https://www.ucr.ac.cr/noticias/2009/08/19/moderna-planta-de-bioprocesos-abre-sus-puertas.

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Balance de Energía en estado

estacionario
MSc. Ada Patricia Barturén Quispe|
 Bioprocesos y Biotransformaciones

• Bioprocesos : Son los procesos mediante los cuales determinados SUSTRATOS

(nutrientes) son transformados por acción biológica (microorganismos, células, tejidos)
en BIOMASA y diversos PRODUCTOS.

Biocatalizador

• Glucosa + amonio + sales + oxígeno BIOMASA + PRODUCTOS + calor

Moléculas sencillas Moléculas complejas

Fuentes de carbono y energía, Antibióticos, drogas, vacunas,
fuente de nitrógeno y sales efluente tratados, vitaminas, ácidos
orgánicos, aminoácidos, proteínas y hormonas.
 Bioprocesos y Biotransformaciones

• Biotransformaciones Son los procesos en los que sustratos naturales o sintéticos son
MODIFICADOS por medio de una Actividad Enzimática.

Enzimas,
células
inmovilizadas

• Sustrato + agua Sustrato Modificado

Moléculas sencillas Moléculas complejas

Almidón Glucosa, Fructosa
 Un bioproceso se caracteriza por :

• Uso de catalizador biológico : Enzima, microorganismos, células vegetales, células

animales, células insecto, hongos filamentosos, algas, plantas y animales.

• Uso de un biorreactor : la reacción ocurre en forma controlada

• Generación de un producto o servicio.

Un bioproceso se caracteriza por :
 Aspectos básicos de un Bioproceso

UPSTREAM PROCESS DOWNSTREAM

PROCESSING
Elección del Elección del reactor Recuperación del producto por
microorganismo medio de operaciones unitarias
(físico/químicas)
Preparación del medio Elección del sistema de operación: Acondicionamiento y
(formulación) Bach : alimentado : sistema continuo, estabilización del producto.
etc.
Esterilización Estequiometria y cinética Formulación del producto.
Preparación del inóculo Instrumentación y control
El microorganismo productor

• Existen varias posibilidades

Partir del microorganismo productor wild type.

Microorganismos modificados genéticamente para tal fin.

Recurrir a sistemas de expresión heteróloga

 Microorganismos productores Wild Type

• VENTAJAS

 Generalmente suele ser mejor productor (seleccionado por la naturaleza)

La manipulación genética es mínima o nula, esto ahorra tiempo y dinero.

VENTAJAS

 Puede que no cumpla con las normas GRAS (Generally recognized as safe)

 Su utilización puede presentar dificultades al momento del escalado y

etapas danwstream, como por ejemplos hongos filamentosos.
Microorganismos Wild type
Microorganismos Wild type
 Sistemas de expresión heteróloga

• Son utilizados para la producción de proteínas recombinantes

• VENTAJAS

 Sistemas preparados para una finalidad determinada

 Amplia variedad de hospedadores

Gran variedad de herramientas moleculares disponibles (vectores, marcadores

de selección, etc)

• DESVENTAJAS

No siempre el producto final posee las mismas características que el deseado
Sistemas de expresión heteróloga

• Para la elección del sistema de expresión :

 Productividad (es difícil determinar a priori pero un buen tip es comenzar con
una búsqueda bibliográfica.

 Complejidad estructural

 Bioseguridad del sistema de expresión

 Balance de energía

• En el proceso de recuperación del ácido glucónico, el caldo de fermentación

concentrado, con un contenido del 20% en peso de ácido glucónico, se
enfría en un intercambiador de calor como paso previo a su cristalización.
Para ello deben enfriarse hasta 6°C, 2000 kg/h de líquido a 90°C que
procede de un evaporador. El enfriamiento se alcanza intercambiando calor
con 2700 kg/h de agua que se encuentra inicialmente a 2°C. Si la
temperatura final del agua de refrigeración es de 50°C. ¿Cuál es la velocidad
de pérdida de calor de la disolución de ácido glucónico hacia los
alrededores?. Suponga que la capacidad calorífica del ácido glucónico es de
0,35 cal/gr.°C.
 Ecuación General de Balance de Energía

Energía que Energía que Energía

entra a través sale a través acumulada
de los limites de los limites en el sistema
del sistema del sistema

Ws
∑(Mh) + ∑(Mh) –Q + Ws = 0
Corriente de Corriente de
entrada salida
Mi SISTEMA M0

Q
Balance de Energía
Calor de Combustión

• Calor de combustión Δhc de define como el calor que interviene durante la

reacción de una sustancia con oxígeno para formar ciertos productos
oxidados como el CO2 gas, H2O líquida y N2 gas. Por convenio este calor
estándar de combustión Δh°c es el cambio de entalpía específica asociado
con esta reacción en condiciones estándar, generalmente 25°C y 1 atm de
presión. Por convenio este valor es cero para los productos de oxidación es
decir, CO2 gas, H2O líquida y N2 gas, los calores estándar de combustión
para otros compuestos es negativo.

ΔH°rxn = ∑nh°c - ∑nh°c

reactantes productos
 Balance de energía

• El ácido fumárico se produce a partir del ácido málico utilizando una enzima,
fumarasa. Calcular el calor estándar de reacción para la siguiente
transformación enzimática :

C4H605 C4H404 + H20

(ácido málico) (ácido fumárico)

CALOR DE REACCION EN CONDICIONES NO ESTANDAR

∆Hrxn
A+B C+D
T °C T°C
Proceso hipotético

∆H3
∆H1 Calentamiento
Calentamiento o enfriamiento A + B o Enfriamiento
C+D

A+B ∆H2 = ∆H°rxn C+D

25°C 25°C
(Reacción estándar)
Termodinámica del Crecimiento Microbiano

• El crecimiento celular se representa por :

CwHxOyNz + aO2 + b HgOhNi  c CHON +dCO2 + eH2O

• Los calores de reacción para el crecimiento celular pueden calcularse utilizando la estequiometria
microbiana y el concepto de electrones disponibles. Se ha encontrado que el contenido energético
de los compuestos orgánicos está relacionado con el grado de reducción mediante la ecuación :

∆h°c = -q γ xc
Donde :
∆h°c = calor molar de combustión en condiciones estándar
q = calor que interviene por mol de electrones disponibles transferidos al oxigeno
durante la combustión.
γ = grado de reducción del compuesto definido con respecto a N2
xc = número de átomos de carbono en la formula molecular
Termodinámica del Crecimiento Microbiano

• El coeficiente q que relaciona ∆h°c y γ es relativamente constante para un

gran número de compuestos :

Patel y Erickson le asignaron un valor : 111 kJ/mol

Roels : 115 kJ/mol
Calor de reacción cuando el oxígeno no es el principal aceptor de electrones

Si una fermentación utiliza aceptores de electrones diferentes al oxigeno, por ejemplo en cultivos anaerobios,
para calcular el calor de reacción deben utilizarse los calores de combustión.
Considere la siguiente reacción de crecimiento anaerobio con formación de producto :

CWHXOYNZ + bHgOhNi cCHαOβNδ + dCO2 + eH2O + fCjHkOlNm

Si el amoniaco es la fuente de nitrógeno y los calores de combustión del H2O y del CO2 son cero, se obtiene
que la ecuación para el calor estándar de reacción es :

∆H°rxn = [ (n∆h°c)sustrato + (n∆h°c)NH3 ] –[ (n∆h°c)biomasa - (n∆h°c)producto]

Los calores de combustión del sustrato, amoniaco y producto pueden obtenerse a partir de tablas, pero de la
biomasa se calcula de la siguiente manera :
La composición elemental de la biomasa no varia apreciablemente. Si se supone una formula molecular media
de CH1.800.5N0.2, la reacción de combustión de las células a CO2, H2O y N2 es :

CH1.800.5N0.2, + 1.2 O2 CO2 + 0.9 H2O + 0.1 N2

Calor de reacción cuando el oxígeno no es el principal aceptor de electrones

El grado de reducción de la biomasa en relación al N2 es 4.80. Suponiendo un contenido medio de cenizas

de la biomasa del 5%, el peso molecular de la celula es 25.9. El calor de combustión se obtiene aplicando :

n∆h°c biomasa = (-115 Kj/mol) (4.80) (1). 1 mol/25.9

n∆h°c biomasa = -21.3 kJ/gr

Cuando se desconoce la composición de un microorganismo el calor de combustión para las bacterias

puede tomarse como -23.2 kJ/gr y -21.2 kJ/gr para las levaduras
 Balance de energía para un cultivo celular

En las fermentaciones el calor de reacción es tan grande que los pequeños efectos de la entalpia
debida a variaciones de calor sensible y calores de mezcla pueden despreciarse en el balance de
energía.

-∆Hrxn - Mv ∆hv – Q + Ws = 0

∆Hrxn tiene signo negativo ya que es igual a [entalpía productos - entalpía reactantes] mientras
que en la ecuación de energía se refiere a [entalpía entrada - entalpía de salida].
Calores de combustión para bacterias y levaduras

ORGANISMO SUSTRATO ∆HC (kJ/gr)

BACTERIA
Eschericchia Coli Glucosa -23.04 ±0.06
Glicerol -22.83 ± 0.07
Enterobacter cloacae Glucosa -23.22 ± 0.14
Glicerol -23.39 ± 0.12
Methylophilus Metanol -23.82 ±0.06
methylotrophus
Bacillus thuringiensis Glucosa -22.08 ± 0.03
LEVADURA
Candida lipolytica Glucosa -21.34 ± 0.16
Candida boidinii Glucosa -20.14 ± 0.18
Etanol -20.40 ± 0.14
metanol -21.52 ± 0.09
 Catabolismo – Anabolismo

CATABOLISMO ANABOLISMO

Donador de electrones (d) Biomasa (X)

+ CH1,8O0,5N0,2
Aceptor de electrones (a) Energía de
Gibbs

Donador oxidado Fuente de C, fuente de N

+
Aceptor reducido H20, HCO3-, H+
𝟏 𝟏
𝒅𝒐𝒏𝒂𝒅𝒐𝒓 𝒅𝒆 𝒆𝒍𝒆𝒄𝒕𝒓𝒐𝒏𝒆𝒔 − 𝒀𝒂𝒙 𝒂𝒄𝒆𝒑𝒕𝒐𝒓 𝒅𝒆 𝒆𝒍𝒆𝒄𝒕𝒓𝒐𝒏𝒆𝒔 + 𝑪𝒎𝒐𝒍 𝒅𝒆 𝒃𝒊𝒐𝒎𝒂𝒔𝒂 +
𝒀𝒅𝒙
𝟏 𝟏 −
𝑲𝑱 𝒄𝒂𝒍𝒐𝒓 + 𝑲𝑱 𝒆𝒏𝒆𝒓𝒈í𝒂 𝒅𝒆 𝑮𝒊𝒃𝒃𝒔 + … . 𝒇𝒖𝒆𝒏𝒕𝒆 𝒅𝒆 𝑵 + … 𝑯𝟐𝟎 + … 𝑯𝑪𝑶𝟑 + (…)
𝒀𝒉𝒙 𝑮𝒙
H+ Representación estequeométrica general de la formación de un C-mol de biomasa. Yix es el rendimiento de
un C-mol de X sobre un mol o KJ compuesto i; (…..) son coeficientes estequeométricos conocidos.
• Consideremos el crecimiento autótrofo aerobio de un microorganismo que utiliza
como donador de electrones la oxidación de Fe+2 a Fe+3, creciendo a 50°C, a una
velocidad de 0,01h-, a un pH de 1,5 y utilizando NH4+, como fuente de Nitrógeno.
Puede obtenerse la siguiente reacción de crecimiento para la producción de un
C-mol de biomasa utilizando siete coeficientes estequeométricos desconocidos :

• aHCO3- + bNH4+ + cH2O + dO2 +eFe+2 + CH1.8O0.5N0.2 +fFe3+ + gH+ + 1/Ygx KJ

energía de Gibss.