Cryptococcus

neoformans

INTRODUCCIN
EL gnero Cryptococcus comprende diecinueve especies de hongos levaduriformes
encapsulados. Los ms patgenos del gnero son Cryptococcus neoformans, Cryptococcus
gattii y Cryptococcus grubii.
Cryptococcus neoformans fue descubierto hace ms de cien aos, al ser aislado de jugos de
frutas, as como tambin de ciertas lesiones en pacientes europeos.
Hacia 1905, fue reportada por primera vez, un caso de meningitis criptocccica.
Cryptococcus gattii ha sido aislado en pacientes inmunocompetentes con sntomas de
meningitis y problemas pulmonares. Se encuentra principalmente en climas tropicales y
subtropicales.
Por muchos aos, al mencionar cryptococosis, se haca referencia a la micosis sistmica
ocasionada por las distintas variedades y serotipos capsulares de Cryptococcus neoformans
(C. neoformans var. grubii/serotipo A; var. neoformans/serotipo D; un hbrido AD; y la var.
gattii/serotipos B y C).
Ms recientemente, sin embargo, debido a diferencias en nichos ecolgicos, as como en
caractersticas fisiolgicas y moleculares, se ha propuesto que la var. gattii se eleve a rango
de especie dentro del mismo gnero. Esta nueva especie cobra particular importancia
debido a que aparentemente su distribucin geogrfica es ms amplia de lo originalmente
informado y adems, por la aparicin de cepas altamente virulentas que ocasionan un alto
ndice de mortalidad.
La infeccin por C. neoformans adquiri un gran protagonismo con la aparicin de la
epidemia de SIDA, pasando en pocos aos de ser una entidad poco frecuente que afectaba a
pacientes que padecan enfermedades causantes de depresin de la inmunidad celular, como
neoplasias slidas o hematolgicas y conectivopatas, o que reciban tratamiento
inmunosupresor, al ser la micosis sistmica ms frecuente y grave de los pacientes con
SIDA. La eclosin de la epidemia de SIDA no slo increment el nmero de casos de C.
neoformans sino que tambin dio lugar a presentaciones clnicas atpicas respecto a las que
resultaban comunes en la era pre-SIDA. En pacientes con SIDA, si bien la meningitis es la
expresin clnica ms caracterstica y frecuente de la criptococosis, esta enfermedad con
frecuencia puede adoptar formas diseminadas o extramenngeas con afectacin de otros
rganos tales como pulmones, huesos, cerebro y piel.
En la actualidad, la infeccin por el VIH es el factor predisponente ms importante para el
desarrollo de criptococosis, suponiendo el 80-90% de los casos, siendo una de las
infecciones oportunistas ms frecuentes y graves de estos pacientes

1. CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
C. neoformans es la nica especie del gnero Criptococcus que ocaciona enfermedad
oportunista en hombres y animales. Alcanza densidades muy altas de hasta 5 x 10

levaduras/g en las heces de palomas y otras aves que ingieren sus alimentos con tierra.
Cryptococcus neoformans es el criptococo que causa la mayora de las infecciones
humanas. Esta especie es una levadura encapsulada cuyo hbitat natural es el suelo que, al
estar contaminado con deyecciones de paloma, pollo o pavo que producen un pH alcalino y
aumentan la concentracin de nitrgeno que favorece la multiplicacin del
microorganismo. Las levaduras pueden ser transportadas por el aire en las nubes de polvo
creadas en las tareas de barrido, limpieza y excavaciones. Por consiguiente, las personas
que trabajan en granjas de pollos, los encargados de parques de la ciudad frecuentados por
estorninos y otros pjaros y los espelelogos que pueden explorar cuevas infestadas por
murcilagos tienen un riesgo especial de adquirir la infeccin. Se aconseja a las personas
inmunosuprimidas, en especial los que presentan SIDA, que no participen en estas
actividades. En los casos en que no sea evidente la exposicin inmediata, el comienzo de la
criptococosis aguda puede representar la revelacin de infecciones latentes.
Como se menciona anteriormente, hay dos especies ms frecuentemente aisladas del gnero
Cryptococccus y cinco serotipos, basados en cuatro posibles presentaciones de epitopes
capsulares: A, B, C, D y AD. C. neoformans se asocia a los serotipops A, D y AD, mientras
que C. gattii, a los serotipos B y C. Ambas especies difieren, adems de sus serotipos, en
ciertas propiedades bioqumicas, ecolgicas y epidemiolgicas. El serotipo A es el ms
frecuentemente aislado en materiales clnicos de pacientes con y sin SIDA.
La bibliografa sugiere que en la naturaleza, las dos especies de Cryptococcus son
encontradas en diferentes nichos. C. neoformans, ha sido aislado a partir de reas habitadas
por aves, las cuales, no obstante, no se ven infectadas. Sustratos ricos en guano de aves, son
el medio apropiado para el desarrollo de este organismo. C. gattii por otro lado, ha sido
aislado de reas con bosques de eucaliptos. En ambientes con climas tropicales y
subtropicales, aumenta la frecuencia de hallazgos de esta variedad.
Clasificacin taxonmica
Subclase: Blastomycete
Orden: Cryptococcales
Familia: Cryptococcaceae
Estado anamorfo: Cryptococcus neoformans ([Sanfelice] Vuillemin, 1901)
Orden: Ustilaginales
Estado teleomorfo: Filobasidiella neoformans

ANTECEDENTES HISTRICOS
En 1894 Sanfelice, en Italia, aisl del jugo de durazno una levadura capsulada que
denomin Saccharomyces neoformans, con la que observ experimentalmente diferentes
lesiones en animales de laboratorio; en ese mismo ao en Alemania, Busee y Buschke
reportaron el aislamiento del mismo hongo en un humano, a partir de una lesin
sarcomatosa en la pierna (regin tibial); el paciente muri tiempo despus; en ese caso se
observ diseminacin del microorganismo a hgado, pulmones, bazo, riones y huesos; el
agente etiolgico se clasific como Saccharomyces hominis.
Luego de estas primeras comunicaciones empezaron a aparecer otras en diversas
topografas clnicas, como pulmones, meninges, piel, etc. La primera denominacin de
Cryptococcus se debe a Vullemin (1901), quien estudi la morfologa y caractersticas de la
cepa, comprob que no tena la capacidad de formar ascosporas como lo hace el gnero
Saccharomyces y, por tanto, la llam Cryptococcus hominis. Tiempo despus el nombre de
esta levadura pas a ser Torula histolytica y Torula neoformans, debido a lo cual a la
enfermedad se le llam por mucho tiempo torulosis; ms tarde y finalmente, el hongo fue
reclasificado como Cryptococcus. neoformans. En los ltimos aos es importante citar los
estudios de Kwon- Chung (1975-1976), quien descubri dos estados teleomrficos
(sexuados) basidiosporados, denominados Filobasidiella neoformans y Filobasidiella
bacillispora; la misma investigadora clasific a Cryptococcus gattii como una nueva
especie con caractersticas genticas y fenotpicas definidas; su nombre parte del primer
reporte de sta como variedad por los autores Gatti y Eckels en 1970.

CRYPTOCOCOSIS
La criptococosis es una micosis sistmica causada por el basidiomiceto levaduriforme
encapsulado C. neoformans. El hongo presenta una distribucin universal y se desarrolla
como saprfobo ubicuo del suelo, en especial de aquel enriquecido con excrementos de
paloma. Se distinguen cuatro serotipos (A, B, C y D) y tres variedades de C. neoformans.
C. neoformans var. grubii (serotipo A), C. Neoformans var. neoformans (serotipo D) y C.
Neoformans var. gattii (serotipos B y C). Usualmente se origina al inhalar las partculas
infecciosas ambientales, que luego se depositan en los pulmones produciendo una pulmona
subclnica o asintomtica.
Posteriormente se diseminan por va hematgena a diversos rganos, particularmente al
sistema nervioso central, produciendo meningitis o meningoencefalitis; C. gattii, sin
embargo, tiende a producir masas o cryptococomas en los pulmones y en el cerebro. En
ocasiones puede afectar los huesos y la piel.

Los resultados de nuestros estudios aerobiolgicos sealan a la levadura de 35m de

dimetro y no encapsulada, como la partcula infecciosa ms probable. Otros miclogos
sostienen que las basidiosporas (esporas sexuales del hongo) tambin pudieran ser las
partculas infecciosas. En los tejidos enfermos el hongo se manifiesta como una levadura
encapsulada que puede alcanzar un dimetro de hasta 20m.

La predileccin de Cryptococcus por el sistema nervioso central parece deberse

principalmente a la disponibilidad all de compuestos catecolaminas (epinefrina,
norepinefrina, dopa y dopamina). Adems, en el proceso la levadura sintetiza melanina, la
cual se deposita en la pared celular, protegindola contra antioxidantes del sistema
inmunolgico, fagocitosis y fungicidas. Por otro lado, en un trabajo colaborativo entre el
Laboratorio de Biotecnologa Microbiana y Bioprospectos y el de Micologa Tropical,
ambos del Recinto Universitario de Mayagez, se ha estado utilizando la tecnologa de
Phage Display para tratar de definir el proceso de reconocimiento y adhesin de
Cryptococcus gattii, serotipo C a protenas cerebrales humanas expresadas en la cpside del
bacterifago T7. Los resultados preliminares han demostrado que dos protenas asociadas al
citoesqueleto de clulas del sistema nervioso central, podran ser receptores especficos
para la levadura. Este trabajo reviste particular importancia para lograr un mejor
entendimiento de la patognesis de la cryptococosis.
Cryptococcus neoformans afecta principalmente a personas inmunodeficientes, ya sea por
padecer el Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA), cncer, o por recibir terapia
inmunosupresora. Cryptococcus gattii, por el contrario, tiende a afectar hospederos
inmunocompetentes.
Definir con precisin el periodo de incubacin para esta micosis resulta enigmtico. En el
caso de C. neoformans se conocen casos agudos, pero adems, varios autores, incluyendo el
que suscribe, proponemos la teora de latencia. La misma sostiene que la persona
inmunocompetente se expone a la levadura y sta se transforma morfolgicamente
(pseudohifa no encapsulada-avirulenta), localizndose temporeramente en algn lugar
anatmico indeterminado y por tiempo indefinido. Posteriormente, al ocurrir
inmunosupresin, el hongo recobra su morfologa clsica (levadura encapsulada), as como
su virulencia, ocasionando la micosis. En el caso de C. gatti, sin embargo, el fenmeno de
latencia aparentemente es infrecuente.

DISTRIBUCIN GEOGRFICA
La criptococosis es una enfermedad cosmopolita; en cambio, los agentes etiolgicos y sus
variedades tienen localizaciones definidas, por lo que tenemos que las variedades
neoformans y grubii son las que tienen mayor distribucin; la primera se da ms en climas
templados (A), y la segunda en pases de Europa y resto del mundo (D) con climas
variados. La especie C. gattii predomina en zonas tropicales y subtropicales; en Australia y
el sur de California (B y C) y en el resto del mundo slo el serotipo B, en especial en la
Columbia Britnica (Canad), la costa noroeste de Estados Unidos.
Recientemente hay muchos reportes de su aislamiento en Nueva Zelanda, Papa Nueva
Guinea, el sudeste asitico (Camboya, Malasia, Tailandia y Vietnam), China, Nepal, India;
en Latinoamrica (Argentina, Brasil, Colombia, Mxico, Paraguay, Per, Uruguay y
Venezuela); frica del Sur y Centro; y algunas partes de Europa (Alemania, Austria, Italia,
Grecia y Espaa). En Mxico se ha encontrado a C. gattii en 5-10% de los aislamientos.

MANIFESTACIONES CLNICAS GENERALES

El cuadro clnico de la criptococosis de individuos inmunocompetentes la infeccin es
autolimitada y poco sintomtica. La enfermedad diseminada ocurre en huspedes con
alteraciones inmunolgicas o con enfermedades debilitantes como linfomas, leucemias,
lupus eritematoso sistmico, diabetes mellitus descompensada y especialmente en pacientes
son SIDA. Se presenta en forma aguda en pacientes con VIH, en pacientes bajo tratamiento
con corticoides o en pacientes con neoplasias hematolgicas. En otro tipo de enfermos la
infeccin puede tener una evolucin crnica. Es importante que el mdico mantenga una
alta sospecha de esta enfermedad para llegar al diagnstico. De acuerdo al rgano afectado
la enfermedad puede ser pulmonar, cerebral, cutnea, sea o diseminada.
Criptococosis pulmonar
En pacientes inmunocompetentes la infeccin pulmonar puede progresar, remitir
espontneamente o permanecer estable y asintomtica por perodos prolongados. En
pacientes inmunodeprimidos, la enfermedad puede variar desde asintomtica a grave. Las
infecciones asintomticas slo se descubren por rayos X. En estos casos las lesiones son
pequeas y pueden pasar inadvertidas; adems, algunas lesiones curan sin formar
granulomas.
En la criptococosis pulmonar fulminante hay fiebre continua elevada, consolidacin
pulmonar y dificultad respiratoria que evoluciona hacia la insuficiencia respiratoria. Las
lesiones pulmonares pueden afectar un solo lbulo o ser bilaterales.

Radiografa de trax. Se observan infiltrados intersticiales con tendencia a la organizacin;

tambin puede observarse linfadenopata hiliar. Si curan, estas lesiones desaparecen o
forman un pequeo granuloma que a veces se calcifica.
Al progresar la enfermedad, aparece un infiltrado ms amplio y difuso que afecta las reas
apicales y basales pulmonares. Se observan claramente los vasos y sombras nodulares. En
enfermos con SIDA o inmunocomprometidos, la infeccin se exacerba; se extiende a todo
el pulmn y puede causar una neumona intersticial bilateral. La produccin de fibrosis es
mnima; la necrosis por caseificacin y las calcificaciones son excepcionales. En los
enfermos con linfomas y leucemia la criptococosis miliar se asemeja a la tuberculosis. Las
lesiones estn formadas por pequeos grnulos gelatinosos en todo el campo pulmonar.
Posteriormente pueden formar granulomas.

Criptococosis del Sistema Nervioso Central (SNC)

La infeccin del SNC es la complicacin ms grave de la criptococosis. Se presenta
usualmente como meningitis o meningoencefalitis subaguda o crnica; en ocasiones con
lesiones granulomatosas (criptococoma) o seudoquistes intraparenquimatosos. La
meningitis se presenta en el 97% de los casos; la meningoencefalitis en el 2% y los
criptococomas en el 1%. Pacientes recuperados, generalmente quedan con secuelas de
diverso grado de severidad, por eso es importante realizar el diagnstico lo antes posible.
El examen de LCR muestra hiperproteinorraquia; pleocitosis de ms de 100 leucocitos/mL
con predominio de monocucleares; el promedio de protenas puede ser de 160 mg/dL. En la
TAC de crneo se puede observar atrofia subcortical, edema cerebral y dilatacin moderada
del sistema ventricular.
El diagnstico clnico es difcil debido a lo inespecfico de la sintomatologa. Se debe
realizar una puncin lumbar para el diagnstico definitivo por la presencia de criptococos.
La medicin de presin de apertura y el examen minucioso del LCR con tinta china permite
establecer el diagnstico en el 50% de los pacientes.
En los pacientes con SIDA la sensibilidad de la prueba aumenta al 75%. La presin de
apertura en la mayora de los casos se encuentra marcadamente elevada. En los pacientes
con VIH es superior a 200 mm de agua. Las clulas del LCR en pacientes con SIDA son
muy escasas: 0 a 50 clulas/mm3 y en pacientes sin SIDA se elevan de 20 hasta 200 clulas
/mm3, con predominio de mononucleares.
El diagnstico concluyente se basa en el cultivo del microorganismo en el LCR. El
resultado es positivo en 90% de pacientes sin SIDA. El cultivo se realiza con unos 5 mm 3
de LCR. Las levaduras tardan tres a cuatro das en desarrollarse en el medio de cultivo.

Criptococosis cutnea primaria

Este padecimiento ocurre en forma regular en pacientes inmunosuprimidos. Suele ser una
manifestacin de la enfermedad diseminada. En algunos pacientes la va de entrada del
microorganismo es por una solucin de continuidad en la piel.
Las lesiones se desarrollan alrededor de una herida de donde el criptococo puede
diseminarse internamente. Tienen forma de ppulas, pstulas acneiformes o abscesos que
con el tiempo se ulceran. En pacientes inmunocompetentes las lesiones son chancriformes y
limitadas; generalmente involucionan espontneamente; en otros casos dejan lesiones
ndulo-granulomatosas.
En pacientes humanos con SIDA, esta forma se ve en el 10% de los que cursan con
criptococosis diseminada. Las lesiones se desarrollan especialmente en el cuello y en la
cabeza; pueden ser similares a las producidas por el virus del Molluscum contagiosum.

Criptococosis cutnea secundaria

Es ms comn que la primaria; se presenta por diseminacin hematgena a partir de un
foco menngeo o pulmonar.
Afecta principalmente cara, cuello y miembros. Las lesiones son ulceraciones superficiales
con necrosis y formacin de escaras, o bien lesiones trombticas profundas muy
destructivas; se inician como un absceso fro que se desarrolla en un rea amplia y profunda
de necrosis con formacin de costras y esfacelo. Las lesiones deben diferenciarse de la
celulitis bacteriana y de las lesiones herpticas. Las lesiones aparecen en la cara y el cuello;
tienen el aspecto de molusco contagioso.

Criptococosis sea
Esta forma clnica, es secundaria a la diseminacin de un foco pulmonar, un foco menngeo
o de ambos. Como en otras enfermedades micticas, los criptococos tienen predileccin por
las prominencias seas, los huesos del crneo y las vrtebras. En la radiologa se detectan
lesiones mltiples, discretas, ampliamente diseminadas, destructivas, de evolucin crnica.
Los sntomas ms frecuentes son inflamacin y dolor de la zona afectada. Puede haber
periostitis, osteofibrosis y osteolisis. Ocasionalmente se ven fstulas que drenan material
mucoide o seropurulento hacia la piel.

Criptococosis diseminada
Es una forma infrecuente que generalmente es secundaria a un foco infeccioso pulmonar.
Los sitios que ms afecta son los ojos, el corazn, la prstata y los testculos; menos
frecuentemente el hgado, donde el dolor puede simular un abdomen agudo. La prstata
puede ser un reservorio de C. neoformans y ser causa de recidivas en pacientes tratados
aparentemente con xito con anfotericina B.
El diagnstico clnico es difcil porque las formas de presentacin son inespecficas; en
consecuencia, el diagnstico definitivo es el microbiolgico. Esto es especialmente cierto
en casos de meningitis en pacientes cuyo lquido cefalorraqudeo (LCR) no suele mostrar
alteraciones o si las hay, son mnimas. La muestra adecuada debe seleccionarse de acuerdo
a la localizacin de la criptococosis: LCR, sangre, secreciones de la va respiratoria, piel,
orina, etc.

2. MORFOLOGA Y TINCIN:
Microscpicamente, C. neoformans es un microorganismo levaduriforme encapsulado de
forma esfrica a ovalada y un dimetro comprendido entre 2 y 20 um. El hongo se replica
por gemacin a partir de una base relativamente estrecha. Por lo general se forman yemas
solitarias, aunque en algunas ocasiones existen yemas mltiples y cadenas de clulas en
gemacin. El material clnico suele carecer de tubos germinales, hifas y seudohifas.
La forma de las clulas es variable en los tejidos teidos con tinta china: esfrica, ovalada o
elptica; suelen rodearse de zonas esfricas o halos de contorno liso y fcil visualizacin
que representan la cpsula polisacrida extracelular.
La cpsula es un marcador inconfundible cuyo dimetro puede ser hasta cinco veces mayor
que el de la clula mictica, se detecta con facilidad mediante una tincin de mucina como
la tcnica de mucicarmina de Mayer. El microorganismo se tie dbilmente con la tincin
de H-E, pero se detecta fcilmente mediante las tinciones de PAS y GMS. La pared celular
de C. neoformans contiene melanina, la cual se pone de manifiesto por medio de la tincin
de Fontana-Masson.
Las clulas hijas se forman como yema con un nexo estrecho con la clula madre. Cuando
se aslan directamente de animales infectados, poseen cpsulas gruesas de
mucopolisacrido.

3. CARACTERSTICAS CULTURALES:
En cultivos, la especie de Cryptococcus produce colonias mucoides blanquecinas en
trmino de dos a tres das, se vuelven secas conforme envejecen. Todas las especies de
Cryptococcus, incluidas algunas especies no patgenas, estn encapsuladas y poseen
ureasa. Sin embargo, C. neoformans y C. gattii difieren de especies no patgenas porque
pueden proliferar a 37C y pueden producir laccasa, una fenol oxidasa, que cataliza la
formacin de melanina a partir de sustratos fenlicos apropiados (como las catecolaminas).
La cpsula y la laccasa (una enzima cuprosa) son factores perfectamente definidos de
virulencia. Los microorganismos que afectan seres humanos se identifican al demostrar que
producen caractersticas especficas de asimilaciones de carbohidratos. Por medio de
antisueros adsorbidos se han definido cinco serotipos (A-D y AD); algunas cepas de C.
neoformans pueden tener lo serotipos A, D, o AD y algunos aislados de C. gattii pueden
tener los serotipos B o C.

4. MECANISMOS DE INFECCION DETERMIANTES DE

PATOGENICIDAD:

Fuentes de infeccin:
La fuente es EXOGENA. C. neoformans y C. gattii no forma parte de la flora normal del
ser humano ni de animales. Se lo ha aislado de jugos de fruta, de la leche, de piel, heces
humanas, del suelo y estircol de paloma.

Vas de infeccin:
La infeccin se produce por va inhalatoria, siendo subclnica y transitoria. Si el nmero de
microorganismos inhalados es considerable puede iniciarse una infeccin pulmonar crnica
y trasmitir el hongo a otros sitios anatmicos involucrando fundamentalmente reas
cutneo-mucosas y menngea. Adems, la criptococosis puede ocurrir como una
complicacin de otras enfermedades en pacientes debilitados y transformarse rpidamente

en sistmica. Esto es est especialmente documentado en pacientes con VIH-SIDA, cncer,

tratamientos prolongados con corticoides, etc.
Factores de predisposicin
El padecimiento por lo regular se presenta en pacientes diabticos, desnutridos o con
enfermedades autoinmunes, como el lupus eritematoso sistmico, o bien inmunodeprimidos
por leucemia, linfomas, sarcomas, corticoterapia, etc.
Es importante citar que en la actualidad ms de 90% del total de casos se asocian a
VIH/sida, que constituye el factor predisponente ms importante en todo el mundo; la
mayora de casos se presentan en estadios avanzados de este sndrome, en particular cuando
la cuenta de linfocitos CD4 est por debajo de las 100 cl/mm3 y carga viral alta.

Patognesis
La virulencia de C. neoformans viene determinada por el polisacrido capsular
criptococcico que al ocultar los posibles ligandos presentes en la pared del hongo impide
su fagocitosis. Tambin se ha sugerido que el antgeno criptococcico capsular provoca una
inhibicin de la respuesta celular y humoral a la infeccin, y de la activacin del sistema
del complemento. La cpsula est formada por un polisacrido glucoronoxilomanano que
es un complejo de cido glucornico, xilosa y manano. C. neoformans tiene la capacidad de
producir melanina merced a una enzima denominada fenol-oxidasa habindose demostrado
que la melanina contribuye a la virulencia de este microorganismo. La melanina producida
por el hongo se deposita en la pared celular interna contribuyendo a la integridad de dicha
pared, a su resistencia a la oxidacin y a la accin de los fagocitos, e incluso a una menor
susceptibilidad a la anfotericina B. Todo ello incrementa la supervivencia de la levadura
dentro del husped.
La criptococosis se adquiere por la inhalacin de levaduras desecadas existentes en la
naturaleza. La desecacin de C. neoformans provoca la reduccin de tamao de la cpsula,
lo que permite que pueda ser inhalada y pasar directamente a los espacios alveolares.
Sin embargo, pese a que su va de entrada es respiratoria, al contrario de lo que ocurre con
otras micosis transmitidas por aerosoles, rara vez ocurren casos de criptococosis en forma
de brotes epidmicos. Cuando el microorganismo alcanza los alveolos se origina una
repuesta de la inmunidad celular y humoral del husped, que en condiciones normales es
suficiente para controlar la infeccin.
En pacientes inmunodeprimidos como en la infeccin por el VIH provoca un deterioro del
sistema inmunitario que provoca que el microorganismo no sea eliminado por los
mecanismos de defensa apropiados. De esta forma la infeccin progresa y se disemina por

va hematgena. En el sistema nervioso central (SNC), C. neoformans encuentra

condiciones ms favorables para su desarrollo que en otras localizaciones, dando lugar a
que el SNC sea la localizacin ms frecuente de la enfermedad.
La base del tropismo de C. neoformans por el SNC es incierta, aunque han sido propuestas
varias explicaciones. El lquido cefalorraqudeo (LCR) es un buen medio de crecimiento
para el microorganismo ya que carece de los factores anticriptococcicos que estn
presentes en el suero normal. El LCR y el tejido enceflico tambin son deficientes en
componentes del complemento lo que explicara la escasa respuesta inflamatoria del SNC
ante los criptococos y permitira que las lesiones progresasen. El alto nivel de dopamina en
el SNC puede promover la virulencia del criptococo al servir como sustrato para la
produccin de melanina para el microorganismo, as como las elevadas concentraciones de
creatinina y asparagina que son buenas fuentes de nitrgeno para el hongo. Por ltimo, la
produccin local de manitol por el microorganismo puede contribuir al edema cerebral e
inhibir la funcin fagoctica. Todo lo anterior justificara que la meningoencefalitis sea la
manifestacin clnica ms frecuente de la criptococosis.
El pulmn es la segunda localizacin en frecuencia de la criptococosis, pero, cualquier
rgano puede ser afectado por la enfermedad tras la entrada de C. neoformans por va
inhalatoria y su diseminacin por el torrente sanguneo, de tal forma que hasta dos terceras
partes de los pacientes con meningitis criptococcica tienen diseminacin extramenngea,
siendo el hgado, el bazo, la piel, la prstata y los ganglios linfticos localizaciones
relativamente frecuentes.
C. neoformans no elabora ninguna toxina conocida. El tejido solo es desplazado por el
crecimiento de los microorganismos, por ello hay poca necrosis o disfuncin de los rganos
afectados hasta fases avanzadas de la enfermedad.
Otro factor que puede tener influencia en el poder patgeno de C. neoformans es que, a
diferencia de otras especies saprfitas del gnero, esta levadura se desarrolla mejor a 30C
que a 37C y a 39-41 C (in vitro crecen mal o no crecen). Los conejos muestran una
resistencia natural a C. neoformans, precisamente porque tienen una temperatura corporal
de 39C.

5. INFECCIONES CLNICAS:
La criptococosis es una micosis sistmica poco frecuente en los animales domsticos con
excepcin de la aparicin de brotes espordicos en perros y gatos. La criptococosis en
animales est causada por dos especies del gnero Cryptococcus: Cryptococcus
neoformans y Cryptococcus gattii. Son hongos pertenecientes a la divisin Basidiomycota,
que en tejidos animales y en condiciones habituales de laboratorio presentan forma de
levadura, con una cpsula de mucopolisacridos que los caracteriza.
El agente etiolgico ms frecuentemente aislado es C. neoformans, aunque tambin C.
gattii ha sido aislado de distintas especies animales. Estas dos especies tienen nichos
ecolgicos diferentes. Cryptococcus neoformans presenta una distribucin mundial,
aislndose habitualmente de las excreciones de palomas y otras aves, mientras que C. gattii
se localiza en zonas con clima tropical/subtropical, aislndose principalmente de materia
vegetal de algunas especies de rboles.
La criptococosis ha sido citada en una gran variedad de animales domsticos y a diferencia
de otras micosis sistmicas, es ms frecuente en el gato que en el perro y otras especies
animales. La infeccin se origina en la cavidad nasal, tras la inhalacin de la levadura. En
el gato y en el perro, suele diseminarse al sistema respiratorio y al sistema nervioso central
como se comentar ms adelante.
En los animales domsticos como caballos, ovejas y cabras suele afectar al sistema
respiratorio, mientras que en las vacas suele ser una micosis localizada a nivel de la
glndula mamaria. Tambin se han descrito casos en animales salvajes como koalas,
anaconda, hurones, marsopas y llamas, con unas manifestaciones clnicas muy variadas,
predominantemente con afectacin pulmonar y del sistema nervioso central.
Existen pocos casos descritos de criptococosis en aves. Clsicamente, las aves se suponen
resistentes a la infeccin debido a su elevada temperatura corporal (41-43 C) que impedira
el desarrollo de la levadura. Precisamente su baja temperatura corporal, prxima a la de los
mamferos, explicara su susceptibilidad a la infeccin por Cryptococcus. Sin embargo, en
estudios posteriores se han descrito casos de criptococosis en palomas y en aves de
compaa pertenecientes a la familia de las psitcidas.
En general, las aves adquieren la infeccin a travs del tracto respiratorio o a travs de la
piel. En las aves inmunocompetentes, la criptococosis suele quedar restringida al tracto
respiratorio superior, como la cavidad nasal y los senos paranasales. Esta localizacin
reflejara la preferencia de las especies de Cryptococcus por zonas con una temperatura

inferior a los 40 C. En aves como el kiwi, con una temperatura corporal baja, es ms
frecuente la diseminacin al tracto respiratorio inferior.
Criptococosis felina
La criptococosis es la micosis sistmica ms frecuente en el gato, aunque su incidencia es
baja. En un estudio sobre las micosis profundas en gatos en Estados Unidos, la
criptococosis fue la micosis ms frecuente, afectando al 0,044% de la poblacin felina
incluida en el estudio. Los gatos son especialmente susceptibles a la infeccin por C.
neoformans y en menor proporcin por C. gattii. En estudios realizados en Australia, en el
75% de los casos de criptococosis en perros y gatos se aisl C. neoformans como agente
etiolgico, mientras que en el 25% restante se aisl C. gattii.
No se ha descrito ninguna predisposicin de edad, sexo o raza, aunque en algunos estudios
se apunta que esta enfermedad es ms frecuente en gatos machos de dos a tres aos de edad
y de raza siamesa. Se han citado algunos factores predisponentes tales como una infeccin
previa por el virus de la leucemia felina (FeLV) o por el virus de la inmunodeficiencia
felina (FIV), pero algunos autores indican que la prevalencia de infecciones por FIV/FeLV
en gatos con criptococosis es similar a la de la poblacin felina general. Si bien no est
claro el papel de estas enfermedades en la criptococosis, s pueden influir en la severidad y
el pronstico de la misma. Los gatos con FeLV o FIV suelen tener una afectacin ms
generalizada y frecuentemente desarrollan sintomatologa neurolgica y ocular. Otros
factores predisponentes seran las neoplasias, la diabetes, intervenciones quirrgicas y
tratamientos con glucocorticoides.
La va de infeccin ms frecuente es la inhalatoria, afectando inicialmente las vas
respiratorias altas, principalmente la cavidad nasal. En la mayora de gatos (50-80%) la
sintomatologa ms frecuente es la rinitis, con descarga nasal abundante unilateral o
bilateral. Los sntomas suelen ser crnicos y en el 70% de los casos la cavidad nasal puede
llegar a deformarse por la presencia de granulomas. Tambin puede verse afectada la
nasofaringe, produciendo estertores, disnea inspiratoria y tendencia a respirar con la boca
abierta. Es frecuente un aumento del tamao de los ganglios mandibulares y no suele
aparecer sintomatologa del tracto respiratorio inferior ni fiebre.
La infeccin puede diseminarse al tejido subcutneo paranasal. En un 20% de gatos, la
infeccin se disemina a travs del plato cribriforme desde el tracto respiratorio al sistema
nervioso central. En estos casos aparecen sntomas neurolgicos tales como depresin,
ataxia e incoordinacin. Incluso se pueden producir alteraciones oculares, siendo los signos
ms comunes la ceguera perifrica y la retinitis.
En casos ms avanzados pueden aparecer lesiones cutneas (40-50%), que suelen afectar a
la cara, cabeza y cuello, siendo estas lesiones secundarias a una infeccin del plano nasal.

Si se produce una diseminacin va hematgena, es frecuente la aparicin de lesiones

cutneas multifocales y el aumento de uno o varios ganglios linfticos perifricos.

Lesiones
Se ha descrito que la criptococosis muestra una marcada predisposicin por los sistemas
respiratorio y nervioso central. No obstante, las lesiones pueden desarrollarse en
prcticamente cualquier tejido, lo que provoca una amplia variedad de signos clnicos. Sin
embargo, los hallazgos ms comunes son rinitis granulomatosa, sinusitis, neumona,
dermatitis ulcerativa y meningoencefalitis.

Lesiones respiratorias
Como se ha indicado anteriormente, la criptococosis es la infeccin mictica ms frecuente
en la cavidad nasal de los gatos. Las lesiones varan desde una discreta presencia de
granulomas nasales a grandes masas de exudado mucopurulento llenando toda la cavidad
nasal.
Las lesiones en pulmn se caracterizan por una neumona granulomatosa multifocal que,
como ocurre en otros rganos, tiene la apariencia de pequeos focos blanquecinos de tacto
gelatinoso. Esta apariencia gelatinosa se debe a la cpsula mucosa que muestra la levadura
a su alrededor. Las lesiones causadas por C. neoformans contienen un gran nmero de
hongos y curiosamente pocos macrfagos, linfocitos y clulas gigantes multinucleadas.
Como consecuencia de la gruesa cpsula de polisacridos, la cual no se tie bien con las
tcnicas histolgicas rutinarias, se puede observar un gran espacio en blanco o halo
alrededor de la levadura.

Lesiones cutneas
Las lesiones en la piel se caracterizan por la presencia de ppulas y ndulos que si son de
gran tamao tienden a ulcerarse. Microscpicamente C. neoformans puede causar una
respuesta granulomatosa, pero generalmente la inflamacin es menos severa que la
producida por otros hongos. Cuando la inflamacin es leve, las cpsulas de los numerosos
microorganismos en la lesin, confieren al tejido un aspecto multiqustico.

Lesiones nerviosas

Cryptococcus neoformans penetra en las leptomeninges y espacio subaracnoideo por

diseminacin directa a travs de la lmina cribriforme (ubicada en la parte superior de la
nariz) tras una infeccin nasal o una sinusitis o va hematgena, como consecuencia del
trfico de leucocitos a partir de una infeccin pulmonar. La inflamacin de las
leptomeninges puede tambin extenderse a lo largo de las races de los nervios craneales.
Macroscpicamente pueden observarse, tanto en tejidos del sistema nervioso central como
en leptomeninges, mltiples quistes de pequeo tamao, de apariencia viscosa y
gelatinosa. El acmulo de estos grmenes y sus cpsulas mucopolisacridas produce
opacidad de las leptomeninges. La respuesta leucoctica puede variar de escasa a
granulomatosa. En algunos gatos infectados, C. neoformans podran estar en un elevado
nmero sin desencadenar una respuesta inflamatoria. No est claro si esta ausencia de
inflamacin se debe a la supresin de la respuesta inmune por el microorganismo o a un
defecto en la inmunidad del gato y/o de la respuesta inflamatoria frente al patgeno.
Microscpicamente, las lesiones en las leptomeninges tienen un aspecto organizado, con
numerosos microorganismos y con poca o ninguna respuesta inflamatoria.

Lesiones oculares
Aunque se ha sealado que la criptococosis tiene cierta predisposicin por el sistema
respiratorio y sistema nervioso central, se han descrito varios casos de lesiones primarias
oculares. Las lesiones oculares provocadas por C. neoformans son especficas de este
germen y se caracterizan por la ausencia de inflamacin y la localizacin de las lesiones.
Estas tienen un carcter focal o multifocal afectando a la coroides y la retina, aunque
tambin lesionan las meninges pticas. Al igual que en otras localizaciones, en las lesiones
se observan numerosas levaduras y escasas clulas inflamatorias. Los grmenes se
encuentran, a menudo, en forma de agregados subretinianos de distribucin focal o
multifocal en las meninges pticas. Ocasionalmente, las lesiones son muy extensas con la
presencia de numerosos macrfagos y pocos hongos. Se cree que el microorganismo llega
al globo ocular va hematgena y se queda atrapado en los capilares de la coroides.
Tambin se ha propuesto una invasin directa a partir de los senos paranasales, cavidad
nasal o meninges pticas. La infeccin puede afectar al tercer prpado en gatos,
provocando una marcada reaccin granulomatosa bilateral en ambos ojos sin inducir
lesiones intraoculares.

Linfadenitis granulomatosa focal coalescente

En el transcurso de la diseminacin del proceso se suelen ver involucrados los ndulos
linfticos. Inicialmente son los ndulos linfticos regionales que drenan la zona afectada

(por ejemplo los ndulos linfticos traqueobronquiales en el caso de infecciones

pulmonares). La lesin caracterstica, que se desarrolla en los mismos, es una linfadenitis
granulomatosa focal coalescente. En casos avanzados los ndulos linfticos pueden
aumentar su tamao, muestran una apariencia plida a la seccin y se pierde prcticamente
la totalidad de su estructura normal.
Criptococosis canina
La criptococosis canina suele afectar a perros de menos de cuatro aos. No existe ninguna
predisposicin de sexo pero s de raza, siendo ms frecuente en el dberman, pinscher,
pastor alemn, cocker spaniel americano, gran dans y labrador. Se cree que los pastores
alemanes tienen una predisposicin gentica que los hace susceptibles no slo a la
criptococosis, sino tambin a otras micosis sistmicas como la aspergilosis.
En los perros, la va de infeccin tambin es la inhalatoria. Generalmente el 50% de los
perros suele presentar afectacin de las vas respiratorias altas, pero la rinosinusitis suele
ser subclnica y, por lo tanto, la sintomatologa respiratoria en los perros suele pasar
desapercibida. La diseminacin multiorgnica es ms frecuente en perros que en gatos. Se
produce una rpida diseminacin al sistema nervioso central, por lo que la sintomatologa
nerviosa es muy frecuente (50-80% de perros). Los sntomas neurolgicos son multifocales,
causados por una meningitis y una progresiva meningoencefalomielitis, e incluyen parlisis
facial, paresia, paraplejia o tetraplejia y ataxia entre otros.
Tambin suelen aparecer alteraciones oculares (20-40% de perros) que consisten en neuritis
ptica, corioretinitis exudativa granulomatosa, y hemorragia de retina asociada a pupilas
dilatadas y ceguera. Pueden aparecer tambin lesiones cutneas en el 10-20% de los perros,
y al igual que en los gatos es un marcador de diseminacin hematgena. Algunos perros
pueden presentar fiebre

La criptococosis como zoonosis

Tanto perros como gatos pueden ser portadores asintomticos de C. neoformans,
localizndose esta levadura en la cavidad nasal, pero no se consideran fuentes de infeccin
para el hombre. La principal fuente de esta especie son las deyecciones de palomas. Existen
algunos casos documentados de posible transmisin zoontica, en los que los aislamientos
de C. neoformans de los pacientes presentaban genotipos iguales a los de los aislados de las
excreciones de sus aves de compaa. La caracterizacin se realiz utilizando diferentes
tcnicas de biologa molecular, tales como la electroforesis en campo pulsado (PFGE),
polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin (RFLP) y polimorfismos de
longitud de fragmentos de amplificacin (AFLP).

6. ASPECTOS INMUNITARIOS
La infeccin y la enfermedad dependen de la competencia entre las defensas del husped y
el nmero y virulencia de las clulas levaduriformes inhaladas. La respuesta inmunitaria es
celular, pero la cpsula protege al hongo de ser internalizado y destruido por los
macrfagos, monocitos y leucocitos polimorfonucleares disminuyendo la respuesta
inmunitaria. El glucoronoxilomanano capsular inhibe la accin del complemento, reduce la
expresin de receptores para el factor de necrosis tumoral e induce a los monocitos a
secretar interleucina 10 que regula la disminucin de citosinas proinflamatorias.
La respuesta inmune humoral de C. neoformans ha sido estudiada en ambos modelos,
humano y animal. Los anticuerpos anti-criptococos aparecen tempranamente en la
enfermedad en pacientes con criptococosis no menngea y ocasionalmente despus de una
terapia exitosa. Aunque los anticuerpos anti-criptococos no son detectables en la mayora
de los pacientes con criptococosis, cuando stos son detectables en ttulos crecientes es una
seal de resultado favorable. Estas observaciones parecen sugerir que los anticuerpos anticriptococos juegan un papel en la proteccin, pero es controversial en los estudios en
animales, donde el resultado no es igual; no hay soporte consistente en este aspecto.
Los estudios indican, al parecer, que la produccin de anticuerpos anti-criptococos est
controlada por un marcador gentico del husped, por mecanismos de inmunorregulacin, o
por ambos.
La inmunidad mediada por clulas (IMC) es la mayor defensa contra la diseminacin de
la criptococosis; ambas subpoblaciones linfocitarias (CD4+ y CD8+) han demostrado ser
importantes en la eliminacin de la levadura cuando se encuentra localizada. Existen dos
funciones fundamentales en la efectividad de la IMC: la linfoproliferacin y la liberacin
de citoquinas, para neutralizar o eliminar a los microorganismos. La respuesta inmune
especfica est determinada por un set de citoquinas producidas por clulas TCD4+ (Th).
Las Th1 secretan IFN-g e IL-2, las cuales impulsan la respuesta inmune celular por
activacin de clulas T y estimulacin de fagocitos mediados por las defensas del husped,
y las Th2 secretan IL-4 e IL-10, las cuales inhiben la funcin de macrfagos. La IL-4
tambin estimula clulas B productoras de anticuerpos. Una respuesta Th en perfecta
concordancia parece ser necesaria para la resolucin exitosa de la infeccin. De all la
importancia de que el individuo cuente con un sistema inmune competente, capaz de
eliminar cualquier agente extrao que ingrese al cuerpo. Es decir en huspedes
inmunocompetetentes la produccin de anticuerpos opsonizantes y la respuesta mediada
por clulas, hace que los criptococos sean fagocitados y destruidos. La citotoxicidad

mediada por anticuerpos, la fagocitosis y la actividad de las clulas asesinas naturales

tambin intervienen en la destruccin de criptococos.

7. DIAGNSTICO:
El diagnstico definitivo de la infeccin por C. neoformans requiere el aislamiento del
microorganismo en cultivos de muestras clnicas o la visualizacin de formas
levaduriformes en los estudios histopatolgicos.
Muestras: fluido cerebroespinal, biopsia o tejidos post morten, exudados, lquidos
corporales, esputo, suero, etc.
Examen directo:
Se observan en fresco y con tinta china: clulas esfricas o en gemacin (blastoconidias).
De dimetro variable 5 a 20 de dimetro, con una cpsula gelatinosa, de polisacridos.
Estos polisacridos se encuentran asociados en pares, perteneciendo a la categora mananglucn. La presencia de esta cpsula estructurada por un heteropolisacrido de manosarhamnosa y cido glucurnico hace que sea imposible su digestin por las enzimas lticas
que poseen los fagocitos. La tinta china permite ver por contraste en un fondo oscuro, la
cpsula. El grosor de la cpsula depende de factores genticos de la cepa, as como
tambin, de las condiciones de crecimiento, ya sea in vivo, como in vitro. Dentro de las
condiciones de crecimiento, se pueden mencionar la pCO2 (presin parcial de CO2 en la
sangre arterial) y la disponibilidad de hierro. La pCO2 aumentada, as como la
disponibilidad de hierro reducida, favorecen notablemente el desarrollo de la cpsula. No
obstante, al aumentar con estas estrategias la produccin de cpsula, se disminuye la tasa de
crecimiento de las colonias.
El examen directo es de poca utilidad porque mediante esta tcnica la cpsula no es visible
debido a que es altamente hidroflica y tiene similar ndice de refraccin, por lo que no se
observa con exmenes en fresco y tinciones habituales. Llegan a confundirse fcilmente las
levaduras de Cryptococcus sp. con Candida sp. u otros hongos levaduriformes.

Examen directo con tinta china.

Es la forma ms sencilla de hacer el diagnstico; consiste en poner una gota del fluido
(LCR, suero, orina) previamente centrifugado, ms una gota de tinta china entre
portaobjetos y cubreobjetos. El objetivo es resaltar la cpsula del microorganismo, as como
el cuerpo de la levadura; es importante buscar levaduras gemantes. Esta tcnica es sencilla
y rpida; sin embargo, puede generar falsos positivos con polimorfonucleares, que en

ocasiones se observan como levaduras capsuladas y tambin con micelas lipdicas (grasa)
que contengan los portaobjetos.
Es importante resaltar que en ocasiones se presentan casos con un discreto halo capsular, o
bien sin ste (cepas acapsulares); se sabe que cuando el fluido (LCR, suero) tiene alta
concentracin de CO2, disminucin de hierro y medio alcalino, facilita el incremento de la
cpsula; por tanto, en cepas con poca o nula cpsula, se requiere de aislamiento e
identificacin mediante pruebas bioqumicas y fisiolgicas. En promedio, en 5-10% de los
casos se observan seudohifas similares a las de Candida sp; sin embargo, stas tambin
presentan un halo capsular.
Frotis. A partir de las muestras (LCR, esputo, orina) se realiza un frotis; se fija al calor y se
agrega extendiendo una gota de tinta china (tinta india) o nigrosina; por refringencia con el
microscopio se pueden observar de manera sencilla el cuerpo de la levadura y el halo de la
cpsula. En nuestra experiencia, si a esta preparacin se aade previamente una gota de
fucsina bsica (de Ziehl-Neelsen) por un minuto, los resultados son buenos; el cuerpo de la
levadura obtiene un color rojo-rosa, rodeado por el halo blanco de la cpsula y el fondo de
la preparacin en negro. Algunos autores reportan excelentes resultados con tincin de
mucicarmn de Mayer, colorante que tie la cpsula en fracciones. Son tambin tiles el
Papanicolaou y el hierro coloidal (azul).

Cultivos:
Este agente tiene requerimientos nutricionales mnimos. A diferencia de otras especies del
gnero, C. neoformans, puede crecer usando como fuente nitrogenada, compuestos de bajo
peso molecular.
Se obtienen fcilmente en los medios comunes como el agar Sabouraud dextrosa al cabo de
2 4 das de incubacin a 28 y/o 37 C. La mayora de las otras especies del gnero, no
pueden desarrollar a 37C. Temperaturas mayores, inhiben el crecimiento. Da colonias
blancas, mucosas, viscosas, hmedas, brillantes que se depositan en el fondo del tubo si se
lo ha mantenido verticalmente. Se pueden tornar parduscas con la edad. Microscpicamente
se ven elementos iguales a los observados en el examen directo. Debido a la presencia de
fenol oxidasa, diversos sustratos hidroxibenzoicos, son convertidos en metabolitos pardos
como la melanina, lo que le confiere un color amarronado a las colonias, cuando son
cultivadas en ciertos medios.
Tienen metabolismo aerobio, por lo que no son fermentadoras, producen ureasa y utilizan
varios hidratos de carbono. Las distintas especies de Criptococos se diferencian entre s por
una serie de caractersticas: crecimiento a 37 C, asimilacin de la sacarosa, lactosa,

galactosa, melobiosa, celobiosa, rafinosa, trealosa y dulcitol, utilizacin de KNO3 y

produccin de ureasa y fenil-oxidasa.

Criterios de identificacin:
1) clulas levaduriformes brotantes
2) ausencia de micelio
3) presencia de cpsula
4) crecimiento a 37 C
5) ureasa (+)
6) patgeno para el ratn.
Existen diferencias entre las dos especies ms frecuentemente aisladas, tanto desde el punto
de vista patognico como de distribucin geogrfica, de tal forma que C. neoformans se ha
relacionado con la infeccin en los pacientes inmunodeprimidos, siendo de distribucin
mundial, mientras que el C. gattii se ha descrito en infecciones de pacientes
inmunocompetentes y su distribucin est ms restringida a pases tropicales y
subtropicales. Tambin se diferencian estas especies por sus caractersticas bioqumicas: los
tipos B y C, asimilan los cidos 1-mlico, fumrico y succnico, producen pigmento de
color verde sobre agar con L-cavanina-glicina-azul de bromotimol, y asimilan la glicina
como nica fuente de carbono. Los serotipos A y D, por el contrario, no presentan estas
reacciones. Existen tambin diferencias genticas por hibridacin del DNA. La distribucin
en la naturaleza es asimismo diferente: los tipos A y D se asocian con las deyecciones de
palomas y otros pjaros, mientras que los otros dos tipos C se han encontrado en distintas
especies de eucaliptos (Eucaliptus calmadulensis, Eucaliptus rudis, etc.) y en los koalas de
Australia.

Deteccin del antgeno capsular de C. neoformans (aglutinacin en ltex)

La deteccin del antgeno capsular de C. neoformans mediante la prueba de aglutinacin
con partculas de ltex sensibilizadas en suero, LCR, orina e incluso en muestras
respiratorias es de gran utilidad en el diagnstico de la enfermedad criptococcica. En casos
de meningitis criptococcica confirmada la sensibilidad de la prueba es del 93%-99%. La
titulacin del antgeno en LCR en pacientes infectados por el VIH suele ser alta con una
mediana de 1/1024, a diferencia de lo que ocurre en pacientes no infectados por el VIH en
los que la mediana del ttulo del antgeno en LCR se sita entre 1/16 y 1/32. Los resultados
falsos positivos de la deteccin del antgeno capsular son raros (< 1%) en pacientes con
ttulos iguales o inferiores a 1/8 y excepcionales en pacientes con ttulos superiores. En
cualquier caso hay que tener en cuenta que pueden producirse falsos positivos en
infecciones diseminadas por Trichosporum beigelii o Capnocytophaga canimorsus, y en

algunas neoplasias y conectivopatas. Tambin se pueden producir falsos negativos por el

llamado fenmeno prozona (muestras positivas que no aglutinan a menos que sean diluidas
a ttulos ms altos) pero stos son extremadamente infrecuentes y se pueden evitar con una
mayor dilucin de la muestra o con el tratamiento de la muestra con pronasa.
La titulacin del antgeno de C. neoformans en LCR se ha correlacionado con el nmero de
microorganismos, y su medicin seriada puede ser til para monitorizar la respuesta al
tratamiento y predecir la aparicin de recidivas. La estabilizacin o el aumento en dos o
ms diluciones en LCR en la fase aguda de la enfermedad puede predecir un fracaso al
tratamiento, y el aumento del ttulo de antgeno durante la fase de mantenimiento se
relaciona con la aparicin de recidivas.
La deteccin del antgeno capsular de C. neoformans en suero de pacientes infectados por
el VIH con enfermedad criptococcica tiene una sensibilidad de alrededor del 99%. Dada
su alta sensibilidad un resultado negativo del mismo reducira sensiblemente la
probabilidad de enfermedad por C. neoformans. Por este motivo se ha propuesto su empleo
como prueba de cribaje para enfermedad criptococcica, sin embargo existe gran
controversia respecto a ello y su uso rutinario para descartar enfermedad criptococcica no
es recomendado. Hay que tener en cuenta que en pacientes infectados por el VIH con
cefalea y fiebre, un resultado positivo del antgeno no supone el diagnstico definitivo de
enfermedad por C. neoformans, sino que debe servir para orientar la estrategia teraputica y
las nuevas exploraciones diagnsticas que permitan confirmar la enfermedad. La
monitorizacin de los ttulos de antgeno de C. neoformans en suero no son tiles para
evaluar la respuesta al tratamiento ni la posibilidad de recidivas. En pacientes con
meningitis criptococcica los ttulos de antgeno en suero suelen ser superiores a los
obtenidos en LCR.

Tcnicas de diagnstico molecular

Idealmente las tcnicas de diagnstico molecular podran constituir una buena alternativa
para el diagnstico de enfermedad criptococcica que podran obviar algunos de los
inconvenientes de las tcnicas clsicas de diagnstico de la criptococosis. Se han ensayado
tcnicas de PCR para el diagnstico de criptococosis, habindose sealado una alta
sensibilidad y especificidad de las mismas en muestras pulmonares y de LCR. Pero la falta
de experiencia y de estudios concluyentes impiden que estas tcnicas puedan ser utilizadas
como mtodos diagnsticos habituales.

Identificacin mediante el mtodo de la ureasa

Una levadura con reaccin positiva a la prueba de la ureasa es sugestiva de pertenecer al
gnero Cryptococcus. Concretamente, las cepas de C. neoformans que son grandes
productores de ureasa, comienzan a provocar cambio de color a las 2 h de
nitrogeincubacin a 35 C.
Esta prueba tambin puede utilizarse para diferenciar Trichosporon de Geotrichum; la
mayora de las especies de Trichosporon son ureasa (+) mientras que las de Geotrichum son
ureasa (-).

Procedimiento
1. Pasar la punta de un aplicador de algodn, impregnado con agar base ureasa de
Christensen, sobre la superficie de dos o tres colonias aisladas del microorganismo a
estudiar, de un cultivo de 48 a 72 h en cualquiera de los medios habituales.
2. Colocar el aplicador inoculado en un tubo con 3 gotas de cloruro de benzalconio al 1%
(ajustar el pH a 4,8).
3. Presionar con fuerza la punta del hisopo contra el fondo del tubo para que se desprendan
los microorganismos contenidos en las fibras de algodn.
4. Tapar el tubo e incubar a 45 C.
5. Examinar el tubo a los 10, 15, 20 y 30 min.

Interpretacin
El desarrollo de un color rojo-prpura, indica el resultado positivo de la prueba

Prueba de la enzima Nitrato-reductasa

La capacidad de C. neoformans de reducir nitratos a nitritos es una prueba de utilidad
cuando se pretende identificar esta levadura.
Procedimiento
1. Pasar la punta de un aplicador por la superficie de 2-3 colonias aisladas de un cultivo de
48-72 h de crecimiento en cualquiera de los medios habituales. El hisopo inoculado se
presiona con firmeza contra el fondo de un tubo vaco para que se desprendan los
microorganismos contenidos en la fibra de algodn.
2. Incubar el tubo con el hisopo a 45 C durante 10 min.
3. Sacar el hisopo y agregar al tubo 2 gotas de alfanaftlamida y 2 gotas de cido sulfanlico.
4. Reintroducir el hisopo en el tubo para que absorba los reactivos.
Interpretacin
El desarrollo inmediato de un color rojo indica una reaccin positiva.

Prueba de la Fenol-Oxidasa
C. neoformans produce fenol-oxidasa, una enzima necesaria para el metabolismo de la 3,4dihidroxifenilanina (DOPA) y otros compuestos fenlicos en la sntesis de la melanina. Esto
se evidencia por la produccin de un pigmento marrn oscuro o negro alrededor de la
colonia de C. neoformans en el medio de TOC.
Procedimiento
1. Sembrar 2-3 colonias de un cultivo joven en el medio de TOC.
2. Incubar a 37 C durante 3-5 das.
Interpretacin
El desarrollo de una pigmentacin marrn oscura alrededor del crecimiento es
caracterstico de C. neoformans.

TRATAMIENTO Y PRONSTICO
El tratamiento de la criptococosis en pequeos animales suele combinar la reseccin
quirrgica de los granulomas y el tratamiento con antifngicos. Siempre que sea posible, se
recomienda la reseccin quirrgica de los granulomas criptococcicos antes de empezar el
tratamiento con antifngicos. De este modo se evitan problemas de perfusin del
antifngico a los tejidos infectados. Este tipo de intervencin quirrgica suele realizarse en
gatos con granulomas en la cavidad nasal o con ganglios linfticos muy aumentados de
tamao.
Existen diferentes antifngicos que se emplean para el tratamiento de perros y gatos. La
anfotericina B en combinacin con la 5-fluorocitosina se considera el tratamiento de
eleccin en gatos y perros con afectacin del sistema nervioso central. La anfotericina B es
nefrotxica pero es el antifngico ms efectivo. No es un tratamiento muy caro pero su
administracin va parenteral (intravenosa o subcutnea) puede requerir visitas al hospital y
encarecer el tratamiento. Generalmente se utiliza en animales hospitalizados o en las
primeras fases del tratamiento y despus se contina el tratamiento con azoles va oral. Es
importante remarcar que en los perros, la 5-fluorocitosina produce erupciones cutneas o
mucocutneas que obligan a suspender el tratamiento, por lo que es frecuente combinar la
anfotericina B con algn azol.
En los gatos y perros sin sintomatologa nerviosa, se emplean habitualmente los azoles para
el tratamiento de la criptococosis. El fluconazol es el antifngico de eleccin a una dosis de
50 mg cada 12 horas por va oral. Es ms efectivo que el ketoconazol y el itraconazol, y
puede penetrar en el sistema nervioso central, aunque no se han realizado estudios de su
eficacia en animales con afectacin nerviosa. Es un antifngico caro, lo que dificulta su
utilizacin en tratamientos largos o en animales de gran tamao. El itraconazol tiene una
eficacia similar al fluconazol, pero es hepatotxico. Es ms efectivo que el ketoconazol y
con menos efectos secundarios. El ketoconazol es el antifngico ms barato, pero las dosis
que son efectivas in vivo provocan efectos secundarios como inapetencia y vmitos,
especialmente en gatos.
El xito del tratamiento depende del estado del animal y, tambin en gran medida, de la
cooperacin de los dueos, ya que son tratamientos largos y de elevado coste econmico.
La duracin del tratamiento suele ser de entre 6 y 18 meses y no debe interrumpirse hasta
uno o dos meses despus de la desaparicin de la sintomatologa o, preferiblemente, hasta
la desaparicin total de antgeno en suero. Algunos autores recomiendan tratamientos

indefinidos con itraconazol o ketoconazol en gatos con FeLV o FIV y en perros de la raza
pastor alemn, dada la elevada posibilidad de recidivas.
Para comprobar la eficacia del tratamiento, se aconseja realizar determinaciones del ttulo
de antgeno de forma seriada. Si durante la terapia se observa una disminucin de una
dilucin de los ttulos de antgeno por mes, se considera que el tratamiento es efectivo,
mientras que la deteccin de ttulos persistentes indica la necesidad de realizar un
tratamiento que garantice el xito clnico. Una vez finalizado el tratamiento, es aconsejable
determinar los ttulos de antgeno cada tres o seis meses para poder realizar un diagnstico
precoz en caso de recidivas.
El pronstico es bueno en gatos con criptococosis extraneural, mientras que en perros con
cualquier forma de criptococosis y gatos con afectacin del sistema nervioso central, el
pronstico es reservado. En los animales inmunocompetentes, el tratamiento es curativo,
mientras que en animales con inmunosupresin, es posible la persistencia de la infeccin y
la aparicin de recidivas. Se considera que en gatos con FeLV el tratamiento es paliativo,
mientras que los gatos con FIV suelen recuperarse, aunque necesitan tratamientos ms
prolongados.
En humanos se considera que el tratamiento estndar de la meningitis criptococcica es la
combinacin de anfotericina B y flucitosina, aunque no hay consenso en cuanto al beneficio
de agregar el segundo frmaco. Muchos pacientes curan con la anfotericina B (con
flucitosina o sin ella). Los enfermos de SIDA con criptococosis casi siempre recaen cuando
se interrumpe el uso de la anfotericina B, razn por la cual necesitan terapia supresora a
base de fluconazol; este ltimo penetra en forma excelente en el sistema nervioso central.
Los enfermos de VIH/SIDA tratados con antirretrovirales altamente activos (HAART)
tienen una menor incidencia de criptococosis y tambin un pronstico mucho mejor. Sin
embargo, un subgrupo de esos pacientes termina por mostrar el sndrome inflamatorio de
reconstitucin inmunitaria, que exacerba su enfermedad.

CONCLUSIN
La criptococosis es una micosis espordica que puede afectar a diferentes especies
animales, siendo el gato la especie ms susceptible. Es una enfermedad grave pero con un
diagnstico en los primeros estadios y un tratamiento antifngico adecuado tiene un buen
pronstico. Tanto gatos como perros pueden ser portadores de C. neoformans y C. gattii. Lo
esencial en su identificacin mediante el uso de las diferentes pruebas de diagnstico es
conocer el medio en que se desarrollan, y la susceptibilidad en su interaccin con el medio
externo, para su respectivo tratamiento.

La cpsula de C. neoformans est compuesta principalmente por glucuronoxylomanan

(GXM), y en menor proporcin de galactoxylomanan (GALXM). La mayor protena de la
pared celular es la manoprotena (MP). Todos estos componentes son serolgicamente
distintos, y al menos dos de stos (GXM y MP) tienen efectos por separado sobre el sistema
inmune. Las propiedades inmunosupresivas de GXM es muy importante en el desarrollo de
la enfermedad. A la MP se le ha adscrito un papel de inmunopotenciacin antignica, que
involucra la respuesta inmune celular; sin embargo, el rol de las MP en la patognesis de la
criptococosis est todava pobremente caracterizada. El origen celular de la secrecin de
MP no est claro todava y las molculas manoprotenas antignicas con actividad
inmunomoduladora no han sido identificadas. La MP est asociada con la pared celular de
C. neoformans, la cual tiene un rol en la linfoproliferacin de clulas T, proporcionando una
MP criptoccica complicada en el desarrollo de la IMC; existen estudios recientes que
demuestran la presencia de otras protenas en la pared y membrana celular, dotadas con
propiedades antignicas probablemente mitognicas distintas a la MP y que son capaces de
estimular la linfoproliferacin.
Por los estudios revisados se puede concluir que la virulencia de C. neoformans es
multifactorial, y depende de las diferencias cuantitativas en la expresin de los numerosos
factores, como tambin las caractersticas que regulan las distintas vas de estos factores.
Sin duda, siempre han de existir dos factores fundamentales en el establecimiento de una
infeccin y posterior enfermedad, que son: las condiciones inherentes al husped (si est
inmunocompetente o no) y las caractersticas propias del agente, as como ruta de
inoculacin y la cantidad del mismo; cuando se rompe algn eslabn en esta cadena, que ha
de estar en equilibrio con el medio, siempre se producir la enfermedad.

ANEXOS

Cryptococosis canina

1. Cryptococosis felina

3. morfologa

2. Cryptococosis canina

4. Cultivo

5. Vista
macroscpica y microscpica de pabelln auricular con ndulo ulcerado.

6. C. neoformans. Arriba izq. tincin tinta china. 1000X, derecha tincin Giemsa.
1000X; Abajo izquierda tincin mucicarmina de Mayer 1000X, derecha papanicolau
1000X.

7. Colonia en medios de cultivo

8. Prueba de ureasa

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Arenas R. Cryptococosis. Micologa Mdica Ilustrada. 3 ed. Mxico: McGRAW-HILL;
2008. P. 239-236.
2. Rivero Romn A. Infecciones por C. neoformans. Infecciones Fngicas en Pacientes
Infectados con el VIH. Crdoba: TAFICS; 2008. P. 81-99.
3. Bonifaz A. Cryptococosis. Micologa Mdica Bsica. 4 ed. Mxico D.F: McGRAWHILL; 2010. P. 348-365.
4. Pumarola A, Rodrguez Torres A, Garca Rodrguez J.A, Pidrola Angulo G.
Cryptococcus neoformans. Microbiologa y Parasitologa Mdica. 2 ed. Mxico D.F:
Salvat; 2010. P. 786-788.
5. Jawetz E, Melnick J.L, Adelberg E.A. Criptococosis. Microbiologa Mdica. 25 ed.
Mxico D.F: McGRAW-HILL; 2010. P. 649-651.
6. Murray P.R, Rosenthal K.S, Pfaller M.A. Criptococosis. Microbiologa Mdica. 6 ed.
Madrid: Elsevier; 2010. P. 760-763.
7. Vzquez T.O. Criptococosis. Historia natural y estado actual de tratamiento [sede Web].
Mxico D.F: Medigraphic.com; 2005 [Acceso 10 de junio del 2015]. [11 pginas].
Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/actpedmex/apm-2005/apm051e.pdf
8. Blackwellpublishing.com, Criptococosis. Una amenaza para pacientes
inmunosuprimidos [sede Web]. La Habana: Blackwellpublishing.com; 2011 [Acceso 10 de
junio del 2015]. [13 pginas]. Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/gme/pub/vol.13.
(3)_15/vol.13.3.15.pdf

9. Corpa J. M. Veterinaria.org, Criptococosis felina [sede Web]. Veterinaria.org; 2005.

[Acceso 10 de junio del 2015]. [13 pginas]. Disponible en:
http://www.veterinaria.org/revistas/recvet/n060608/060801.pdf
10. Gastell G. Reviberoammicol.com, Criptococosis y animales de compaa [sede Web].
Barcelona: Reviberoammicol.com; 2008. [Acceso 10 de junio del 2015]. [6 pginas].
Disponible en: http://www.reviberoammicol.com/2008-25/S19S24.pdf