Metabolismo de los microorganismos

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERIA E.A.P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

Curso : Microbiologa General

Profesor

Blgo.Mblgo. Eterio ALVA MUOZ

Tema

METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS

Alumno

Isique Valverde David Rafael

Ciclo

IV

Nuevo Chimbote, 12 de noviembre del 2013

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I. INTRODUCCION : Una de las caractersticas mas importantes de los microorganismos Es la propiedad de crecer. Eventualmente la clula se divide y esa divisin significa duplicacin ordenada de todos los elementos celulares , esta duplicacin garantizada de las caractersticas de una generacin a otra. Para realizar un trabajo qumico tan complicado los microorganismos necesitan captar del exterior sustancias qumicas como los carbohidratos, protenas lpidos, etc; que necesariamente deben ser incorporados a los medios de cultivo. Como fuente de carbono los microorganismos pueden utilizar monosacridos como glucosa, disacridos como sacarosa, maltosa y polisacridos como almidn celulosa , etc. La capacidad de utilizar o no un determinado sustrato dependen de la presencia o no de las enzimas que estn gobernadas genticamente. LA GLUCOSA: La glucosa es un monosacridos que es utilizado por la mayora de microorganismos, cuando es incorporado a un medio de cultivo puede ser metabolizada por diferentes vas metablicas y derivar fcilmente en la produccin de acido y/o gas. La formacin de cado se puede evidenciar adicionando al medio un indicador de pH como el rojo de fenol que en alcalinidad es rojo y en acidez es amarillo .La observacin de gas puede ser observada mediante la acumulacin de gas en tubos invertidos (campana de Durham) que son incorporados en los tubos con medio glucosado.

EL ALMIDON :
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El almidn su polmero de glucosa es usado como fuente de carbono por aquellos microorganismos que tiene la capacidad de hidrolizarlo en sustancias simples y asimilables .Esta capacidad est gobernada genticamente por la sntesis o no de las amilasas que son enzimas producidas solo por ciertos microbios cuando crecen en presencia de almidn . Los microorganismos que producen amilasas y por consiguiente hidrolizan el almidn , se denominan almidn positivo y los que no tienen esa capacidad se denominan almidn negativo. Para determinar si un microorganismo es almidn positivo o negativo, se le siembra en un medio de cultivo con almidn como nica fuente de carbono , y luego de la incubacin se le adiciona iodo (bajo forma de lugol).Cuando el almidn se combina con el iodo se colorea caracterstica de azul .Por lo que un color azul indica presencia de almidn (almidn negativo) y la Aparicio de zonas claras indica ausencia de almidn (almidn positivo). II. OBJETIVOS : Observar e interpretar las diferentes reacciones metablicas de los microorganismos sobre la glucosa y el almidn incluidos en los medios de cultivo. Identificar y diferenciar microorganismos que metabolizan la glucosa con formacin de acido y/o gas. Identificar microorganismos que hidrolizan el almidn y diferenciarlos de aquellos que no lo hidrolizan. III. MATERIALES Y METODOS 3.1 Material : Material biolgico:
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Cultivos puros de ESCHERICHIA COLI, SHIGUELLA sp, SACCHAROMYCES SUBTILIS. Material de cultivo Caldo glucosado Agar almidon CEREVISAE y BACILLUS

Material de vidrio Otros : Lugol Asa bacteriolgica Mechero Tubos de ensayo Palcas petri

IV.

PROCEDIMIENTO : DEGRADACION DE LA GLUCOSA :

A tres tubos contenidos con clado glucosado colocar campan de durham invertida y sembrar por separado E. coli ,Shiguella y Pseudomonas sp.

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Incubar a 37c / 24h Observar la degradacin de la glucosa con la formacin de cado mediante viraje a amarillo del indicador rojo fenol

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Observar la degradacin de la glucosa con formacin de gas de la campana de Durham.

DEGRADACION DEL ALMIDON:

A conteniendo agar almidn sembrar por punta Bacillus subtillis y Saccharomyces cerevisiae.

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V.

RESULTADOS :

La formacin de cido se puede evidencir adicionando al medio un indicador de ph puede ser de fenol que en alcalinidad es rojo y en acidez es amarillo. Por que el color azul indica presencia de almidn (almidn negativo) y la aparicin de zonas claras indica la ausencia de almidn (almidn positivo).

VI.

CONCLUSIONES

Las pruebas bioqumicas consisten en distintos test qumicos aplicados a medios biolgicos, los cuales, conocida su reaccin, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.

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Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una via metablica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioqumicas se dispone de multiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De la amplia variedad de pruebas bioqumicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de microorganisos. Adems estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos grupos de trabajo de nuestro laboratorio. VII. CUETIONARIO :

1. Todos los microbios usan glucosa ?

La mayora de las bacterias de inters mdico usan la glucosa como fuente de carbono, como parte importante de su metabolismo. Se determina si la bacteria usa la glucosa produciendo cido y/o gas a partir de dicho carbohidrato. En un tubo con agua peptonada al 1% tapado, y un tubo de Durham, se inocula la bacteria por agitacin teniendo cuidado de no mover el tubo de Durham e incubndolo 24 horas y 37C se obtienen los siguientes resultados.Si la bacteria usa la glucosa producir cido y/o gas, por lo tanto el agua peptonada se observar rosa, si produce gas, se observar una burbuja en el tubo de Durham. Ejemplos:

cido y gas a partir de la glucosa: Escherichia coli Negativo a produccin de gas: Proteus stuartii.

2. Qu sucedera sino se adiciona el indicador al caldo glucosado? Cuando el Lugol (indicador) se encuentra con la glucosa produce un cambio de color, si se produce una zona clara quiere decir que el almidn
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a sido degradado entonces al no agregar el indicador al caldo glucosado no podramos observar la degradacin de la glucosa con la formacin de cido.

3. Qu son las amilasas? La amilasa, denominada tambin sacarasa o ptialina, es

un enzima hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente -Amilosa al digerir el glucgeno y el almidn para formar azcares simples, se produce principalmente en las glndulas salivales (sobre todo en las glndulas partidas) y en el pncreas. Tiene actividad enzimtica a un pH de 7. Cuando una de estas glndulas se inflama, como en la pancreatitis, aumenta la produccin de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia). Fue la primera enzima en ser identificada y aislada porAnselme Payen en 1833, quien la bautiz en un principio con el nombre de "diastasa". Sirve en el diagnstico de enfermedades determinando sus niveles en plasma para saber si se puede producir una pancreatitis. Sus niveles pueden estar elevados por un dao a las clulas productoras de la enzima en el pncreas, o bien, por una deficiencia renal (excrecin reducida) o tambin por paperas. Las enzimas amilasas son empleadas en la fabricacin de pan para romper azcares complejos como el almidn (presente en la harina) en azcares simples. La levadura puede entonces alimentarse de esos azcares simples y convertirlos en productos de fermentacin alcohlica. Este proceso da sabor al pan y hace elevar la masa. Las clulas de la levadura contienen amilasas pero necesitan tiempo para fabricar la suficiente cantidad para romper el almidn. Este es el motivo de la necesidad de largos tiempos de fermentacin (especialmente para determinadas masas). Las tcnicas modernas de elaboracin de masas incluyen la presencia de amilasas para facilitar y acelerar estos procesos.Algunas

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amilasas bacterianas se emplean como detergentes para disolver almidones en determinados procesos industriales. En la maduracin de frutas la amilasa es sintetizada en la maduracin, degradando el almidn de las frutas en azcar, y volvindolas ms dulces. 4. Por qu algunos microorganismos no hidrolizan el almidon? Se inocularon con la placa con Agar y almidn al microorganismo, estos fueron uno gram positivo y negativo. El gram negativo Saccharomyces cerevisiae y positivo el Bacillus Cereus, a ambos se le agreg una solucin de lugol, estos despus de haberla incubado a temperatura de 37 C, en ambos lados hubo desarrollo de la placa. La solucin de Lugol se le agrega para observar la reaccin de ambos microorganismos y la capacidad que estos microorganismos tienen para producir una enzima que hidrolice al almidn. La observacin fue que el bacilo cereus fue resistente al colorante o sustancia y pudo hidrolizar al almidn formndose un halo transparente alrededor del almidn. Mientras que el Saccharomyces cerevisiae no reaccion con la sustancia agregada (lugol) y por ser gram negativo, son susceptible a este tipo de solucin, por lo tanto no hidroliz.

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