FUNDAMENTOS

Tincin Giemsa:
La tcnica de Giemsa est formada por varios colorantes: los tintes neutros
utilizados combinan el azul de metileno como tinte bsico y la eosina como
tinte cido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un
colorante metacromtico, de ah que muchas estructuras se tian de
prpura y no de azul. El pH de la solucin de coloracin es crtico, entre 6.4
y 6.9 por lo que se debe ajustar idealmente segn diversos fijadores.
Cmo vemos las clulas con esta tincin
Citoplasma: rosa
Ncleos: azul
Eritrocitos: rojo
Grnulos de las clulas cebadas: violeta
Bacterias: azul
Parsitos: azul
Uso colorantes Safranina: Es conocido como de contraste, ya que se usa
para diferenciar una estructura celular previamente teida con otro
colorante.
La tcnica de tincin giemsa y safranina ayudan a la diferenciacin y
reconocimiento de las clulas denotando su ncleo y su citoplasma, al teir
con giemsa el citoplasma se tie de rosa claro y el ncleo de color azul, pero
despus de aadirle colorante safranina el ncleo se tie rosa oscuro
debido a que la safranina es usada despus de otros colorantes para poder
denotar algunos organelos celulares.

Marco terico

Para poder lograr comprender la metodologa de esta prctica y los

resultados que se obtuvieron tendremos que dar una breve resea del
equipo utilizado; su funcin, descripcin de los colorantes utilizados en la
prctica.
Equipo:
Vortex: Es un pequeo agitador que se utiliza en los laboratorios de qumica
y biologa para mezclar lquidos o preparar disoluciones y suspensiones.
Proporciona una rpida mezcla de las sustancias contenidas en un tubo de
ensayo gracias a su movimiento vibratorio.
Centrifuga: Se usan generalmente en procesos como la separacin por
sedimentacin de los componentes slidos de los lquidos biolgicos y, en
particular, en la separacin de los componentes de la sangre: glbulos rojos,
glbulos blancos, plasma y plaquetas, entre otros, y para la realizacin de
mltiples pruebas y tratamientos.
La tincin de Giemsa: es un mtodo habitual para el examen de frotis
sanguneos, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas. Es muy
til para la identificacin de riketsias (plasmodium), protozoos.
Colorante Safranina: es un colorante biolgico tambin conocido como
dimetil safranina y rojo bsico 2. Al ser una molcula cargada positivamente
(catin) es capaz de combinarse con elementos celulares de cargas
negativas. La tincin de safranina es de contraste, ya que se usa para
diferenciar una estructura celular previamente teida con otro colorante. Se
utiliza en distintas tcnicas histolgicas que detectan clulas
enterocromafines del tracto gastrointestinal, el protoplasma y ncleo de
microorganismos patgenos.
Decantar: ser realizada separando una mezcla heterognea compuesta de
dos lquidos inmiscibles.

OBJETIVO

El alumno aprender a realizar y observar las clulas bocales mediante la

tincin Giemsa y el microscopio.

METODOLOGIA
1. Tomar 3 hisopos y raspar la mejilla bocal de uno de los integrantes
del equipo.
2. Agregar en un tubo de 2ml cloruro de sodio, insertar tres hisopos con
el rapado de mejilla al tubo.
3. Cerrar el tubo y pasarlo al vortex por 2 min.

4.
5.
6.
7.
8.

Dividir la muestra en dos tubos de 1ml en cada uno

Encender la centrifuga y colocar el tubo con la masa bocal por 3 min
Decantar con cuidado y dejar solo la masa
Sacar el tubo e homogenizar
Y colocar la muestra en el porta objetos de cada integrante del equipo
con 20ml de muestra.

9. Dejar secar la muestra y fijarla

10. Realizar la tincin Giemsa; colocar giemsa por 8min e enjuagar y

despus agregar 1 min de safranina e enjuagar.(dejar secar)
11. Fijarla con el cubre objetos utilizando barniz en las orillas e observar
la muestra
12. Observar las clulas por el microscopio

RESULTADOS

Ncleo
Empalmad
as

Clulas
salivales
Se observa las clulas del raspado
de mejilla, en cual se nota el ncleo
pero estn un poco juntas pero se
precia buen las clulas.

REFERENCIAS:
http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2012/ir122f.pdf
www.materlab.com/documentacion/hematologia/colorantes/catalogo_general
_tinciones.pdf