Prctica #1 Permeabilidad de las membranas celulares

Objetivo. Observar el fenmeno de la Hemlisis y explicarlo en diferencias de Osmolaridad entre el interior y exterior de la clula, as como aprender a simple vista cuando se puede presentar esta situacin. Comprobar que la Osmolaridad no depende la concentracin de las partculas, sino del nmero de partculas osmticamente activas. Determinar la relacin que existe entre el coeficiente de particin y la permeabilidad de la membrana.

Mtodo Para la realizacin de la prctica necesitamos obtener una suspensin de glbulos rojos, los cuales fuimos a utilizar durante el desarrollo de sta. En un tubo de ensayo, colocamos una solucin salina de NaCl 0.15 M, junto con 6 gotas de sangre. 1.- En la primera parte agregamos 5 gotas de sangre cuidadosamente con un gotero a 2 tubos de ensaye, ambos con diferentes concentraciones, una solucin salina, y la otra de agua destilada. El objeto de esto con el fin de poder distinguir en cul de ambos tubos se produjo Hemlisis. 2.- En el segundo experimento el fin fue calcular la Osmolaridad necesaria para que se detenga la smosis en 5 concentraciones diferentes de 3 diferentes compuestos: NaCl, CaCl 2 y Sacarosa (C12H22O11). Tomamos el tiempo transcurrido el diferenciar dnde se produjo Hemlisis, y saber en qu depende la concentracin para que este efecto se produjera. 3.- En el tercer experimento se colocaron 5mL de de glicerol y 5 mL de sacarosa 0.3 M en diferentes tubos con 5 gotas de nuestra suspensin para observar la actividad osmtica de sustancias no difusibles 4.- Se colocaron 5mL de cada una de estas soluciones: Alcohol metlico, alcohol etlico y alcohol proplico en tubos de ensayos diferentes aadindoles 5 gotas de nuestra suspensin de glbulos rojos a cada uno y se midi el tiempo en el que ocurri la hemolisis total para checar la velocidad de difusin.

Resultados

1.- Al haber agregado las 5 gotas de la disolucin de glbulos rojos en ambos tubos, observamos que en el tubo que contena agua destilada, los glbulos rojos sufrieron Hemlisis, esto lo sabemos ya que el tubo tena una apariencia casi translcida lo que quiere decir que al estar en una solucin hipotnica, el agua entr a los glbulos a travs de la membrana para compensar la diferencia de potencial, al hacer esto los glbulos explotaron debido al exceso de agua dentro de ellos, mientras que en el otro tubo se vea turbio lo cual demuestra que los glbulos en la solucin salina (hipertnica), debieron haber sufrido una deshidratacin, ms no hubo Hemlisis en ellos. 2.- Actividad osmtica de sustancias no difusibles.

Si comparamos cada solucin con igual concentracin de las 3 soluciones observamos que en cuanto mayor sea el coeficiente de particin (mas partculas osmticamente activas existan) en una solucin la osmolaridad aumenta NaCl

tubo 1 2 3 4 5

ml de NaCl 0.15 M 5 2 1.5 1 0.5

ml de H2O destilada 0 3 3.5 4 4.5

Concentracin final (M) 0.15 0.06 0.045 0.03 0.015

Osmolaridad (G=1.8) 0.29495268 0.11798107 0.0884858 0.05899054 0.02949527

CaCl2

tubo 1 2 3 4 5

ml de CaCl2 0.15 M 5 2 1.5 1 0.5

ml de H2O destilada 0 3 3.5 4 4.5

Concentracin final (M) 0.15 0.06 0.045 0.03 0.015

Osmolaridad (G=2.6) 0.42604276 0.1704171 0.12781283 0.08520855 0.04260428

Sacarosa

tubo 1 2 3 4 5

ml de sacarosa 0.15 M 5 2 1.5 1 0.5

ml de H2O destilada 0 3 3.5 4 4.5

Concentracin final (M) 0.15 0.06 0.045 0.03 0.015

Osmolaridad (G=) 0.1638626 0.06554504 0.04915878 0.03277252 0.01638626

3.- Actividad Osmtica de sustancias difusibles En el tubo que contena glicerol se observ que hubo hemolisis, ya que la solucin fue translucida En cambio el tubo que contena la solucin de sacarosa 0.3 M se not turbio por lo que se deduce que no hubo hemolisis 4.- Velocidad de reaccin Sustancia Alcohol metlico (CH3OH) Alcohol etlico (CH3-CH2OH) Alcohol proplico (CH3-CH2-CH2-OH) Tiempo (s) 7.85 s 6.75 s 5s

Velocidad de difusin
0.18 0.16 0.14 0.12 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 4 4.5 5 5.5 6 Tiempo (s) 6.5 7 7.5 8 Coeficiente de particin

Conforme aumenta el coeficiente de particin de las sustancias, el tiempo en que ocurre la hemolisis total es cada vez menor