Fagocitosis de Macrófagos Murinos

Macrófagos
El Sistema Mononuclear Fagocítico (SMF) fue descubierto hace más de
un siglo por el premio Novel Ilya Metchnikoff (1882).

Metchnikoff clasificó a las células del SMF en dos grandes grupos; los
macrófagos, del Griego “grandes comedores” y los microfagos
“pequeños comedores”, hoy conocidos como leucocitos.

Los macrófagos no solo la capacidad de fagocitar sino características

muy importantes para el desarrollo, la homeostasia y protección del
hospedador frente a infecciones, lo que hoy en día conocemos como
“inmunidad innata”.

Los macrófagos proceden de los monocitos.

Estos se forman en la médula ósea procedentes de células

pluripotenciales de la serie granulocítico-monocítica, gracias al factor
de crecimiento GM-CSF (granulocyte macrophage colony stimulating
factor) y otras citoquinas como la interleucina 3
Fundamentación experimental de la Fagocitosis de Macrófagos

Los ensayos de la actividad fagocítica involucran la adició n de partículas a los

macró fagos, seguido por un aná lisis al microscopio del nú mero de partículas
unidas e internacionalizadas por la célula o macró fago.

Hay dos tipos de ensayos básicos

El primero El segundo
determina el monitorea el
nú mero de nú mero decreciente
partículas asociadas de partículas en el
con los macró fagos medio extracelular
 Actividad Fagocítica de Macrófagos Murinos

De la cavidad peritoneal de la rata, obtener macró fagos murinos y colocar 5 x 106 en frascos de vidrio
conteniendo 1000 uL de medio de cultivo RPMI+164O. 300 uL de levaduras con
teñidas con azul de
metileno

1000 u l
Macrófagos RPMI
murinos 5 x 106
 Actividad Fagocítica de Macrófagos Murinos

Incubar los macró fagos Terminada la incubació n transferir el contenido del frasco a un
con las bacterias o tubo Eppeendorf y centrifugar a 3000 rpm durante 2 mm.
levaduras durante 45 min.
Actividad Fagocítica de Macrófagos Murinos

Lavar los macró fagos con Centrifugar Resuspender

500 ul de PBS buffer a 3000 rpm los macró fagos
fosfato por tres veces durante 2 en 100µl de
(para eliminar los mm. PBS.
microorganismos no
fagocitados).
Actividad Fagocítica de Macrófagos Murinos

Observar una alícuota Contar el nú mero de Esquematizar, colorear y

(20 µl) de los macró fagos que han describir la fagocitosis
macró fagos en una fagocitado los observada al microscopio
lá mina portaobjetos en microorganismos teñ idos a diferentes aumentos.
un microscopio con el (E. coli o S. cerevisiae).
objetivo de 10x y 40X.