Coloracin FIELD

Juego de soluciones para la coloracin rpida de FIELD

Coloracin para hemoparasitos uso en microscopa

PRINCIPIO
La coloracin de FIELD es una coloracin acuosa basada en la
coloracin de Romanovsky que consiste en dos soluciones
(Solucin A y Solucin B) y una solucin tampn (amortiguadora).
La coloracin de FIELD es una coloracin rpida para la
identificacin de Hemoparasitos.
El tpico color de los ncleos celulares, mayoritariamente rojo
prpura, se basa en la interaccin molecular entre eosina y un
complejo azur A- ADN. La intensidad de la coloracin depende
del contenido de azur A y de la relacin entre azur A y eosina
amarilla. El resultado de tincin puede ser influido por diferentes
factores como el valor del pH de la solucin y de la solucin
tampn, las substancias tampn (amortiguadores), el tiempo de
tincin y la fijacin.

MUESTRAS
Se deben usar lminas nuevas y prelavadas con alcohol de 96%
para quitar la grasa.
Se limpia el dedo del paciente con Alcohol, y deja secar.
Se realiza la puncin, la primera gota se descarta y con la lmina
se recoge una sola gota. (No se debe tocar la piel con la lmina).
Con la ayuda de otra lmina se hace un extendido delgado y
corto.

CONTENIDOS

1.

Sumrjase el portaobjeto de 1 a 3 segundos en la

SOLUCIN A. Escurra sobre un papel.

2.

Introduzca suavemente en AGUA AMORTIGUADORA 3

segundos. Escurrir.

3.

Sumrjase de 1 a 4 segundos en SOLUCIN B. Escurrir.

4.

Introduzca en AGUA AMORTIGUADORA 3 segundos.

Escurrir.

5.

Se seca a temperatura ambiente.

Toda muestra biolgica debe se considerada como

potencialmente infecciosa.
PROCEDIMIENTO
La lamina con el extendido debe estar completamente seca, y se
procede de la siguiente manera:

SOLUCION A -Listo para su uso

Azur A R.A.
Azul de metileno R.A.
Di-sodio hidrogenofosfato anhidro R.A.
Potasio Di-hidrogenofosfato R.A.
Agua desmineralizada tipo II

1 g/l
1.6 g/l
10 g/l
13 g/l
1l

SOLUCION B -Listo para su uso

Eosina Amarillente R.A.
Di-Sodio hidrogenofosfato 12 H2O R.A.
Potasio Di-hidrogenofosfato R.A.
Agua desmineralizada tipo II

2 g/l
10 g/l
13.g/l
1l

RESULTADO

AGUA AMORTIGUADORA -Listo para su uso

Di-Sodio hidrogenofosfato 12 H2O
Potasio Di-hidrogenofosfato
Agua desmineralizada tipo II

14.02 g/l
3.522 g/l
1l

Tipo de clula
Parsitos sanguneos
Linfocitos

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Las soluciones deben almacenarse entre 15C y 30C y

protegidos de la luz. Despus de abierto el contenido
almacenado entre 15C y 30C y protegidos de la luz es
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

Temperaturas inferiores a 15C puede precipitar co lorantes

de las soluciones colorantes.

Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.

Monocitos
Granulocitos neutrfilos

Granulocitos eosinfilos

Granulocitos basfilos

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

La solucin R1 Solucin A y la solucin R2 Solucin B son

irritantes en contacto con piel, ojos y mucosas.

Observe la simbologa en los rtulos de las soluciones.

Las soluciones usadas y las caducadas deben eliminarse

como desechos especiales, debiendo cumplir las
regulaciones locales para el desecho de compuestos
peligrosos.
MATERIALES
ADICIONALES
SUMINISTRADOS
Microscopio

Portaobjetos
Jarras para tincin

REQUERIDOS

Trombocitos (Plaquetas)
Eritrocitos

Resultado
ncleo rojo
citoplasma del protozoario azul
ncleo azul violeta
citoplasma azul
ncleo (lobulado) azul violeta
citoplasma azul claro
ncleo azul oscuro
citoplasma rosa plido
grnulos tono rosado a azul claro
ncleo azul
citoplasma rosa plido
grnulos rojo ladrillo
ncleo purpura a azul oscuro
grnulos azul oscuro-negros
Azul
rojizo

CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad en la microscopia de extendidos sanguneos
depende directamente de la formacin y experiencia del
profesional que validara la calidad de los extendidos, coloracin,
etc.
El control debe realizarse incluyendo en cada proceso un
portaobjetos de control positivo.

NO

Frasco lavador
Cubeta de tincin
Cronometro y/o timer

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NOTAS SOBRE EL EMPLEO

Los procedimientos de tincin indicados en el presente inserto

han dado resultados satisfactorios en nuestros laboratorios.
Las preferencias de color individuales pueden precisar ligeros
ajustes de los tiempos.

BIBLIOGRAFA
1. Hematology: Principles and Procedures, Sixth Edition, Brown AB, Lea & Febiger,Philadelphia
1993 p101
th
2. Clark, George, Stains and staining (Microscopy), 4 edition, Williams & Wilkins, (1981).
3. Moody A.H and Fleck S.L.(1985) Versatile Field's stain; J. Clin Pathol 38(7); 842-3

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