TEMA 1

Introducción. Conceptos de Biotecnología y de

Ingeniería bioquímica. Etapas de un proceso
biotecnológico. Aplicaciones de procesos
biotecnológicos en industrias y servicios. Bio-reactor.
Factores que influyen en el diseño y la operación de un
bio-reactor. Estequiometría y cinética microbiana.
Aspectos termodinámicos del crecimiento. Eficiencia
energética. Rendimientos.
 Ingeniería Bioquímica

La Ingeniería Bioquímica (o de las

reacciones bioquímicas) combina las
ciencias biológicas con las ciencias de la
ingeniería (Ing.química, Ing. Alimentos, etc.).
El trabajo de un Ingeniero Bioquímico es el
análisis ingenieril de un sistema biológico y
luego la construcción racional del proceso a
escala industrial.
El rol del ingeniero bioquímico se ha vuelto
más importante en los últimos años, debido
al importantísimo desarrollo de la
biotecnología.
Biotecnología: “técnicas que utilizan organismos vivos, o sustancias
de esos organismos, para formar o modificar productos, incluyendo
las técnicas usadas para el mejoramiento de las características de
plantas y animales económicamente importantes y para el desarrollo
de microorganismos que actúan en el medioambiente”.

Es una actividad multidisciplinaria que comprende la aplicación de los

principios científicos y de la Ingeniería al procesamiento de materiales por
agentes biológicos, para proveer bienes y servicios.

Agentes biológico: células (microbianas, animales, vegetales) y enzimas.

Bienes: cualquier producto industrial relacionado con alimentos, bebidas,

productos medicinales, etc.

Servicios: tratamiento de efluentes y residuos, recuperación de suelos

contaminados, etc.
Esquema general de un proceso biológico típico

Cultivo Stock Materias primas

Formulación del medio

Frascos agitados

Esterilización
Fermentador de
inóculo

Recuperación de
productos Purificación
Tratamiento de
efluentes
PRODUCTO
Ventajas
• Condiciones suaves de trabajo
• Especificidad
• Efectividad
• Fuentes renovables
• Tecnología de DNA-recombinante
• Altos rendimientos en algunos productos (Ejemplo: 100% de
conversión de glucosa en ácido glucónico)

Desventajas
• Mezclas complejas de producto
• Ambientes acuosos diluidos
• Contaminación
• Variabilidad
Bio-reactor o Unidad de Fermentación
Para llevar a cabo un bioproceso en gran escala, los
ingenieros bioquímicos necesitan trabajar junto con
otros científicos biológicos:
 Para obtener el mejor catalizador biológico
(microorganismo, células animales, células vegetales, o
enzimas) para un proceso determinado.
 Para crear el mejor ambiente posible para el desempeño
del catalizador, por medio del diseño del bio-reactor y su
operación en la forma más eficiente.
 Para separar el producto deseado desde la mezcla de
caldo fermentado, en la forma más económica.
Entonces, para el diseño y el desarrollo del
proceso se debe saber:

 Los cambios que pueden ocurrir (reacciones y

fenómenos de transporte).
 Las velocidades de esos cambios.
 Las posibilidades de operación y control para obtener
rendimientos apropiados.
 Las posibilidades para separar el producto, con la
pureza requerida y a costos razonables.
 Los aspectos ambientales relacionados con los
procesos que se emplea.
Factores que influyen en el diseño y
la operación de un bioreactor

• Selección del microorganismo.

• Influencia de las características

microbianas sobre el diseño del
bioreactor.
 Criterios de Selección de
Microorganismos para Uso Industrial
1. La cepa a utilizar debe ser genéticamente estable.
2. Su velocidad de crecimiento debería ser alta.
3. La cepa debe estar libre de contaminantes.
4. Sus requerimientos nutricionales deberían ser satisfechos a partir de
medios de cultivo de costo reducido.
5. Debe ser de fácil conservación por largos períodos, sin pérdida de
sus características particulares.
6. Debería llevar a cabo el proceso fermentativo completo en un
tiempo corto.
7. Si el objetivo del proceso es un producto, el proceso debería ser
de alto rendimiento en ese producto y de fácil extracción del
medio de cultivo.
Las células usadas a escala industrial, se obtienen
generalmente por aislamiento a partir de fuentes naturales
(muchas de ellas han sido mejoradas a través de técnicas
clásicas de mutación o de ingeniería genética) o de una
colección de cultivos.

– ATCC (American Type Culture Collection), USA, mantiene

bacterias, levaduras, algas, actinomycetes, mohos, protozoos,
virus y líneas celulares;

– Colletion Nationale de Cultures de Microorganismes del

Institut Pasteur, Francia;

– NRRL (Northern Regional Research Laboratory), de Peoria,

USA,
– National Collection of Type Cultures, Londres, Inglaterra.

• Para uso industrial:

cada firma posee su propia colección de organismos, o sólo son
empleados por la industria que los posee (patentes, royalty)
Influencia de las
características microbianas sobre el diseño del bioreactor

 características y forma del

crecimiento celular (unicelular  Propiedades reológicas (viscosidad
o multicelular). y esfuerzo de corte)
 Demanda de O2  Mezclado
 Velocidad de multiplicación  Suministro de O2
 PH  Control de pH y T
 T  Control de espuma
 Composición del medio de  Luz
cultivo
 Sistema de esterilización y
 Fotosintetizantes mantenimiento de la esterilidad
 Producción de espuma  Protección/mantenimiento del
 Esterilidad producto
 Organismos recombinantes
 Características de los
productos
 Proceso biotecnológico
Medio

Analizador de gases

Inóculo

Unidad de
Control

Aire

Tratamiento de Productos
residuos
La operación y el control de un bioproceso
requiere en primer lugar, la identificación
del sistema biológico, es decir, la
individualización de las reacciones
biológicas intervinientes y la
determinación de su cinética.
 Estequiometría y cinética microbiana

Células + F. de C + F. de N + F. deO2 +… 

más Células + Productos + H2O + CO2

Composición elemental promedio de células microbianas

(composición estándar)

% (p/p)
• C 46,5 “fórmula mínima”
C H1,80O0,5N0,2
• H 6,94
• 0 31,0
• N 10,85
• Sales 5
Importante: la composición elemental promedio se mantiene
prácticamente constante, pero la concentración intracelular de proteínas,
RNA y demás constituyentes celulares puede variar sensiblemente entre
diferentes especies e incluso entre diferentes estadíos del cultivo de un
mismo microorganismo.
 1 C-mol de biomasa: la cantidad de
biomasa que contiene 1 átomo gramo de
C. “fórmula mínima”: C H O N 1,80 0,5 0,2

12  1,79  16x 0,5  14x 0,2

1 C - mol de biomasa = = 25,8 g
0,95
1 C-mol de fuente de carbono y energía; 1 C-mol de fuente de N, etc.
Ej.: glucosa (C6H12O6): 1 C-mol de glucosa CH2O, pesará 30 g,
etanol: (C2H6O1,) 1 C-mol de etanol (CH3O0,5), pesará 23 g.
 Grado de reducción
El grado de reducción, , es una medida de cuan reducido está un compuesto.
Cálculo de : plantear la ecuación de oxidación para 1 C-mol del compuesto y contabilizar la
cantidad total de electrones que fueron tomados por el O2.
Nivel de referencia: I) CO2, H2O y NH3.
II) CO2, H2O y N2.

Ejemplos: I) II)
•C + O2 C O2 =4 4
•CH4 + 2 O2  C O2 + 2H2O =8 8
•CO + 0,5 O2  C O2 =2 2
•CH2O + O2  C O2 + H2O =4 4
•CH3O0,5 + 1,5 O2 C O2 + 1,5 H2O =6 6
•CH2,5ON0,5 + 0,75 O2  C O2 + 0,5 H2O + 0,5 NH3 =3 4,5
•C H1,8O0,5N0,2 + 1,05 O2  C O2 + 0,6 H2O + 0,2 NH3  = 4,2 4,8

•CHaObNc, se demuestra fácilmente que:

NH3 = 4 + a - 2b - 3c
La entalpía de combustión de un compuesto
CHaObNc se correlaciona con el valor de N2
según,
H = - 115. N (K Joul / c-mol)
2

el calor de reacción por mol de e- transferidos al

O2 es relativamente constante para la oxidación
de una amplia variedad de moléculas orgánicas.
q0 = 27,5 Kcal/C-mol
 Modelo de caja negra

rs   rx  rw
ro2  rco2
rn   rp  rq

rs CH2O + rn NH4+ + ro2 O2 

rx C H1,80O0,5N0,2 + rp CH2O0,5 + rco2 CO2 + rw H2O +
rh H+ + rq calor

Todos los coeficientes estequiométricos están referidos a 1 C-mol

de FCE
Balance de Carbono: y X/S + y P/S + y CO2/S = 1
Balance de grado
de reducción: S – 4 b = y X/S X + y P/S P

y X/S (X / S )+ y P/S (P / S ) + 4 b / S = 1

 +  +  =1
Puesto que por cada mol de electrones transferidos al 02 se liberan
q o = 27,5 Kcal (o 115 KJ), el calor producido estará dado por:

q= 4 b q0 (K Joul/C-mol fuente de C y E)

Dado que los cultivos se realizan a presión constante, el calor absorbido o

cedido por el sistema estará dado por el cambio de entalpía. De acuerdo
a la ecuación que describe al proceso podemos plantear el siguiente
balance:
rS .H S  rNH 3 .H NH 3  rx .H x  rp .H p  rq
Hi = entalpía de combustión a CO2 , H2O y N2 del compuesto
considerado expresada en K Joul*(C-mol)-1.

 115 *  N2
* rO 2  rq
  115 *  N2
* rO 2  rq
Esta ecuación relaciona directamente la velocidad
de producción de calor con la de consumo de O 2,
y es de importancia porque permite calcular el H 2O
de refrigeración necesaria a fin de controlar la
temperatura durante el proceso.
Crecimiento de poblaciones
microbianas
• Reacción autocatalítica:
S+X →X+X

rg   X    m ax
CS
KS  CS

X CS
rg   max
K S  CS
• La velocidad de muerte celular (rd) puede
expresarse como:

rd  k d  k t C t  X
• kd y kt se refieren, respectivamente, a la muerte
natural y a la provocada por alguna sustancia
tóxica para la célula y Ct es la concentración de
esa sustancia tóxica.
 Células + Sustrato  más Células + Productos

S   Y X / S X
células
 YP / S P
Los coeficientes estequiométricos YX/S e YP/S son los
coeficientes de rendimiento en base al sustrato y están
definidos por:
m asa de ce  lulas nuevas
YX S 
m asa de sustrato consum ido
m asa de producto form ado
YP S 
m asa de sustrato consum ido

Además, se define un coeficiente de mantenimiento celular:

masa de sustrato consumido en mantención

m
masa de células x tiempo
Las ecuaciones cinéticas en un bioproceso comprenden a las
velocidades de transformación de todos y cada uno de los
constituyentes del sistema:
consumo de sustrato
rS m  mX
formación de productos

r P  Y P / X rg r P  Y P / S (  rS )
consumo de nutrientes

rS  Y X / S r g  Y P / S r P  m X
Como se trata de velocidades de consumo, su signo es negativo
(-)
•En la producción de algunos metabolitos secundarios se utiliza
un nutriente diferente para el mantenimiento de las células y la
formación del producto.
K P C Sn X
rP 
K Sn  C Sn
donde CSn es la concentración del segundo nutriente; KP, la velocidad
específica de formación del producto; X, la concentración de células; KSn, la
constante de saturación del segundo nutriente.

Y en este caso: rP = YP/Sn(-rSn)

La velocidad neta de consumo de sustrato durante la fase
estacionaria es:  r  m X  Y r
Sn P Sn P

K P C Sn X
 rSn  m X  Y P Sn
K Sn  C Sn
 Modelos estructurados y no estructurados
Modelos de cinética celular
Componentes Celulares

Población No estructurados Estructurados

Las células están Múltiples componentes

representadas por un celulares, distribuidos
Distribuidos
componente simple, uniformemente en todo el
distribuido de manera cultivo, interactuando entre
uniforme por todo el cultivo. ellos.

Las células están Las células están formadas

representadas por un
Segregados
componente simple, pero
forman una mezcla
heterogénea.
por múltiples componentes,
los que forman mezclas
heterogéneas.
• Los modelos más simples son no estructurados – distribuidos, los que se
basan en las siguientes suposiciones:
• 1. Las células pueden representarse por un componente simple; por ejemplo la masa
celular, el número de células, la concentración de alguna proteína, el DNA o el RNA. Esto es
cierto cuando el crecimiento es balanceado, porque en ese caso, una duplicación de la masa
celular está acompañada por la duplicación de todas las propiedades “medibles” de la
población celular.
• 2. La población celular está uniformemente distribuida por todo el cultivo. La suspensión
de células puede verse como una solución homogénea. La naturaleza heterogénea de las
células puede ignorarse. La concentración de células puede expresarse como peso seco por
unidad de volumen.

• Admitidos estos supuestos, se pueden formular las expresiones cinéticas desarrolladas en el

presente tema, donde X representa la concentración de células como una especie química,
cuya formación ocurre en un medio que contiene en exceso todos los componentes
requeridos, salvo uno: el sustrato limitante S.