Hipotesis:

Hipotesis 1. Curva de glucosa Si se sabe que el reactivo DNS reacciona con azucares reductores generando un producto coloreado con que puede ser medido por mtodos espectrofotomtricos, entonces, la intensidad de esta tonalidad ser proporcional a la concentracin en azucares reductores de la muestra, por lo que en una serie de diluciones con concentracin conocida ser posible medir la absorbancia de las mismas, haciendo posible la construccin de una curva patrn.

Hipotesis 2. Curva de albumina

Si se sabe que los iones Cu+2 se unen a protenas, modificando la estructura de la protena y exponiendo residuos fenlicos presentes en ella, y que el reactivo de Folin-Ciocalteau al reaccionar con estos residuos formar un complejo azul intenso, entonces es posible determinar la absorbancia de una serie de muestras con concentracin conocida, donde la concentracin ser proporcional a la intensidad se la coloracin, para luego construir una curva patrn de protenas.

Practica 1 1. Cul es la finalidad de usar una curva patrn? Se construyen con la finalidad de conocer la cantidad de analito presente en una muestra, por lo que una curva patrn se construir a partir de distintas concentraciones conocidas de este analito, cada una con un valor de absorbancia distinto.

2. Porque se utilizo albumina como solucin estok? Se utiliza debido a varias de sus propiedades, es la protena ms pequea y con mayor nmero de grupos cargados negativamente; esta caracterstica le permite migrar con

mayor rapidez. Constituye una banda homognea, puesto que se trata de una nica protena. 3. Que mtodos existen para la determinacin de protena? Los mtodos ms usuales son: - Absorcin en el ultravioleta. - Reaccin del Biuret. - Mtodo de Lowry. - Mtodo de Bradford. - Mtodo del cido Bicincnico. 4. En qu consiste el fundamento del mtodo de lowry? El complejo protena-Cu2+ se hace reaccionar con el reactivo de Folin-Ciocalteu, dando una coloracin azul, con un mximo de absorcin a 650 nm. Esta coloracin se atribuye a la reduccin del cido fosfomolbdico/fosfotngstico a azul de heteropolimolibdeno de composicin no definida, por medio de los residuos tirosilos, triptofanilos, y en menor grado, cisteinilos e histidilos de las protenas que forman el complejo con el Cu2+. 5. Cul es el fundamento del reactivo DNS para cuantificar azucares reductoras? Los azucares reductores al ser altamente reactivos, reaccionan con el DNS y el cido 3,5cidodinitrosaliclico presente en el, provocando la formacin de un complejo coloreado que puede ser medido por mtodos espectrofotomtricos; por lo que la intensidad de la coloracin sera proporcional a la concentracin, y por consiguiente a la absorbancia.