Serie Roja

MANUAL DE HEMATOLOGIA
FORMULA ROJA
INTRODUCCION:
La eritropoyesis es el proceso a la generacin de los glbulos rojos (tambin
conocidos como eritrocitos o hemates). Los eritrocitos son los elemento formes
cuantitativamente ms numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno de sus
principales componentes y su objetivo es transportar el oxgeno hacia los
diferentes tejidos del cuerpo, los eritrocitos humanos carecen de ncleo y de
mitocondrias por lo que deben obtener su energa a travs de la fermentacin
lctica.
FUNDAMENTO:
Este tipo de prueba consiste en el estudio cualitativo y cuantitativo de los
eritrocitos es por eso que se lleva a cabo diferentes pruebas que son:
determinacin de la hemoglobina, hematocrito, recuento de glbulos rojos e
ndices hematocritos: que estos a su vez nos ayudan a descartar
enfermedades que con estos estudios se pueden realizar.
OBJETIVO:
Determinar la frmula roja en el analizador ADVIA 120, evaluar la importancia
del hematocrito, hemoglobina y volmenes eritrocitarios en el diagnstico de
algunas enfermedades.
Equipo:
Agitador de tubos
ADVIA 120
Material:
Tubos con anticoagulante EDTA

Torunda con alcohol
Jeringas desechables
Torniquete
Vacutainer
Bolsa roja para RPBI
Contenedor de plstico rojo para RPBI
Bolsa verde
Reactivo:
Minipack para ADVIA 120
Tcnica:
1. Toma de muestra de sangre venosa en ayuno.
2. Colocar los tubos en el agitador de tubos.
3. Colocar la muestra de sangre previamente agitada en el ADVIA 120.
3.- accesar informacin del paciente.
5.4. Esperar resultados y anotar.
FORMULA BLANCA
INTRODUCCIN:
La serie blanca est formada por los leucocitos o glbulos blancos. Sus
funciones principales son la defensa del organismo ante las infecciones y la
reaccin frente a sustancias extraas.
El recuento de leucocitos tiene dos componentes. Uno es la cifra total de
leucocitos en 1 mm3 de sangre venosa; el otro, la frmula leucocitaria, mide el
porcentaje de cada tipo de leucocitos, que son: segmentados o neutrfilos,
monocitos, linfocitos, eosinfilos y basfilos.
.
FUNDAMENTO:
OBJETIVO:
Determinar los leucocitos presentes en una muestra sangunea mediante la
utilizacin del analizador ADVIA 120.
Equipo:
Agitador de tubos
ADVIA 120
Material:
Tubos con anticoagulante EDTA
Torunda con alcohol
Jeringas desechables
Torniquete
Vacutainer
Bolsa roja para RPBI
Contenedor de plstico rojo para RPBI
Bolsa verde
http://laboratorio-clinico-612.blogspot.com/2012/06/hemograma-en-medicina-elhemograma-o.htm
Reactivo:
Minipack para ADVIA 120
Tcnica:
1. Toma de muestra de sangre venosa en ayuno.
2. Colocar los tubos en el agitador de tubos.
3. Colocar la muestra de sangre previamente agitada en el ADVIA 120.
4. Esperar resultados y anotar.
CUENTA DE RETICULOCITO
4
INTRODUCCIN:
Los reticulocitos se consideran glbulos rojos inmaduros, prcticamente
indiferenciables de los glbulos rojos maduros, a menos que se les tia con
tincin supravital. El colorante azul de cresil o azul de metileno tie los restos
de cido ribonucleico en forma de red muy fina, los cuales permanecen en el
citoplasma del eritrocito algunos despus de haber perdido su ncleo. Los
reticulocitos tienen una duracin de 24-48 horas despus de que ha salido de
la mdula sea para as convertirse en un eritrocito maduro en sangre
perifrica.
FUNDAMENTO:
La investigacin de reticulocitos es una de las pruebas ms tiles en la
investigacin de la causa de la anemia, pues nos da idea del estado de la
produccin de glbulos rojos por la mdula sea.
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede
teir con el azul de cresil brillante. Este colorante en combinacin con una
misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la
temperatura (bao mara) se produce la coloracin de estos eritrocitos jvenes
visualizndose en los frotices sanguneos por microscopa.
OBJETIVO:
El examen se realiza para determinar si los glbulos rojos sanguneos se estn
produciendo en la mdula sea a una tasa apropiada. El nmero de
reticulocitos en la sangre es un signo de la rapidez con la cual estn siendo
producidos y liberados por parte de la mdula sea.
Equipo:
Microscopio
Bao mara a 37C
Material:
Tubos de ensayo
Portaobjetos
Pipetas de Pasteur con bulbo
Sangre con EDTA
Reactivo:
Azul de metileno
Tcnica:
1.- Colocar en un tubo dos gotas de sangre (aproximadamente 50l por cada
gota) y dos gotas de colorante.
2.- Agitar la mezcla sangre-colorante e incubar 15 minutos a temperatura

ambiente.
3.- Hacer una extensin en un portaobjetos con una gota de la mezcla.
4.- Dejar secar y observar en objetivo de inmersin 100x.
5.- Contar 500 eritrocitos, anotando el nmero de reticulocitos observados
dentro de ese conteo
Ejemplo:
Al realizar el conteo observamos 10 reticulocitos por cada 500 eritrocitos, el
porcentaje de reticulocitos se realiza de la siguiente manera:
% de reticulocitos = Nmero reticulocitos en
500 eritrocitos
5
% de reticulocitos = 10 = 2
5
Nota:
Los resultados de reticulocitos en pacientes anmicos debern corregirse
debido a que se presenta en una anemia una falsa impresin del nmero nuevo
de eritrocitos que son producidos por el paciente anmico.
Ejemplo:
Si en un paciente obtuvimos reticulocitos no corregidos (observados) de 5%,
1 x 106 glbulos rojos, hematocrito de 9. Empleando la siguiente frmula
obtenemos el porcentaje de reticulocitos corregido.
Valores de referencia:
Recin nacidos: 3 6 %
Adultos: 0.5 1.5 %
http://campus.um.edu.mx/fesja/display.aspx?
idCol=32&idItem=83&tipoItem=Documento
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)

INTRODUCCIN:
La membrana de los glbulos rojos tiene una carga electrosttica negativa
(potencial zeta). Esta carga electrosttica negativa da lugar a unas fuerzas de
repulsin entre los hemates que hacen que los eritrocitos tiendan a
permanecer en suspensin. Sin embargo, con el tiempo, los glbulos rojos
acaban depositndose debido a la fuerza de la gravedad en el fondo del
recipiente que los contiene.
FUNDAMENTO:
La prueba puede aplicarse para detectar enfermedades no sospechadas,
muchos clnicos emplean la VSG con esa idea en la evaluacin rutinaria de sus
pacientes, Otros la consideran inespecfica y poco til como estudio rutinario.
La VSG puede ser til en ocasiones para diferenciar entre entidades
patolgicas. Por ejemplo, en el paciente con dolor torcico, la VSG estar
aumentada en caso de infarto de miocardio, mientras que ser normal en caso
de angina.
OBJETIVO:
Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los
glbulos rojos o Eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de
plasma sanguneo (Citratado o con EDTA), en un periodo determinado de
tiempo, habitualmente una hora.
Equipo:
Cronmetro
Material:
Muestra de sangre
Pipeta Pasteur
Cronmetro
Tubos de wintrobe
Gradilla de sedimentacin
Tcnica:
1.- Tome Sangre del Tubo con anticoagulante (EDTA) con una Pipeta Pasteur
2.- Transfirala a un tubo de Wintrobe y llnelo hasta la marca de "0".
3.- Debe Procurar que al vaciar la muestra con la jeringa de metal la punta de
esta quede al fondo del tubo e ir vaciando la sangre suavemente, al mismo
tiempo que se va retirando la jeringa del fondo
7
4.- Lleve el Tubo De Wintrobe a La gradilla e Inicie el conteo de tiempo,

dejando reposar la muestra durante una hora
5.- Transcurrida una hora, mida el espacio que ocupa el sobrenadante, desde
la superficie hasta el borde superior de los eritrocitos sedimentados, haga la
lectura en mm.
A mayor edad, es mayor el rango del lmite de valores normales:

Hombres: hasta 15 mm/
Mujeres: hasta 20 mm/h
Nios: hasta 10 mm/h
Recin nacidos: 0-2 mm/h
Embarazadas: 40 mm/h a 45 mm/h
Dato importante:
La muestra debe estar libre de hemlisis. La determinacin se realizar antes
de que pasen 2 horas desde la extraccin, hasta un mximo de 6 horas si se
conserva la muestra a 4C. Hay que realizarla a temperatura ambiente, ya que
a mayor temperatura asciende la VSG y a menor temperatura disminuye.
http://dentizta.ccadet.unam.mx/Instrumenta/contenido/practicas/biometriahematica/vse_vsg
.htm#tec_1
GRUPOS SANGUINEOS.
INTRODUCCIN:
Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo con las
caractersticas presentes o no en la superficie de los glbulos rojos y suero de
la sangre,
FUNDAMENTO:
Los eritrocitos humanos pueden o no tener en su superficie alguna
combinacin de los antgenos del sistema ABO y Rh. De la misma forma,
algunos individuos tendrn en el suero isoanticuerpos dirigidos contra alguno
de los antgenos del sistema ABO; solamente tendrn en el suero
isoanticuerpos anti-D aquellos individuos que hayan sido previamente
sensibilizados a este antgeno. En consecuencia, los sueros que contengan
isoanticuerpos anti-A aglutinarn a los eritrocitos que tengan al antgeno A y
suceder lo propio en otros casos.
OBJETIVO:
Este examen se hace para determinar el tipo de sangre de una persona, los
mdicos necesitarn conocer su tipo de sangre cuando le vayan a hacer una
transfusin de sangre o un trasplante, debido a que no todos los tipos de
sangre son compatibles entre s.
Material:
Placa
Palillos para agitar
Muestra de sangre
Reactivos:
Anti-suero A
Anti-suero B
ANTI- (RH)
Tcnica:
1.- Colocar 1 gota de la sangre 1(tapn rojo) en 3 lugares diferentes de la
placa, es conveniente que se identifique cada con la muestra a analizar.
2.- Aadir 1 gota de Anti-suero A (lquido azul) en la gota de sangre.
3.- Aadir 1 gotas de Anti-suero B (lquido amarillo) en la gota de sangre.
4.- Aadir 1 gota de Anti-suero (Rh) (lquido transparente) en la gota de sangre.
5.- Utilizando un palillo diferente para cada reaccin, mezclar la gota de sangre
con las de Anti-suero durante 20 segundos. Evitar la contaminacin entre
reacciones.
6.- Examinar las mezclas, si se forman grnulos, la aglutinacin ha tenido lugar,
o si por el contrario la mezcla es homognea, no hay aglutinacin.
http://www.facmed.unam.mx/fm/pa/2010/practicas/practicas_inmuno.pdf
http://www.bioted.es/bioted%20protocolos/PROTOCOLO%20ABO%20
unicach.mx/_/.../Manual%20de%20Bioquimica%20Clinica%20QFB%20
1
0
TINCION DE WRIGHT MODIFICADA.

INTRODUCCIN:
Es una tincin modificada del mtodo de Romanosky, los colorantes cidos se
unen a los componentes bsicos de las clulas afines al citoplasma e
inversamente los colorantes bsicos son atrados por los componentes no
cidos, sea al ncleo, es decir que esta tincin es la mezcla de un colorante
cido que es la eosina y uno bsico que es el azul de metileno, tambin
llamados colorantes policromatfilos o neutros.
FUNDAMENTO:
La tincin de Wright es una tincin de tipo Romanowsky. Una tincin de
Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidacin, as
como eosina Y o eosina B .La accin combinada de estos colorantes produce
el efecto Romanowsky que da una coloracin prpura a los ncleos de
los leucocitos y a los grnulos neutroflicos y da color rosado a los eritrocitos.
OBJETIVO:
Facilitar la diferenciacin de los tipos de clulas de la sangre, principalmente
para teir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al
microscopio, en citogentica se usa para teir cromosomas para facilitar el
diagnstico de sndromes y enfermedades.
Equipo:
Microscopio
Material:
Portaobjetos
Laminero
tinciones
Aceite de inmersin
Reactivos:
Buffer de sales
Colorante de Wright
1
1
Agua bidestilada
Tcnica:
1.- Colocar una gota de sangre en un portaobjetos.
2.- Realiza un extendido con un ngulo de 180.
3.- Secar al aire sin soplar.
4.- Agregar el colorante de Wright, hasta cubrir completamente el frotis, durante
7 minutos aproximadamente.
5.- Despus se agrega el Buffer de sales, hasta cubrir completamente el frotis,
durante 12 minutos aproximadamente.
6.- Se enjuaga el frotis con agua bidestilada para evitar que se deshidraten las
clulas.
7.- Dejar secar el frotis al aire libre, para observar con objetivo de 100 x
inmersin.
1
2
PREPARACION DE COLORANTE DE WRIGHT.
1.- Pesar en una balanza analtica 2 gramos de polvo de colorante de Wright.

2.- Medir en un matraz aforado un litro de metanol absoluto.
3.- En un mortero de mano, machacar el polvo del colorante, agregndole poco
a poco el metanol.
4.- Vaciar el colorante ya machacado y bien diluido en el frasco mbar
5.- Dejar madurar el colorante, para utilizarlo aproximadamente de 5 a 7 das.
1
3
PREPARACION DE BUFFER.
INTRODUCCIN:
Muchas de las reacciones qumicas que se producen en solucin acuosa
necesitan que el pH del sistema se mantenga constante, para evitar que
ocurran otras reacciones no deseadas. Las soluciones ""reguladoras"" o Buffer
son capaces de mantener de acidez o basicidad de un sistema dentro de un
intervalo reducido de pH, por lo cual tienen mltiples aplicaciones, tanto en la
industria como en los laboratorios.
FUNDAMENTO:
Una solucin buffer debe contener un cido dbil y una sal de ste cido; por
ejemplo cido actico/acetato de sodio, donde el CH3COOH es el cido y el
Ion CH3COO- es la base o una base dbil y una sal de sta base; por ejemplo
amonaco/cloruro de amonio, donde el NH3 es la base y el Ion NH4+ es el
cido. Las soluciones buffers trabajan removiendo los iones H+ o los iones OHde la solucin.
OBJETIVO:
Determinar las caractersticas especiales de cada sustancia por medio de la
determinacin del pH y la de observar la capacidad amortiguadora o de
resistencia a los cambios bruscos de pH que poseen algunas sustancias
presentes en los organismos vivos.
Equipo:
Balanza de precisin bien calibrada y en gramos
Material:
Matraz aforado
Mortero de porcelana
Frasco mbar
Pizetas
Agua destilada
Reactivos:
1
4
Sal de Fosfato de potasio monobsico

Sal de Fosfato de sodio dibasico
Solucin buffer pH6.!6."
Tcnica:
1.- Pesar en una balanza analtica la sal de Fosfato de Potasio Monobsico
(KH2PO4 PM =136.09), 3.77 gramos para un litro.
2.- Pesar en una balanza analtica la sal de Fosfato de Sodio Dibsico
(NA2HPO4 PM.=141.96), 3.42 gramos para un litro.
3.-Medir en un matraz aforado las sales ya pesadas y distribuirlas en un litro
de agua bidestilada.
4.- Despus de hacer la dilucin de las sales utilizar el buffer, que sirve como
mordente para fijar el colorante de las clulas sanguneas.
5.- La solucin amortiguadora o buffer que se debe utilizar para la
coloracin tiene un pH de 6.4
1
5
TECNICA PARA EL CONTEO DE ESPERMATOZOIDES.

INTRODUCCIN:
La causa ms frecuente de esterilidad es infeccin de conductos genitales,
aunque a veces los tubos seminferos testiculares pueden ser destruidos
parcial completamente por parotiditis, tifus, radiacin por rayos X nuclear.
Algunos varones tienen testculos con deficiencia congnita y son incapaces de
producir espermatozoides normales, o cuando el numero de espermatozoides
eyaculado es demasiado bajo (Oligozoospermia), aunque todos ellos sean
normales.
FUNDAMENTO:
La cuantificacin de los espermatozoides se recomienda hacerla por medio de
prediluyente, donde su activo sea un detergente, capaz de modificar la acidez
inica e inmovilizar a los zoospermas, sin alterar su morfologa. Con el uso del
tergitol se logran preparaciones limpias y zoospermas morfolgicamente
intactos. Adems, las diluciones as preparadas se pueden conservar durante
una semana en refrigerador, sin alteracin significativa, ni el nmero, ni en la
morfologa.
OBJETIVO:
El objetivo principal del examen de lquido seminal es determinar en caso de
esterilidad, si la causa reside en alteraciones de los espermatozoides.
Equipo:
Cmara de Neubauer
Cmara hmeda
Microscopio
Material:
Tubos de ensaye de 12x75 mm
Pipeta para recuento de leucocitos
Reactivos:
1
6
Prediluyente Cat. 90228

Tensoactivo atoxicado 9%
Conservador y estabilizador 0.15%
Excipiente cbp 100 ml
Tincin de Wright
Tcnica:
1.- En un tubo de ensaye de 12x75 mm se depositan 0.9 ml de prediluyente
para espermatozoides. Mediante una pipeta de 0.1 ml, se adiciona 0.1 ml de la
muestra bien mezclada. La pipeta se enjuaga varias veces, aspirando y
expulsando la mezcla y agitando de esta manera durante 30 segundos.
2.- De la dilucin 1:10, se aspira con una pipeta para recuento de leucocitos
hasta la marca 1, aspirando despus Oxalato de amonio al 1% hasta la marca
11. La dilucin final de esta en el bulbo es de 1:100. Si los espermatozoides
son muy escasos, se haran diluciones menores, sin son muy abundantes se
hacen diluciones mayores, tenindose presente la dilucin empleada en el
calculo.
3.- Se agita la pipeta en un agitador mecnico hasta que el liquido en el bulbo
de la pipeta sea homogneo.
4.- Se desecha el lquido del tallo, y con las precauciones habituales se pasa la
dilucin del semen a una cmara de recuento de Neubauer.
5.- Una vez cargada la cmara, hay que esperar cuando menos unos 15
minutos para que los zoospermas sedimenten y puedan ser contados
exactamente. Para evitar la desecacin, se puede mantener la cmara
hmeda, evitndose as errores de conteo inherentes al amontonamiento de los
zoospermas y evitar la evaporacin que acarrea concentraciones falsas de los
elementos.
6.- Se observa al microscopio y se cuentas los zoospermas presentes en la
cuadricula de leucocitos, es decir, en los 4 cuadros grandes de las esquinas de
la cuadricula, de 1 mm2 de rea de cada uno.
Clculos:
Contando los espermatozoides presentes en las reas consideradas y
relacionndolas con la dilucin empleada, se obtiene la cuenta se zoospermas
por ml, despus de hacer la conversin de litros a ml.
El volumen en que se contaron los elemento es de 0.4 mm3, de tal manera que
para determinar el nmero de elementos por litro, hay que multiplicar por 2.5
(1/0.4).El resultado se multiplica luego por 1,000 para referir a ml y despus
por 100 para corregir la dilucin
Zoospermas por ml = Numero de elemento contados x 250,000
Valores de referencia esperados:
1
7
Hombres adultos: 60 millones de espermatozoides ml
VITALIDAD ESPERMATICA
INTRODUCCIN:
La fertilidad en los varones ha disminuido en las ltimas dcadas las
principales causas de infertilidad en las parejas se atribuyen a la disminucin
de la calidad del semen, esta condicin se encuentra relacionada con mltiples
factores como el consumo de alcohol y tabaco, el medio ambiente, la obesidad,
la disminucin del tamao testicular, las enfermedades de transmisin sexual,
entre otros factores causales.
FUNDAMENTO:
La vitalidad espermtica se calcula considerando la proporcin de
espermatozoides vivos. Cuando se encuentran que ms del 50% de estos
estn inmviles, la vitalidad se determina utilizando tincin supravital porque en
las clulas muertas se altera permeabilidad de membrana permitiendo el paso
libre de los fluidos, las tcnicas de tincin son las que hacen posible diferenciar
los espermatozoides inmviles vivos de los muertos, adems la presencia de
una gran proporcin de clulas inmviles pero vivas puede ser indicativa de
defectos estructurales en los espermatozoides.
OBJETIVO:
El anlisis se realiza cuando existen dudas sobre la fertilidad del paciente, bien
para determinar si existe un problema de produccin de esperma o si la calidad
del esperma es la causa de la infertilidad.
Equipo:
Microscopio
Material:
Portaobjetos
Cubreobjetos
Reactivos:
1
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Colorante de Eosina-nigrosina al 5%
Tcnica:
1.- Se prepara la solucin de eosina-nigrosina:
2.- Sobre un portaobjetos se coloca una gota de semen y una gota de la
solucin de eosina-nigrosina, se coloca un cubreobjetos.
3.- Luego de 1 a 2 minutos, se observan los espermatozoides rojos y no
coloreados, sobre el fondo oscuro.
4.- La diferencia de coloracin se debe a que los espermatozoides vivos -como
tienen su membrana plasmtica intacta-, no se colorean. El colorante puede
penetra, sin embargo, la membrana de los espermatozoides muertos y los
colorea.
5.- Con microscopio ptico, recorrer el frotis en forma de guarda griega y contar
200 clulas distribuidas en el preparado.
6.-Estimar el porcentaje de vivos (o muertos), a partir de las 200 clulas

contadas.
Clculos:
200 espermatozoides contados x 100 / 1000 = % de espermatozoides vivos y
muertos
N O T A:
La vitalidade s p e r m t i c a s e e v a l a d e n t r o d e l o s p r i m e r o 3
0m i n u t o s i n m e d i a t a m e n t e d e s p u s d e l i cu a d a l a
muestra, pero en algunos casos se puede evaluar hasta d e n t r o d e u n a
h o r a c u a n d o l a m u e s t r a n o s e a l i c u a d o completamente, nunca
despus de la hora para evitar encontrar un elevado numero de
espermatozoides muertos por efectos de deshidratacin o cambios de
pH o temperatura que puedan afectar a la muestra.
1
9
https://www.google.com/#q=calculos+vitalidad+espermatica+eosina
TECNICA DE CIDO PERYDICO DE SHIFF (PAS)

INTRODUCCIN:
La reaccin del PAS ha perdido utilidad en el diagnstico hematolgico
despus de la aparicin de mejores marcadores. Sigue teniendo inters en la
diferenciacin de diferentes tipos de leucemias linfoblsticas, en la
eritroleucemia y en diversas mielodisplasias.
FUNDAMENTO:
La reaccin de PAS o del cido perydico de Schiff se basa en la rotura de los
enlaces -C-C- presentes en los carbohidratos por la accin del cido perydico,
potente agente oxidante, liberndose grupos aldehdo que al combinarse con el
reactivo de Schiff dan un compuesto de color rojo prpura intenso. Identifica al
glucgeno en el citoplasma celular.
OBJETIVO:
La tcnica de PAS se utiliza en los preparados para microscopa ptica,
permitiendo la tincin de componentes celulares que contienen hidratos de
carbono, por ejemplo algunas membranas celulares, clulas caliciformes en la
mucosa del intestino, fibras reticulares que estn rodeados por hidratos de
carbono.
Equipo:
Microscopio
Material:
2
0
Portaobjetos
Cubreobjetos
Agua
Laminero
Reactivos:
cido perydico de Schiff
Hematoxilina de Gill.
Resina sinttica
Xilol
Tcnica:
1.- Fijar los frotis por 5 minutos (utilizar la solucin fijadora a temperatura
ambiente).
2.- Lavar con agua corriente.
3.- Secar al aire.
4.- Colocar en cido perydico durante 10 minutos.
5.- Lavar con agua de la llave y secar perfectamente.
6.- Sumergir en el reactivo de Schiff por 20 minutos.
7.- Lavar con agua de la llave.
8.- Contrateir con hematoxilina de Gill por 10 minutos.
10.-Secar al aire.
11.- Cubrir con resina sinttica, xilol y cubreobjetos del No. 1.
2
1
TCNICA PARA MIELOPEROXIDASA

INTRODUCCIN:
La defensa del organismo est mediada por las clulas del llamado sistema
retculo endotelial, de las cuales los polimorfonucleares neutrfilos constituyen
la primera lnea de defensa inespecfica. La mieloperoxidasa es la protena ms
abundante en los neutrfilos y es la nica peroxidasa que cataliza la conversin
del perxido de hidrgeno y cloruro a cido hipocloroso.
FUNDAMENTO:
La reaccin de la peroxidasa es positiva en las clulas de serie granuloctica en
todos sus estadios de maduracin y dbil o negativa en los monocitos, y esta
determinacin se puede usar para diferenciar clulas de estas lneas, de
clulas linfoides o eritroides que son peroxidasa negativa.
OBJETIVO:
Por medio de esta tincin mejorar la localizacin de enzimas y sustancias
inorgnicas., logrando as la diferenciacin celular y en algunos casos tambin
sirven para el diagnstico de ciertas leucemias.
Equipo:
Microscopio
Material:
Portaobjetos
Cubreobjetos
2
2
Agua
Laminero
Reactivos:
Perxido de hidrgeno
Cloruro a cido hipocloroso
Safranina 1%
Resina sinttica
Xilol
Tcnica:
1.- Fijar los frotis por un minuto (utilizar la solucin fijadora a temperatura
ambiente).
3.- Secar al aire perfectamente.
4.- Sumergir en la solucin colorante por 30 segundos.
6.- Secar al aire.
7.-Contrateir por 30 segundos con solucin de contratincin acuosa de
Safranina al 1%.
9.- Secar al aire.
10.- Cubrir con resina sinttica, xilol y cubreobjetos del No. 1.Evitar la
formacin de burbujas.
2
3
LQUIDO CEFALORAQUDEO.
INTRODUCCIN:
El LCR, es un fluido metablicamente activo,
que normalmente es
transparente, acta como un amortiguador, protegiendo el cerebro y la columna
de una lesin. El examen tambin se utiliza para medir la presin en dicho
lquido.
FUNDAMENTO:
El LCR se produce de modo continuo, tiene una baja densidad (1.004 1.008),
es pobre en protenas y contiene cantidades relativamente elevadas de NaCl y
K, adems posee cierta cantidad de clulas en descamacin y linfocitos. Estas
caractersticas se pueden ver alteradas fundamentalmente en patologas de las
reas ms externas del SNC, mientras que afecciones ms profundas no
producen ninguna alteracin.
OBJETIVO:
La obtencin de este lquido es importante debido a que es un de diagnstico
de enfermedades neurolgicas, como pueden ser los sndromes menngeos,
las hemorragias subaracnoideas, los tumores cerebro-espinales.
Equipo:
Microscopio
Centrifuga
Cmara de Neubauer
Material:
2
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Cubre Hematimetro
Pipeta para glbulos rojos
Portaobjetos
Tubos de vidrio de 13x100
Aceite de inmersin
Capilares
Laminero
Reactivos:
Solucin salina
Colorante de Wright
Tcnica:
1.- La muestra ha de mezclarse bien antes del anlisis.
2.- Colocar una gota de LCR, en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre
hematimetro.
3.- Hacer el conteo de los cuatro cuadrantes de la cmara con el objetivo de
40 x.
4.- Realiza los clculos de nmero de clulas contadas x 10 que es un factor de
la cmara y dividir entre cuatro que son los cuadrantes contados.
5.- Si el recuento de clulas nucleadas es demasiado elevado se debe
proceder a diluir la muestra En una pipeta para glbulos rojos y diluir con
solucin salina.
6.- Realizar tincin de Wrigth, para morfologa celular.
Valores normales:
Protena total en LCR: 15 a 60 mg/100 mL
Glucosa 50 a 80 mg/100 mL
El conteo normal de glbulos blancos esta entre 0 y 5, no se recomiendan
contadores electrnicos.
Anlisis cuantitativo de protenas totales y glucosa
LIQUIDO SINOVIAL
2
5
INTRODUCCIN:
El anlisis del lquido sinovial es un procedimiento habitual en la mayora de los
laboratorios, sin embargo algunas de las magnitudes estudiadas, son poco
sensibles e inespecficos, slo el estudio de microbiolgico y el anlisis de
microcristales son de utilidad diagnstica manifiesta, mientras que el recuento
celular es til a la hora de clasificar las artropatas aunque est sometido a una
importante variabilidad entre evaluadores.
FUNDAMENTO
El estudio de este lquido tiene gran importancia en la valoracin de la artritis,
junto con la exploracin fsica y el estudio radiolgico, es especialmente
importante en las artritis monoarticulares, en las que tiene que establecerse el
diagnstico diferencial entre el origen infeccioso y otras posibles causas.
OBJETIVO:
La finalidad del estudio del lquido sinovial es ayudar a diagnosticar las
enfermedades reumatolgicas e infecciosas que afectan a las articulaciones, ya
que su alteracin refleja la patologa de la membrana sinovial y del cartlago
articular subyacente.
Anlisis macroscpico
Un lquido sinovial no patolgico ha de ser incoloro y transparente, la presencia
de turbidez se debe asociar a un incremento de su celularidad. Muy a menudo
puede tener un color amarillento plido que suele deberse a la diapdesis de
algunos eritrocitos e incluso puede estar asociada a un pequeo traumatismo
Equipo:
Microscopio
Centrifuga
Material:
Cmara de Neubauer
Cubre Hematimetro
Portaobjetos
Aceite de inmersin
Capilares
Laminero
Reactivos:
Solucin salina
Colorante de Wright
Tcnica:
2
6

2.- Colocar una gota de lquido Sinovial, en la cmara de Neubauer, cubrir con
el cubre hematimetro.
3.- Hacer el conteo de los cuatro cuadrantes de la cmara con el objetivo de 40
x.
4.- Realizar los clculos de nmero de clulas contadas x 10 que es un factor
de la cmara y dividir entre cuatro que son los cuadrantes contados.
5.- Para morfologa celular usar la tincin de Wright, en el lquido sinovial se
observan los mismos elementos celulares que en la sangre, aunque en
diferentes proporciones y con morfologa variable en funcin de la intensidad
de la respuesta inflamatoria articular.
Anlisis cuantitativo de protenas totales, glucosa, albmina y DHL
LIQUIDO PLEURAL
INTRODUCCIN:
El derrame pleural es un acumulacin patolgica de materia prima en el
espacio pleural, tambin se le conoce como pleuresa o sndrome de
interposicin lquida. Es una enfermedad frecuente con ms de 50 causas
reconocidas incluyendo enfermedades locales de la pleura, del pulmn
subyacente, enfermedades sistmicas, disfuncin de rganos y frmacos. 1
FUNDAMENTO
El acumulo o incremento del lquido pleural se denomina derrame pleural.
Cuando ste existe, en cantidad apreciable, en general est indicado su
estudio, en el laboratorio. En condiciones normales, el espacio pleural contiene
de 1 a 10ml de fluido. Se considera patolgico un volumen de lquido pleural
que pueda ser detectado radiolgicamente.
OBJETIVO:
El anlisis del lquido pleural es un examen con el que se analiza el lquido que
se ha acumulado en el espacio pleural, que es el espacio entre el revestimiento
de la parte externa de los pulmones (pleura) y la pared torcica.
Anlisis macroscpico:
Su aspecto normal suele ser ambarino claro o con una leve turbidez asociada
al grado de contenido celular o de triglicridos. El lquido puede ser de color
amarillento transparente, turbio por su contenido elevado de clulas, hemtico
por la presencia de hemates o quiloso por aumento de grasas en forma de
triglicridos.
2
7
Equipo:
Microscopio
Centrifuga
Cmara de Neubauer
Material:
Cubre Hematimetro
Portaobjetos
Aceite de inmersin
Capilares
Laminero
Reactivos:
Solucin salina
Colorante de Wright
Tcnica:
2.- Colocar una gota de Liquido en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre
hematimetro.
x.
solucin salina.
6.- Realizar tincin de Wright, para morfologa celular
Anlisis bioqumico:
El estudio bioqumico puede ser muy amplio pero en general es suficiente la
valoracin de pH, protenas, glucosa, urea, amilasa, LDH y colesterol. Cuando
se presume un quilotrax es conveniente medir los triglicridos.
2
8
LIQUIDO ASCITIS
INTRODUCCIN:
La ascitis causada por el cncer se llama ascitis maligna y es el tipo que afecta
al 10 % de las personas con ascitis. La ascitis maligna ocurre con mayor
frecuencia en personas con cncer de mama, colon, tubo digestivo (estmago
e intestinos [en ingls]), ovario, pncreas y tero (en ingls).
FUNDAMENTO:
El lquido asctico, tambin denominado peritoneal, es un fluido que se acumula
en la cavidad peritoneal normalmente debido a la existencia de cirrosis
heptica y con menor frecuencia secundaria a patologas malignas. La cavidad
peritoneal contiene los rganos abdominales y las membranas serosas que a
recubren se denominan peritoneo y son las ms extensas del organismos.
OBJETIVO:
Es una prueba de laboratorio para examinar el lquido que se ha acumulado en
el rea del abdomen que contiene los rganos gastrointestinales, un rea
denominada espacio peritoneal.
Anlisis macroscpico:
En general un lquido asctico no patolgico es transparente. Un aspecto turbio
o purulento indica la presencia de abundantes leucocito. Los lquidos con
recuentos de leucocitos inferiores a 1000/mm3 suelen ser claros. Por encima
de 50000/mm3 se observa un lquido de aspecto purulento. Una elevada
concentracin de triglicridos da al lquido un aspecto opalescente-lechoso
2
9
Equipo:
Microscopio
Centrifuga
Cmara de Neubauer
Material:
Cubre Hematimetro
Portaobjetos
Aceite de inmersin
Capilares
Laminero
Reactivos:
Solucin salina
Colorante de Wright
Tcnica:
2.- Colocar una gota de lquido de ascitis en la cmara de Neubauer, cubrir con
el cubre hematimetro.
x.
solucin salina.
6.- Realizar tincin de Wrigth, para morfologa celular
Anlisis bioqumico
Glucosa, Protenas, LDH, Amilasa, Albmina.
3
0
BIBLIOGRAFIA:
.wikipedia.org/wiki/Tincion de Wright
.bescience.com/hycel/buffers-53/1317-buffer-de-fosfato-ph-6-4-para-wright
INSTITUTO DE HEMATOPATOLOGIA, Especialidad en Hematolgia
Diagnostica por Laboratorio, Manual de Tcnicas.
ANALISIS CLINICOS DE BEATRIZ BAYONA , Pg. 695 - 704 .
Kolman and Ronh Bioqumica Texto y Atlas 3a. Ed. Revisada yAmpliadaEd
Panamericana (2004)
Susan king strasinger. 2007. Lquidos corporales y
anlisis de orina. Editorial el manual moderno
3
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