PRÁCTICA 18.

OBSERVACIÓN DE HEMATÍES EN MEDIO

ISOTÓNICO.
I) Fundamento

La membrana plasmática de los eritrocitos -igual que sucede con la de otras células tiene la
propiedad de ser una membrana semipermeable, es decir, que permite la difusión de agua a través de
ella, pero no la de las sales minerales disueltas en el agua. Por el fenómeno de la ósmosis, el agua
tiende a pasar del medio en el que se encuentran las sales más diluidas, al medio en el que se
encuentran más concentradas, hasta igualar la concentración (y por tanto la presión osmótica) de
ambos medios.

Los eritrocitos se encuentran naturalmente en un medio isotónico (con la misma

concentración de sales minerales) que es el plasma sanguíneo. Si los introducimos en un medio
hipotónico (con una concentración salina inferior a la de su citoplasma), el agua tenderá a entrar en el
eritrocito a través de su membrana plasmática para igualar ambas concentraciones, y la célula
reventará. Si, por el contrario, los introducimos en un medio hipertónico (con una concentración de
sales superior a la del eritrocito), el agua saldrá de la célula hasta que se igualen las concentraciones,
y la célula presentará un aspecto arrugado al microscopio.(ver abajo)

II) Material y método

Preparamos una solución salina isotónica con cloruro sódico (sal común) al 9 por 1000
en agua destilada (es decir, 9 g de NaCl en cada 1000 de disolución); una solución salina hipotónica,
sólo con agua destilada; y una solución salina hipertónica, con NaCl al 15 por 1000. Cada una
en un pequeño tubo de ensayo. A continuación, en un TE, hacemos las diluciones:

HIPOTÓNICAS

TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3 TUBO 4 TUBO 5 TUBO 6

Solución I 8,8 7,7 6,6 5,5 4,4 10 (ml)
AD 1,2 2,3 3,4 4,5 5,6 -
[ ] Final 0,8% 0,7% 0,6% 0,5% 0,4% 0,9 %

HIPERTÓNICAS

TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3 TUBO 4 TUBO 5 TUBO 6

Solución H 9,3 8,6 8 7,3 6,6 10 (ml)
AD 0,7 1,4 2 2,7 3,4 -
[ ] Final 1,4% 1,3% 1,2% 1,1% 1,0% 1,5 %

(Resulta conveniente dejar preparada una pequeña botella con NaCl isotónico, es decir al 9
por mil, para acelerar el desarrollo de esta práctica, que puede hacerse en apenas 10-15 min. de clase;
la concentración hipertónica se puede obtener añadiendo una pizca de sal al tubo en el que hayamos
echado previamente la isotónica).

En sendos tubos de hemólisis, diluimos una gota de sangre de la muestra en 5 GOTAS de

cada una de estas disoluciones, y a los 5 min. observamos las muestras al microscopio:

ANOTAR LO OBSERVADO

Sólo en la muestra con solución salina isotónica se verán eritrocitos normales (con aspecto
redondeado).

En la muestra con solución salina hipotónica no veremos nada (pues las células habrán
reventado). Ni siquiera hace falta utilizar el microscopio con esta muestra: se ve que han reventado
todos los eritrocitos porque es la única transparente -lo que demuestra que no hay células en
suspensión- de las tres, aunque sí tenga cierto color sanguinolento debido a la hemoglobina.

En la hipertónica aparecerán los eritrocitos con la membrana plasmática arrugada: algunos

“ahuevados”, otros como si fuesen flotadores “medio-deshinchados” (no olvidemos que los
eritrocitos son más finos por el centro y, al deformarse, se comportan como un flotador que pierde
aire).

Pasado un tiempo, en el fondo de los dos tubos que tenían células enteras (el “iso” y el
“hipertónico”) se verá un puntito de color rojo: los eritrocitos han sedimentado: se puede explicar
esto a los alumnos como el fundamento del hematocrito (% de glóbulos rojos en sangre, que se
calcula en un capilar fino de vidrio en el que se introduce la sangre y se deja reposar: es una práctica
que también se puede hacer si tenemos algún anticoagulante para evitar los “trombos” en el tubo de
cristal).
Efecto de la osmolaridad del medio sobre los eritrocitos. A: en medio isotónico los glóbulos rojos muestran
su forma normal de disco bicóncavo arrosquillado. B: en medio hipertónico sale agua desde los eritrocitos
hacia el medio y éstos adquieren una forma arrugada y con espículas. C: por el contrario, en medio
hipotónico entra agua a las células y los eritrocitos se convierten en globos a tensión que terminan por
reventar (hemólisis). Capturas de vídeos del Chaffey College, que pueden verse en Youtube, vídeo 1 (iso),
vídeo 2 (hiper) y vídeo 3 (hipo).
a) Un medio isotónico posee igual concentración de sales que una célula o el plasma sanguíneo.
Una célula expuesta a este medio, se expone a la entrada y salida de agua en igual magnitud por lo tanto la
celula se encuentra en equilibrio.

b) Un medio hipotónico posee una concentración de sales inferior a la de una celula o del plasma.
Una célula expuesta a este medio, se expone a la entrada de agua desde el medio hacia el citoplasma y la
célula se hincha hasta correr el riesgo de reventar. Este fenómeno se llama "citolisis" y para una célula
sanguínea se llama "hemólisis".

c) Un medio hipertónico posee una concentración de sales superior a la de una celula o del plasma. Una
célula expuesta a este medio, se expone a la salida del agua desde el citoplasma y por lo tanto a una
deshidratación. En el caso de un glóbulo rojo se llama "Crenación".