TINCIN DE WRIGHT

INTRODUCCIN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguneos, es necesario colorearlos. En
la mayora de los laboratorios los colorantes ms empleados para la tincin
hematolgica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente
con la mezcla de eosina (cido) y azul de metileno (bsico). Adems se han
incorporado el empleo de derivados por oxidacin del azul de metileno que se
conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la
coloracin prpura o roja de ciertas estructuras. Tanto la eosina como el azul
de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes
estructuras celulares, de forma que las que tienen carcter bsico fijan la
eosina mientras que las que poseen propiedades cidas fijan principalmente el
azul de metileno. Esto explica que las estructuras basfilas se tian de color
azul mientras que los competente acidfilas adquieren un color rosado. La
diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmticas por dichos
colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.
Esta coloracin es conocida como policromtica debido a que produce varios
colores. Es una solucin de alcohol metlico de un colorante cido (eosina) y
otro bsico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis
sanguneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solucin
tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorcin por los
diferentes componentes celulares.
La tincin Wright es de gran trascendencia clnica ya que gracias a ella es
capaz de identificarse diversas estructuras en una clula as como la
morfologa y en su caso patologa celular no solo de las clulas del sistema
inmunolgico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un
paciente sano o con un estado patolgico

Materiales:
Colorante de Wright: para 100 mL de alcohol metlico se requiere de
colorante de Wright (0.3g).
Solucin amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada se
agregan 3.76 g de hidrofosfato disdico (Na2HPO4* 2H20) y 2.10g de fosfato
de potasio dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar todos los reactivos y guardar en
frasco de vidrio en lugar fresco. Ajustar el pH a 7,2 o en algunos casos se
utiliza solo agua destilada
Rejilla horizontal o soporte de tincin.
Materiales para extraccin de muestra:
Guantes
Algodn

Ligadura
Tubo lila con EDTA
Sistema Vacutainer
Alcohol
Marcador o Plumn

EQUIPO:
Microscopio ptico Binocular

MUESTRA:
Sangre Perifrica

EXTRACCIN DE LA MUESTRA SANGUNEA

Cuando el paciente est cmodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir
un sitio para la puncin. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.
Palpamos la vena para averiguar sus caractersticas (tamao, elasticidad o
rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.
Limpiamos con alcohol la zona elegida para la puncin.
Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dnde pincha,
pedir al paciente de cerrar el puo para aumentar el volumen de sangre
intravenosa (Un tiempo de compresin demasiado largo causa la acumulacin
de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
algunas de las pruebas.)
Tomamos la aguja con el bisel hacia arriba y puncionamos la piel muy suave y
rpido movimiento. Pedimos al paciente que abra la mano.
Cuando hemos llenado y quitado el tubo, soltamos el torniquete y colocamos
una gaza o algodn sobre el sitio de la puncin. Retiramos con cuidado la
aguja. Cuando sta haya salido del brazo del paciente ejercemos presin en la
gaza para impedir que salga la sangre.
Y Por ltimo rotulamos adecuadamente el tubo

PREPARACION

DEL

FROTIS:

Obtenida la muestra sangunea procedemos a:

Preparar todo nuestro material y equipos de trabajo.
Limpiamos la lmina porta objeto para evitar grasas.
Con un gotero o un capilar obtenemos la muestra, y procedemos a
colocar una gota sobre el porta objeto y con otra lmina (biselada)
realizamos el frotis de esta.
El extendido debe tener cabeza, cuerpo y cola.
Rotulamos la lmina
Dejamos secar la lmina con el extendido sobre ella a medio
ambiente

TCNICA:
RESULTADOS:
Los eritrocitos se observarn de color naranja o rosado.
El citoplasma de los monocitos presentar una tonalidad azul griscea con
grnulo rojizos bastante finos y sus vacuolas caractersticas. El citoplasma de
los linfocitos presentar varias tonalidades azules.

 Los ncleos de los linfocitos y neutrfilos aparecern de color prpura oscuro.

Los ncleos de los monocitos de color prpura algo ms claros (lila).
Los grnulos de los eosinfilos son de color rojo-anaranjado intenso. Los
grnulos de los basfilos prpura azulado muy oscuro. Los grnulos de los
neutrfilos se aprecian de color lila, bastante finos.
Las plaquetas toman coloracin violeta o prpura.

OBSERVACIONES:
Los tiempos varan de acuerdo a cada lote o tiempo de maduracin del
colorante. De ah que si los frotis recin teidos resultan demasiado plidos se
corrige aumentando el tiempo de tincin o disminuyendo el tiempo de lavado.
De desconocer si la preparacin del colorante Wright es la correcta utilizar la
tcnica ensayo-error de tal forma que permitir identificar que la
preparacin ha sido la correcta.
Durante la tincin el tampn fosfato controla el pH. Si en la preparacin se
observa precipitados de colorante puede ser debido a varias causas: lavado
insuficiente al final del proceso, utilizacin de lminas sucias, mala distribucin
del colorante.