BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA PRACTICA 5ª

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES

DEPARTAMENTO DE LABORATORIO DE MICOLOGÍA
UZIEL SÁNCHEZ AQUINO

PRÁCTICA 5: RECONOCIMIENTO DE
ESTRUCTURAS BÁSICAS DE LOS HONGOS
 PRÁCTICA NO. 5(3)RECONOCIMIENTO DE LAS ESTRUCTURAS BÁSICAS DE
LOS HONGOS

INTRODUCCIÓN

La mayoría de las personas que trabajan con micología a menudo se

confunden y desaniman en sus esfuerzos al estudiar hongos debido a la
forma macroscópica de las colonias, la variedad de microestructuras y
los grandes cambios en la nomenclatura.

Poco se sabe al respecto. Sin embargo, estas dificultades son más

psicológicas de lo que realmente son, y una vez que domines algunos
de los conceptos básicos basados en la micro y macro morfología,
identificar hongos será más fácil y rápido que con otras bacterias
comunes. El hongo libera una o más extensiones tubulares llamadas
tracto genital o hifa. Estos se alargan por el crecimiento distal. El micelio
se puede dividir formando el diafragma a intervalos regulares. Las hifas
divididas en tabiques se denominan hifas septales, pero algunos hongos
no desarrollan hifas en las hifas y se denominan septos o hifas.
Concluyendo, la creciente población de hifas se llama micelio, y la
distinción se basa principalmente en la morfología de la colonia y la
morfología microscópica.

A) La morfología colonial se basa en los siguientes parámetros:

a. Aspecto b. Consistencia. c. Pigmentación de la colonia. d. Difusión
de pigmento al medio. e. Luz reflejada. f. Luz transmitida. g. Bordes

B) Morfología microscópica ( referente al micelio ): a. Tabicado o

septado. b. Cenocítico. c. Hialino. d. Pigmentado (fugilaginoso,
carotenoide ) e. Macrosifonado f. Microsifonado.
 OBJETIVO
El alumno será capaz de diferenciar las colonias de los hongos
y los diversos tipos de estructuras básicas, como por ejemplo,
el micelio por medio de técnicas de observación en fresco o
directa y algunas preparaciones facilitadas por el profesor,
valorando estos parámetros como fundamentales en la
identificación de los hongos.

TÉCNICAS A EMPLEAR
A) Técnica de resiembra en tubo.
1. Con el asa micológica en ángulo de 90º tomar un
pequeño fragmento de las colonias con morfología diferente
y depositarlo en un tubo con medio inclinado PDA o SDA.
2. Incubar a 28ºC.
3. Observar cada 40 h el desarrollo de las colonias.
B) B) Técnica de observación microscópica en fresco.
1. Sobre un porta objetos depositar una gota de colorante
azul de algodón lactofenol.
2. Con el asa micológica tomar un pequeño fragmento de la
colonia y colocarlo sobre el portaobjetos.
3. Agregar una gota de alcohol al 70% (esto es necesario
solo en el caso de hongos con esporulación abundante).
4. Dilacerar el fragmento de la colonia con ayuda da agujas
de disección o bien con la misma asa micológica.
5. Colocar sobre la preparación un cubre objeto evitando
formar burbujas de aire.
6. Observar al microscopio a seco débil y seco fuerte, nunca
usar aceite de inmersión.
 Desarrollo de la práctica
PRÁCTICA 5: RECONOCIMIENTO DE ESTRUCTURAS BÁSICAS DE LOS HONGOS

Realizar Morfología colonial (parametros) de los hongos aisla-

do del alimento (1°), de la resiembra y de los del Monitoreo
ambiental descritas y con imagenes.
Reportar la técnica de Tinción de Lactofenol realizada en cla-
se (explicación e imagenes)
Hacer dibujos de: Hifa, Micelio, Micelio cenocitico, Micelio ta-
bicado y Micelio fugilaginoso, ésto acompañado de la clasifi-
cación de Micelio y de las Modalidades de las Hifas.
Desarrollo de la práctica

 Observar las colonias aisladas de los sustratos (práctica # 1).

 Escoger diferentes tipos de colonias y resembrarlas en tubos con medio PDA o

SDA.

 Observar comparativamente las características macroscópicas de las colonias

desarrolladas.

 Hacer preparaciones en fresco con azul de algodón lactofenol de las colonias

aisladas resultando de la práctica anterior.

Técnica de la aguja (asa micológica).

1. Tener todos los materiales listos y una zona estéril con ayuda de los meche-
ros o lámparas de alcohol.

2. Dentro de la zona estéril flamear el asa micológica.

3) El asa se deberá enfriar previamente en solución salina
o agua destilada al tomar la muestra. Con el asa ya fla-
meada (esterilizada) coger una porción de la muestra
(hongo) y depositarlo lo más céntrico posible de los porta
objetos o abate leguas.

4). Agregar una gota de colorante en el centro de los por-

ta objetos o abate lenguas. Colocarle un cubre objetos o
cinta adhesiva sobre la muestra y colorante. (CON UNA GA-
SA O PAPEL ABSORBENTE RETIRAR EL EXCESO DE COLORANTE ALRE-
DEDOR DEL PORTA O CUBRE OBJETOS )
 Observar comparativamente el micelio de las muestras aisladas con las prepa-
raciones fijas proporcionadas por el profesor.

MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS AISLADOS DEL (ALIMENTO)

HONGO FILAMENTOSO

Ilustración 1.-Colonia observada en la primera

placa.

Macroscópicamente (morfología macroscópica)

que es una colonia circular elevada de color
blanco a gris oscuro y textura algodonosa
densa. Reverso color blanco crema con bordes
filamentosos.

Ilustración 2.-Colonia observada en la segunda

placa.

Macroscópicamente (morfología macroscópica)

que es una colonia circular irregular de color
verde grisáceo con borde filamentoso y textura
lanosa. Reverso verde oscuro y con estrías en
su centro.
 MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS AISLADOS RESIEMBRA

Ilustración 1.-Colonia observada de la primera

placa.

En esta aun no han crecido los hongos debido al

corto tiempo de incubación pues apenas llevan
24 horas de incubación.

MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS DEL MONITOREO AMBIENTAL

Ilustración 1.-Colonia observada en la
primera placa.

Macroscópicamente (morfología macros-

cópica) que es una colonia de aspecto
cerebriforme de color verde oscuro a
blanco y borde blanco, con aspecto
algodonoso y textura polvorienta. Reverso
verde opaco y con borde blanquecino.

Ilustración 2.-Colonias observadas en la

segunda placa.

Macroscópicamente (morfología
macroscópica) la presencia de 2 colonias
diferentes y la presencia de una levadura.
Las colonias observadas en el centro
inferior derecho de la imagen poseen las
mismas características que las colonias
observadas en la primera placa, mientras que, las colonias
observadas en la parte superior derecha poseen un aspecto irregular
de color verde claro a blanquecinos, con borde blanco y reverso de
color blanco. La levadura presente en el medio se observa de aspecto
líquido y coloración naranja.
 TÉCNICA DE TINCIÓN DE LACTOFENOL REALIZADA EN CLASE
(EXPLICACIÓN E IMÁGENES)
La tinción de Azul de lactofenol se emplea para observar hongos. Es
una tinción simple (un sólo colorante) y como tal está basada en la afini-
dad del colorante por componentes de las células, en este caso por las
estructuras fúngicas. Si bien la tinción de Gram se considera esencial
para la evaluación inicial de muestras para el análisis bacteriológico, la
tinción de Wright se utiliza en el campo de la parasitología para diagnos-
ticar enfermedades muy específicas.

 El azul de lactofenol tiene tres características que lo hacen especial

para observar dichas estructuras en los hongos del tipo moho obte-
nidos en los cultivos por aislamiento.

 El fenol destruye la flora acompañante (algunas veces en los culti-

vos, juntos a los hongos pueden crecer colonias de bacterias)

 El ácido láctico conserva las estructuras fúngicas al crear, por decir-

lo de algún modo, una película que las protege provocado por un
cambio de gradiente osmótico entre el interior y el exterior de dicha
estructura.

 El azul de algodón tiene la capacidad de adherirse a las hifas y coni-

dios de los hongos microscópicos

EXPLICACIÓN: Aplicar 2 gotas de color azul a una hoja de porta objeto

estéril. Cortaremos la cinta y ataremos al final del mango estéril. Trans-
ferimos con cuidado el final del celo al borde exterior de la colonia. Apli-
caremos la cinta en el portaobjetos y retiraremos con cuidado el mango.
Agregamos finalmente una gota de tinte al celo y envolvemos con pin-
zas el cubreobjetos mismo.
CLASIFICACIÓN DE MICELIO Y DE LAS MODALIDADES DE LAS HIFAS.
 MICELIO VEGETATIVO: Es aquél destinado a dar sostén, protección
y nutrición al hongo.
 MICELIO REPRODUCTIVO: Es el conjunto de hifas fértiles que
nacen del micelio vegetativo pero que se diferencian biológica y
morfológicamente para las funciones de reproducción.
MODALIDADES DE LAS HIFAS.
 GENERATIVAS: Producen estructuras fértiles y con paredes
delgadas, septadas (con septos o paredes transversales) y con
fíbulas presentes o ausentes.

 ESQUELÉTICAS: Aseptadas (sin septos o paredes transversales),

no ramificadas, con paredes gruesa, hialinas o coloreadas.

 ENVOLVENTES: Aseptadas, con paredes gruesas, ramificadas y

extremos terminados en punta (acuminados).
Hacer dibujos de: Hifa, Micelio, Micelio cenocítico, Micelio
tabicado y Micelio fugilaginoso, esto acompañado de la clasi-
ficación de Micelio y de las Modalidades de las Hifas.