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INFORME DE LABORATORIO NÚMERO 8

PRÁCTICA No. 09
FRAGILIDAD OSMOTICA DE LOS ERITROCITOS

PRESENTADO POR:
PAUL ANDERSON MAURICE ORTIZ TORRES
CRISTIAN YAMID ENRIQUE MOSSO ARIAS
VALENTINA DE LA ROSA PAEZ AVELLA

PRESENTADO A:
DOCENTE: CESAR M. BARACALDO

Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia


Facultad Ciencias de la Salud
Primer semestre
Medicina
INTRODUCCIÓN:

Este laboratorio es importante para realizar diagnóstico cualitativo y cuantitativo de


sangre que presente hemolisis o no. Para esto es necesario entender la relevancia
de presión osmótica, solución hipotónica, membrana celular y cómo se comporta a
cambios de concentración salina, también a cambios de presión osmótica. Para
analizar los eritrocitos y su comportamiento a cambios de lo anterior mencionado.

RESUMEN:

Las células son susceptibles a cambios provocados por el medio en el que se


encuentran por lo general es una concentración acuosa el ingreso de la misma o
salida de ella a la célula produce estos cambios en ellas, en esta ocasión hablamos
de eritrocitos, cuando estos están en contacto con una solución hipotónica,
son rehidratados y cuando la hipotonicidad es muy baja, se produce hemolisis;
por lo contrario al estar en un medio hipertónico, se deshidratan dependiendo de la
cantidad de soluto llegando a crenarse.

ABSTRACT:

The cells are susceptible to changes provoked by the medium in which they are
found, it is generally an aqueous concentration, the entry of it or its exit to the cell
produces these changes in them, this time we speak of erythrocytes, when these
are in contact with a hypotonic solution, they are rehydrated and when the
hypotonicity is very low, hemolysis occurs, on the contrary when being in a
hypertonic medium, they dehydrate depending on the amount of solute getting to be
cured.

MARCO TEÓRICO:

La célula está rodeada por una membrana, denominada "membrana plasmática".


La membrana delimita el territorio de la célula y controla el contenido químico de la
célula. En la composición química de la membrana entran a formar parte lípidos,
proteínas y glúcidos en proporciones aproximadas de 40%, 50% y 10%,
respectivamente. Los lípidos forman una doble capa y las proteínas se disponen de
una forma irregular y asimétrica entre ellos. Estos componentes Presentan
movilidad, lo que confiere a la membrana un elevado grado de fluidez. Los eritrocitos
son células sin núcleo, bicóncavos (esta forma facilita su función de intercambio) y
son los encargados de transportar el oxígeno en la sangre. El eritrocito presenta,
entre otros, a la Hemoglobina (Hb) encargada del transporte de oxígeno y de dar la
tonalidad rojiza característica de este tipo de células. La célula presenta una
membrana semipermeable la cual permite el paso de solventes y solutos de acuerdo
a una gradiente (de menor concentración a mayor concentración). Resistencia
Globular: La cual es una propiedad de los eritrocitos de conservarse sin ningún
cambio ante determinadas sustancias, las cuales tienden a destruirlos (hemolisis y
cremación). Se usa una solución hipotónica debido a que esta presenta una
concentración iónica menor al citoplasma celular por lo cual la célula (eritrocito)
tiende a absorber agua de la solución, el paso de agua al interior de la célula esta
mediado por unas proteínas llamadas acuaporinas. Debido a que la célula ha
absorbido agua esta se hinchara hasta el punto en el que estalla y se produce la
Hemolisis, la Hb es liberada por los poros de la membrana lo cual le dará una
coloración rojiza a la mezcla. (1)

Además, la presión osmótica puede definirse como la presión que se debe aplicar
a una solución para detener el flujo neto de disolvente a través de una membrana
semipermeable. (2). Cuando se colocan soluciones de distinta concentración,
separadas por una membrana semipermeable (membrana que deja pasar las
moléculas de disolvente pero no las de los solutos), las moléculas de disolvente,
pasan habitualmente desde la solución con menor concentración de solutos a la de
mayor concentración. Este fenómeno recibe el nombre de ósmosis, palabra que
deriva del griego osmos, que significa "impulso". (3)

Para resumir, la presión osmótica, consecuencia de la diferencia inicial de


concentraciones, produce el pasaje de moléculas de solvente, a través de la
membrana, hacia la parte de mayor concentración; de esta manera va disminuyendo
la diferencia de concentración y por lo tanto también la presión osmótica. (4)

PROCEDIMIENTO:

1. Se realizó venopunción a un 2. Se tomaron tres muestras de


estudiante, a este se le sacó sangre venosa. Se observa en la
sangre en dos tubos. FIGURA 1. FIGURA 2 una muestra de sangre.
.

FIGURA 1. Se observa cómo se FIGURA 2. Se observa una muestra


punciona a un estudiante para extraer de sangre contenida en un tubo de
sangre. vacío.
3. Se colocaron 16 tubos de ensayo 4. Se agregó una concentración
en una gradilla sucesivamente y se específica de solución salina al
enumeran en orden ascendente, 0.85% a cada tubo. Se observa en
desde 1 hasta 16. Se observa en la la FIGURA 4. La fórmula de
FIGURA 3. agregación está en el paso 5.

FIGURA 3. Se observa una gradilla FIGURA 4. Se observa la solución


con 16 tubos de ensayo, cada uno salina 0.85%, esta se pipetea a cada
enumerado en orden sucesivo. uno de los 16 tubos.

5. Se agregó una concentración específica de agua destilada a cada tubo, esto se


hace en orden ascendente. El tubo 1 empieza con 1.2ml de concentración. La
fórmula de agregación es x=n+0.2ml, donde x es el tubo sucesivo va a tener
0.2ml más concentración que el tubo anterior que es n. En la solución salina esta
fórmula cambia a x=n-0.2ml. Se explica en la descripción de la FIGURA 5.

FIGURA 5. Se observa pipeteo de


agua destilada hacia los tubos
enumerados desde 1 hasta 16, donde
cada uno tiene un volumen de agua
destilada diferente. Un ejemplo es, en
el tubo 1 hay 1.2ml de agua destilada,
en el tubo 2 hay 1.4ml, en el tubo 3 hay
1.6ml, así sucesivamente hasta llegar
a 4.2ml.
Esto aplica para el paso 4, solo que en
ese paso, el volumen empieza desde
3.8ml y es en orden descendente,
siendo el tubo 1 con 3.8ml de solución
salina de 0.85%, el tubo 2 con 3.6ml,
el tubo 3 con 3.4ml y así
sucesivamente hasta llegar a 0.8.
6. Se agrega a cada tubo 0.2ml de 7. Las gradillas que tienen los tubos
sangre desde el tubo 1 hasta el se dejaron reposar a temperatura
tubo 16, de las 2 series. Se ambiente durante 30 minutos. La
procede a verter cuidadosamente temperatura ambiente en este
cada tubo para mezclar las laboratorio está entre 12°C y 19°C.
sustancias. Se observa este Se observa este proceso en la
proceso en la FIGURA 6. FIGURA 7.

FIGURA 6. Se observa un pipeteo de FIGURA 7. Se observa los tubos


sangre, agregando 0.2ml de sangre a organizados sucesivamente, ya
cada tubo. mezclados y en reposo.
8. Transcurrido el tiempo indicado, se 9. Se colocaron las muestras en el
mezcla su contenido y se espectrofotómetro para obtener los
centrifugan los tubos a 2000rpm resultados. Se colocaron cuántas
durante 5 minutos. Para centrifugar muestras hay, se transloca nuestro
se debe colocar los tubos en la líquido en los tubos de vacío, uno
antípoda de otro tubo, esto para un por uno, hacia una cubeta de
correcto uso. También se debe espectrofotometría, se mete en el
sacar todo objeto adentro que porta cubeta, se tapa y se procedió
pueda colisionar con las muestras a poner los valores de longitud de
e incluso causar daños adentro de onda, luego se anotan los valores
la centrífuga. dados por el espectrofotómetro.

FIGURA 8. Se observa la centrífuga FIGURA 9. Se observa cómo el


abierta. También cómo el profesor profesor inserta una mezcla de sangre
tomó los tubos de centrífuga para su con la solución salina y agua destilada
posterior centrifugado. en la cubeta de espectrofotometría
RESULTADOS:

Al colocar las muestras en el espectrofotómetro se obtuvieron los siguientes


resultados:

TUBO RESULTADO TUBO RESULTADO


1 0.020 1 0.055
2 0.122 2 0.037
3 0.091 3 0.063
4 1.043 4 0.700
5 2.269 5 0.701
6 3.337 6 1.220
7 3.541 7 3.511
8 3.444 8 3.475
9 3.407 9 3.522
10 3.124 10 3.536
11 3.374 11 3.580
12 3.398 12 3.562
13 3.404 13 3.587
14 3.422 14 3.603
15 3.070 15 3.627
16 3.449 16 3.553

TABLA 1. Es una tabla de datos de la TABLA 2. Es una tabla de datos de la


primera gradilla y se puede observar segunda gradilla y se puede observar
que desde el tubo 1 hasta el tubo 16 que desde el tubo 1 hasta el tubo 16
hay un aumento directamente hay un aumento directamente
correlacionado. correlacionado.

Se pueden observar ciertos desfases, en el resultado en los tubos 6, 7, 8, 9 y 10 de


la TABLA 1. También existen desfases en la TABLA 2 en los tubos 2, 7 y 16. Esto
se debe a un fallo de volumen agregado de cada sustancia a nuestra mezcla,
haciendo una variación del resultado práctico (basándose en el resultado teórico),
ya que los resultados parecen ser directamente correlacionados, pero hay ciertos
resultados (ya mencionados) donde ocurre una ruptura de esta pendiente
observada.

Se observó que entre más aumenta la concentración de agua destilada y


disminución de solución salina 0.85%, ocurre un aumento de presión osmótica, es
decir, un aumento de la diferencia de concentración, esto quiere decir que en orden
ascendente de enumeración, se encuentra más hipotónica las muestras, haciendo
que ocurra hemolisis, terminando en un análisis macroscópico de una muestra con
poco color rojo (eritrocitos que presentan hemolisis).
DISCUSIÓN:

Los resultados obtenidos nos indican que la hemolisis está sujeta a la concentración
de cloruro de sodio presente en la solución. Cuando el eritrocito se encuentra en
una solución hipotónica necesita obtener un solvente para equilibrar el balance
intracelular de líquido por lo cual se ve obligado a absorber agua del exterior, en
este caso la solución formada con agua destilada y cloruro de sodio (NaCl), por lo
cual ocurrirá la hinchazón y posterior destrucción del eritrocito (hemolisis). (1)

¿Qué otros factores intervienen en la hemolisis?

La fragilidad osmótica del eritrocito depende de características tales como la edad


de la célula, su tamaño, forma y las demás condiciones propias de la estructura
interna de la célula. Además de estos factores también pueden producir hemolisis
enfermedades congénitas, genéticas y/o adquiridas. (5)

¿Qué errores y limitaciones afectarían los resultados de la hemolisis en los


hematíes?

La mala preparación de las soluciones salinas, el mal uso y medición de los


instrumentos de medida, así como la incorrecta manipulación de los equipos como
la centrifuga pueden llevar a la obtención de registros erróneos en nuestros
resultados.

La subjetividad del sujeto que observa los resultados cualitativos es un factor


condicional en la obtención de resultados y gracias al espectrofotómetro hemos
podido obtener los resultados de manera precisa. En cuanto a las limitaciones que
hemos tenido en la práctica es en cuanto a los tiempos de reposo de las muestra.
Estas fueron periodos muy largos debido a que para centrifugar se tuvo que esperar
mucho tiempo, más de lo indicado en la guía porque sólo se empleó una centrífuga.
(6)

También, es importante recalcar que, un paciente que tiene una hidratación


hipotónica (seguido de un problema renal que no permita la correcta absorción o
excreción de agua), puede presentar hemolisis (por diferencia de presión osmótica,
causando que eritrocitos tiendan a hincharse), esto puede causar un aumento de
bilirrubina, producida por la degradación de eritrocitos que sufren hemolisis,
provocándole ictericia, esto se puede diagnosticar preguntando la dieta del paciente
y mirando su color de piel, si es amarillo, es posible. Aunque esto es verdad, lo más
común puede ser la anemia hemolítica. Cabe aclarar que la ictericia no solo se
produce por esta razón anteriormente mencionada (ictericia prehepática), sino que
puede ser también por razones hepáticas o posthepáticas. (7)
CONCLUSIONES:

Se puede concluir que:

La prueba de Fragilidad Osmótica es un test que ayuda a determinar, la


susceptibilidad de los eritrocitos a deformaciones, descubriendo la capacidad del
glóbulo rojo en absorber agua son explotar, probada con diferentes concentraciones
de solución salina.
El test puede realizarse por investigación médica de salud, sospecha de
enfermedad o toxicidad, de igual manera para determinar la efectividad de ciertos
medicamentos.
Este test tiene un papel importante en la identificación de ciertas enfermedades,
donde la más recurrente es la esferocitosis, aunque el incremento en la fragilidad
es una propiedad de la forma relativamente esferoide de la célula y es independiente
de la causa de la esferocitosis, aunque conociendo las concentraciones de la
solución a la que se expone los glóbulos rojos, se determina con veracidad la
presencia de esta enfermedad o de algún otro padecimiento.
Existen otras pruebas que se basan en principios similares, como el test de
autohemolisis, la lisis en glicerol acidificado o el estudio de la deformabilidad
eritrocitaria.

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué es fragilidad osmótica?

R/ Susceptibilidad de los eritrocitos a la hemólisis cuando se exponen


crecientemente a una solución salina hipotónica. El agua penetra en el interior del
eritrocito que se hincha, hasta que la capacidad de la membrana celular se
sobrepasa y estalla. Esta prueba se utiliza en el diagnóstico de anemia hemolítica.
(8)

2. ¿Qué es osmolaridad?

R/ La osmolaridad es la medida para expresar la concentración total (medida en


osmoles/litro) de sustancias en disoluciones usadas en medicina. El prefijo "osmo-"
indica la posible variación de la presión osmótica en las células, que se producirá al
introducir la disolución en el organismo. (9)

3. ¿Qué importancia clínica tiene la fragilidad osmótica?

R/ Este examen descubre la capacidad de glóbulos rojos en absorber el agua sin


explotar. Esto es usado para evaluar y manejar desórdenes de la membrana del
glóbulo rojo Es un examen de sangre para detectar si hay mayor probabilidad de
que los glóbulos rojos se descompongan. (10)
REFERENCIAS:

1. Membrana [Internet]. Lsprogram.esy.es. 2006 [cited 19 June 2019]. Available


from: http://lsprogram.esy.es/cdbiologia/membrana.html

2. Voet D, Voet J, Pratt C. Fundamentals of biochemistry. New York: Wiley; 2002.

3. Dorland W. Dorland diccionario enciclopédico ilustrado de medicina. 30th ed.


Madrid: McGraw-Hill Interamericana de España; 2005.

4. Presión osmótica [Internet]. Es.wikipedia.org. [cited 19 June 2019]. Available


from: https://es.wikipedia.org/wiki/Presi%C3%B3n_osm%C3%B3tica

5. Yamirka, ALONSO-GELI, et al. Caracterización de la fragilidad osmótica de


eritrocitos humanos en la anemia drepanocítica. Caracterización de la fragilidad
osmótica de eritrocitos humanos en la anemia drepanocítica [Internet]. 2015
[cited 19 June 2019]; 27(2):110-118. Available from:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-
54212015000200001

6. Agós M, Lizarraga R, Gambra D, Marañón A, Orozco C, Díaz E. Factores


relacionados con la hemólisis en la extracción de muestras sanguíneas
[Internet]. Scielo.isciii.es. 2008 [cited 19 June 2019]. Available from:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1137-
66272008000300005

7. Ictericia [Internet]. Es.wikipedia.org. [cited 19 June 2019]. Available from:


https://es.wikipedia.org/wiki/Ictericia

8. ¿Qué es fragilidad osmótica? [Internet]. Cun.es. 2009 [cited 19 June 2019].


Available from: https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/fragilidad-
osmotica

9. Osmolaridad [Internet]. Es.wikipedia.org. 2012 [cited 19 June 2019]. Available


from: https://es.wikipedia.org/wiki/Osmolaridad

10. Becerra Y. Qué Importancia Clínica Tiene La Fragilidad Osmótica [Internet].


Scribd. 2017 [cited 19 June 2019]. Available from:
https://es.scribd.com/document/364312328/Que-Importancia-Clinica-Tiene-La-
Fragilidad-Osmotica