Compuesto orgánico
Funciones de nutrición
– Los nutrientes se necesitan para
1. Fines energéticos (catabólicas (degradación) o de mantenimiento)
2. Fines biosintéticos (anabolismo (síntesis) o reacciones plásticas (polimerización))

– Los procariotas incorporan los nutrientes que necesitan y excretan los productos de deshecho de su
metabolismo a través de la membrana plasmática, entre las que se cuentan, al igual que en la célula
eucariota, la difusión simple, la difusión facilitada y el transporte activo.
– La rígida pared celular les impide experimentar deformaciones, por lo que no son posibles los
fenómenos de endocitosis, exocitosis y los procesos de digestión celular
– Los nutrientes que incorporan las células procariotas deben ser de bajo peso molecular, como por
ejemplo monosacáridos, aminoácidos, ácidos grasos, etc., nunca macromoléculas

Membrana plasmática
– Semipermeable
– Transporte selectivo
– Mantención de ambientes extra e intracelular
– Capas:
1. Espacio extracelular
2. Canales transportadores
3. Espacio intracelular

Transporte de nutrientes
Transporte pasivo: No consume energía, ya que es un proceso de difusión en el que las moléculas
pasan de un lado al otro de la membrana a favor de un gradiente de concentración o un gradiente
eléctrico (cargas iónicas).

Dentro del transporte pasivo se diferencian:


– Transporte inespecífico
Difusión simple: Las moléculas pasan a través de la bicapa lipídica de la membrana, sin que
intervengan las proteínas. Así se difunden el O2, CO2, H2O, la urea.
– Transporte especifico
Difusión facilitada: El transporte se lleva a cabo gracias a la intervención de Unas proteínas
transportadoras, que pueden ser de dos tipos:
Proteínas de canal, que son pequeños poros que permiten el paso fundamentalmente de iones
inorgánicos (Na+, K+, Cl-, Ca2+), por lo que también se denominan canales iónicos, y se abren o se
cierran en respuesta a estímulos eléctricos o a moléculas transmisoras.
Proteínas transportadoras (permeasas) que permiten el paso de solutos orgánicos mediante un
cambio en la forma de la molécula transportadora.

Transporte activo: Existe un gasto de energía. Requiere de un sistema enzimático, para introducirlo
contra una gradiente de concentración.
La sustancia que se transporta se combina en el exterior con un transportador unido a la membrana que
posteriormente la libera en el interior de la célula, sin que sufra ningún tipo de modificación química.

O2  Difusión pasiva
Na+  Difusión por acuaporina
Glucosa  Difusión facilitada por Carrier proteico
Na+ / K+  Transporte activo en contra de la gradiente de concentración con gasto de energía
Translocación de grupos: Es el proceso en el que se modifica químicamente al compuesto que se
transporta a través de la membrana. Los ejemplos mejor conocidos de este tipo de transporte incluyen a
la glucosa, manosa, fructosa, N- acetilglucosamina, y β-glucósidos; que son fosforilados durante el
transporte, mediante un sistema de fosfotransferasas.

En la translocación de grupos, una forma especial de transporte activo que tiene lugar exclusivamente en
procariotas, la sustancia es alterada químicamente durante su transporte a través de la membrana.

Metabolismo
– Obtener energía química del entorno y almacenarla, para luego usarla en diferentes funciones
celulares.
– Convertir los nutrientes exógenos en unidades precursoras de los componentes macromoleculares de
la célula bacteriana
– Formar y degradar moléculas necesarias para cumplir funciones celulares específicas, por ejemplo:
Movilidad y captación de nutrientes.

Función del metabolismo bacteriano


– La energía se requiere continuamente para: Catabolismo
– Anabolismo (Biosíntesis). Transporte Activo.
– Translocación de proteínas a través de la membrana citoplasmática.
– Movimiento flagelar.
Todos los procesos bioquímicos ocurren dentro de la célula

Metabolismo
Reacciones degradativas: Proporcionan energía (reacciones catabólicas)
Reacciones sintéticas: Proporcionan componentes estructurales (reacciones anabólicas)
Catabolismo: Obtención de energía
– Glicólisis o glucólisis
– Ciclo de Krebs o ácidos tricarboxílicos (ATC)
– Sistema de transporte de electrones o fosforilación oxidativa

Glicólisis
– Lisis del azúcar
– Degradación de glucosa (6C) a 2 piruvatos (3C)
– Ocurre en el citoplasma de procariontes y eucariontes
– Ganancia neta 2ATP por cada molécula de glucosa
– Fosforilación oxidativa con 2NADH produce 6ATP

En las bacterias se encuentran las 3 vías centrales del metabolismo intermediario de los hidratos de
carbono:
– la vía glucolítica o de Embden Meyerhof Parnas
– la vía de pentosa fosfato o shunt de las pentosas
– la vía de Entner- Doudoroff.
GLICOLISIS

Destinos del ácido pirúvico


Ciclo de Krebs
– Oxidación completa y degradación de glucosa y otras moléculas
– Común en bacteria aeróbica, protozoos, mayoría de las algas y hongos
– La oxidación de glucosa produce 2 moléculas de ácido pirúvico (2 moléculas de Acetil CoA)
– Por cada molécula de Acetil-CoA, el ciclo de Krebs genera:
a. 2 moléculas de CO2
b. 3 moléculas de NADH equivalente a 9 ATP
c. 1 FADH2 equivalente a 2 ATP
d. 1 GTP o 1 ATP
Fosforilación oxidativa
– 1 glucosa = 38 ATP
– Glicolisis = 8 ATP
– Ciclo de Krebs = 30 ATP

Fermentación
– Permite obtener energía desde azucares y otras moléculas orgánicas
– No requiere oxígeno
– No requiere el uso del ciclo de Krebs o cadena transportada de electrones
– Usa una molécula orgánica como aceptor final de electrones
– Permite la generación de baja cantidad de ATP

La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, que no requiere oxigeno (anaeróbico),


siendo el producto final un compuesto orgánico (piruvato).

La respiración es un proceso en que hay un aceptor final de exógeno, que cuando es el oxígeno hablamos
de RESPIRACIÓN AERÓBICA y cuando es un compuesto inorgánico como sulfato, nitrato o CO 2, sin
utilización de oxígeno, se habla de RESPIRACIÓN ANAERÓBICA

Clasificación según tolerancia al oxígeno


– Anaerobias estrictas: Carecen de SOD, catalasa y peroxidasa por lo que el 0 2 es muy tóxico para
ellas. Ejemplo: Clostridium haemolyticum
– Anaerobias moderadas: Soportan presiones de 02 de 2 – 8%. Pueden estar expuestas al aire por 60
– 90 minutos sin perder viabilidad.
Ejemplo: Bacteroides fragilis
– Anaerobias aerotolerantes: Poseen algún nivel de enzimas detoxificantes.
Ejemplos: Lactobacillus spp, Leuconostoc spp.
– Microaerofilicas: Sobreviven a presiones de 02 menores a la atmósfera (<21%). Son capnofilicas
(requieren CO2).
Ejemplo: Campylobacter spp.
– Anaerobias facultativas: Pueden realizar metabolismo anaerobio o aerobio dependiendo del
ambiente. Ejemplo: Escherichia coli y otras enterobacterias.
– Aerobias estrictas: Solo crecen en presencia de O2.
Ejemplo: Pseudomonas sp.

Anabolismo
Síntesis de componentes estructurales
Según su fuente de carbono, las bacterias se clasifican en:
– Heterótrofas: Obtiene el carbono a partir de moléculas más complejas. Ejemplo: Hidratos de
carbono, aminoácidos, lípidos.
– Autótrofas: Obtienen el carbono a partir de moléculas simples. Ejemplo: CO2, CH4

La mayoría de las bacterias de interés clínico son heterótrofas


Fijación de CO2
Ciclo de Calvin
– En el ciclo de Calvin, los átomos de carbono del CO2 se fijan (se incorporan a moléculas orgánicas) y
se utilizan para formar azúcares de tres carbonos. Este proceso es estimulado por el ATP y NADPH que
provienen de las reacciones luminosas, y depende de ellos. A diferencia de las reacciones
dependientes de la luz, que ocurren en la membrana tilacoidal, las reacciones del ciclo de Calvin
ocurren en el estroma (espacio interior de los cloroplastos).
– Es realizado por todas las bacterias fototróficas.
Resumen de los reactivos y productos del ciclo de Calvin:
Se necesitan tres vueltas al ciclo de Calvin para crear una molécula de G3P que pueda salir del ciclo para
formar glucosa. Resumamos las cantidades de moléculas clave que entran y salen del ciclo de Calvin a
medida que se crea una molécula de G3P neta. En tres vueltas del ciclo de Calvin:

Carbono: 2 moléculas de CO2 se combinan con 3 receptores de RuBP, lo cual forma 6 moléculas de
gliceraldehído-3-fosfato (G3P).
– 1 molécula de G3P sale del ciclo para formar glucosa
– 5 moléculas de G3P se reciclan, lo cual genera 3 moléculas aceptoras de RuBP

ATP: 9 moléculas de ATP se convierten en 9 ADP (6 durante la etapa de fijación y 3 durante la etapa de
regeneración).

NADPH: 6 moléculas de NADPH se convierten en 6 moléculas de NADP+ (durante la etapa de reducción).

Una molécula de G3P contiene tres átomos de carbono fijo, por lo que toma dos G3P para formar una
molécula de glucosa de seis carbonos. Se necesitarían seis vueltas del ciclo o 6 CO 2, 18 ATP y 12 NADPH
para producir una molécula de glucosa.
Fijación de moléculas simples

Fijación de Fósforo (P)


Pi: fosfato inorgánico

Fotofosforilación: Formación de ATP desde ADP y Pi durante la fotosíntesis


Fosforilación oxidativa: Formación de ATP desde ADP y Pi durante la cadena transportadora de
electrones
Fosforilación a nivel de sustrato: Durante la glicólisis

1,3 – Bifosfoglicerato + ADP 3 – Fosfoglicerato + ATP

Fijación de Azufre (S)


ATP
2-
SO 4 H2S
H2S + Serina Cisteína + H2O

Fijación del Nitrógeno (N)

NO3- + H+ + NADH NO2- + NAD+ + H20


NO2- NH3
N2 NH3

NH3 + Ácido glutámico

ATP

Glutamina

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