Tolerancia inmunológica

Nikolaos C. Kyriakidis, PhD

Docente e Investigador

Universidad de las Américas

Quito - Ecuador
 PLANIFICACIÓN SEMANA 7
1. Introducción
2. Inmunodeficiencia, inmunosupresión y
tolerancia inmunológica
3. Mecanismos de tolerancia inmunológica
4. Interrupción de la tolerancia
inmunológicacomo tratamiento en
el cáncer
5. Pérdida de tolerancia y
desarrollo de enfermedades
autoinmunes
6. Conclusión
1. Comprender los mecanismos de inducción y
pérdida de tolerancia relacionados con la salud
y el desarrollo de enfermedades autoinmunes,
así como la asociación de las moléculas HLA
con el desarrollo de autoinmunidad
2. Analizar la tolerancia natural y la tolerancia
adquirida para comprender su utilidad médica
en trasplantes, tumores y enfermedades
autoinmunes
3. Aplicar los mecanismos de daño tisular con los
modificadores biológicos en el tratamiento de
enfermedades autoinmunes
 Características de la tolerancia inmunológica
1. Ser especifica
 el sistema inmune adaptativo reconoce y distingue entre moléculas muy parecidas químicamente
 de modo experimental con injertos o trasplantes de piel entre ratones de diferente fondo genético
que rechazan los injertos cutáneos se demostró la especificidad de la tolerancia inmunológica
 
2. Ser inducible
 puede producirse de manera intencionada

3. Ser transferible
 la tolerancia puede transferirse mediante la inyección de linfocitos provenientes de un animal
“tolerante” a otro que no lo es

4. Tener memoria
 en la segunda exposición al agente inductor de tolerancia se produce una respuesta de memoria que
es más rápida y eficiente
 Parecida a la reimmunization en el caso de las vacunas
Inmunodeficiencia, inmunosupresión y tolerancia inmunológica
• Inmunodeficiencia
 Incapacidad de montar respuesta frente a cualquier antígeno
 Por defectos genéticos en componentes de la respuesta inmunitaria (congénitas) o
 Por defectos presentados a lo largo de la vida (adquiridas)

• Inmunosupresión
 Incapacidad de montar respuestas aunque no existan defectos en componentes de la respuesta
inmunitaria

• Tolerancia inmunológica
 Se puede montar respuesta adaptativa frente a cualquier antígeno salvo frente aquel que indujo el
estado de tolerancia
 Su ausencia ocasiona:
 Enfermedades autoinmunes
 Alergias

• La misma sustancia puede ser tolerogénica

 Si se inyecta sin adyuvante
• o inmunogénica
 Si se inyecta con adyuvante
 El rol de las células dendríticas en la tolerancia inmunológica
Cualquiera de las poblaciones de DCs es capaz de inducir tolerancia por medio de tres mecanismos:
a) deleción de linfocitos T
b) inducción de anergia de linfocitos T y
c) inducción de linfocitos Treg
 
• Una de las acciones por parte de las DCs en la tolerancia periférica ocurre al eliminar células apoptóticas
• A diferencia de la piroptosis, esta respuesta no resulta en la liberación de citocinas proinflamatorias
• La apoptosis y el mantenimiento de la tolerancia periférica por parte de las células dendríticas se induce por la unión
de PD-1 con PD-L1 y PD-L2

PD-1 PD-L1 PD-L2

linfocitos T y B Linfocitos T vírgenes CDs
Monocitos Linfocitos B macrófagos
células NK CDs
células mieloides macrófagos

• La vía PD-1 PD-L1/2 participa en la supresión inmunitaria en modelos de autoinmunidad, trasplante y alergias por medio
de una variedad de mecanismos, incluyendo la promoción de la apoptosis de las células T
 El rol de las células dendríticas en la tolerancia inmunológica
• Posterior a la muerte celular, la fosfatidilserina normalmente está presente en la parte interna de la membrana
plasmática, por lo que se exterioriza y sirve como indicador de apoptosis

• La interacción de los ligandos asociados a la membrana apoptótica con receptores Tyro-3, Axl y Mer (TAM) en las DCs
interfiere con la señalización de los TLR, e impide la maduración de las estas células
 
• Existen datos experimentales obtenidos con ratones que apoyan la hipótesis de la participación primordial de las
células dendríticas en la tolerancia

• Protocolos de tratamiento en pacientes con varias presentaciones de cáncer avanzado

 inmunoterapia con anticuerpos monoclonales, como el dirigido contra PD-1 o contra el PD-L1
 modifica el microambiente de los linfocitos T que infiltran cánceres como el melanoma
 la administración de esos anticuerpos rompe la tolerancia que se generó con la presencia de antígenos tumorales
 
• Se han utilizado las células dendríticas para inducir tolerancia en enfermedades autoinmunes y alérgicas
 
• Anticuerpos monoclonales:
 anti-CTLA-4
 anti-CD28/B7
 anti-CD40/CD40L
Combinados producen una efectiva inducción de tolerancia en trasplantes de órganos y tejidos
 Tolerancia inmunológica adquirida
• La forma más simple de inducir tolerancia es vía oral
 Ingesta de diferentes concentraciones de antígenos
 Colágeno tipo II  artritis reumatoide
 Insulina  Diabetes tipo I de reciente aparición
 Proteína básica de mielina  esclerosis múltiple

Medios para suprimir o disminuir la respuesta inmune:

 
1. Físicos.
• En animales experimentales se ha utilizado la radiación gamma al momento de la inyección de un antígeno
• los efectos colaterales hacen poco atractivo este medio de inducción de tolerancia
 
2. Químicos.
• La inyección simultanea de un antígeno soluble o particulado junto con la administración de medicamentos, como la ciclosporina A,
evita la sensibilización
• En la uveítis experimental autoinmune en ratas de la cepa Lewis se logro evitar la sensibilización al antígeno soluble de la retina
empleando ciclosporina A
• tacrolimus, micofenolato y azatioprina
 
3. Inmunológicos.
• suero hiperinmune anti-linfocitario
• Este mismo efecto puede obtenerse al inyectar anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4 y anti-CD8
• control del rechazo de trasplantes
• Puede producir enfermedad del suero (hipersensibilidad tipo III)
• o inducir una respuesta inmune que neutraliza su efecto en el mediano plazo
 Características antigénicas que inducen la tolerancia
1. Tamaño de la molécula.
• proteínas, como la albumina o la inmunoglobulina G, inducen una excelente respuesta de anticuerpos si se inyectan en
forma polimerizada o en forma de agregados
• Si en estas mismas moléculas se les remueven sus agregados inducen la producción de tolerancia
• Esto se debe al cambio en el peso molecular que las moléculas sufren durante el proceso de centrifugación
• flagelina polimerizada  actúa como un excelente inmunógeno
 al presentarse como monómero  fomenta tolerancia cuando se inyecta en dosis altas

2. Composición química de las moléculas.

• Los polímeros de D-aminoácidos son buenos tolerógenos
• La acetoacetilación de proteínas como la flagelina monomérica también incrementa su capacidad tolerogénica
 
3. Dosis aplicada.
• proteínas antigénicas inyectadas en dosis altas (10-5 M) inducen tolerancia
 
4. Vía de administración.
• La administración de moléculas o sustancias antigénicas por la vía oral induce un estado de tolerancia

5. Ausencia de adyuvante.
• La ausencia de PAMPs o DAMPs no activa a las DCs  presentan antígeno de manera tolerogénica (sin co-estimulación)
Factores que determinan la inmunogenicidad o la
tolerogenicidad de los antígenos proteicos
 Tolerancia mediada por IgD
• La IgD comienza a expresarse en la superficie de linfocitos B un poco después de que se exprese la IgM

• Splicing alternativo del mRNA  expresión de IgD e IgM con idéntica especificidad antigénica, pero en diferente
proporción

• Alta expresión de IgD y baja expresión de IgM en linfocitos B suele llevar una respuesta de anergia

• Cerca de 35% de los linfocitos B maduros que reconocen antígenos propios expresan una alta concentración de IgD

• Ciertas células B de la mucosa se convierten en células plasmáticas especializadas en la secreción de IgD

• La microbiota desempeña un papel importante en la sustitución de IgM por IgD mediante el cambio de isotipo
 Inducción de tolerancia en pacientes trasplantados
1. Inyección de células de médula ósea del donador de un riñón.
• establecer quimerismo antes del trasplante renal
• pacientes sometidos a trasplante de médula ose de sus respectivos futuros
donadores de riñón
• El mecanismo parece involucrar a monocitos que inducen apoptosis en los
linfocitos T

2. Infusión de células madre mesenquimatosas.

3. Inyección intravenosa de linfocitos T reguladores expandidos ex vivo.

• Se trata de inyectar Tregs CTLA-4+, FoxP3+

4. Infusión de macrófagos reguladores, células dendríticas regulatorias, etcétera.

• los resultados son variados y el uso de ninguno de ellos se ha generalizado en el
campo clínico

5. Las células T reprogramadas con receptores de antígeno quiméricos (células CAR-

T)
• se han estudiado ampliamente en el campo de la inmunoterapia del cáncer
• recientemente se han aplicado a la tolerancia inmunológica
• células manipuladas efectoras para eliminar las células autorreactivas, y
Interrupción de la tolerancia inmunológica como tratamiento en cáncer
Pérdida de la tolerancia y desarrollo de enfermedades autoinmunes
Enfermedades autoinmunes
órgano-específicas
Enfermedades autoinmunes sistémicas
 Tratamiento de las enfermedades autoinmunes
• Hace tiempo solo se trataban los síntomas relacionados con las moléculas ocasionadas por la inflamación crónica, como el dolor
las artropatías de la artritis reumatoide
• Se usaban antiinflamatorios no esteroides (NSAID), que disminuyen la inflamación y el dolor pero no cambian el curso natural de
la enfermedad
• Luego se emplearon inmunosupresores conocidos como fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad (DMARD) y
se continúa usando por su gran efectividad y bajo costo
 aunque tienen efectos colaterales indeseables, algunos de los cuales son serios, como la neutropenia
• En los últimos años se han incorporado anticuerpos monoclonales contra diferentes componentes del sistema inmune como
citocinas y receptores de citocinas, entre otros
• En tiempos mis recientes se introdujeron otros modificadores biológicos de la respuesta inmune:
 como las preparaciones de CTLA-4 con inmunoglobulina
 esta preparación funciona bloqueando la interacción de los linfocitos T autorreactivos y se detiene la activación de
linfocitos T autorreactivos
 inhibidor de enzimas conocidas como Janus kinasas (JAK)
 desempeñan un papel importante en la inflamación articular en pacientes con artritis reumatoide
 La desventaja de todos los modificadores biológico es su alto costo

• También se usan otros inmunosupresores

• En 2009 se clasificaron los inmunosupresores en dos grandes grupos de acuerdo con su efecto sobre los linfocitos B productores
de anticuerpos IgM específicos para antígeno
a) micofenolato mofetilo, metotrexato y ciclosporina A: no afectan la producción de anticuerpos IgM específicos para el
antígeno
b) prednisona, azatioprina y ciclofosfamida: tienen un gran efecto supresor de la respuesta de anticuerpos IgM específicos
para antigenos
Tratamiento de las enfermedades autoinmunes
Resumen de la
tolerancia
inmunológica
 Tolerancia central
• La tolerancia central puede conducir:
i. a la muerte celular o
ii. al reemplazo de un receptor de antígeno autorreactivo con uno que no es autorreactivo

• Los órganos linfoides generativos contienen principalmente antígenos propios

• Los antígenos extraños generalmente se capturan y se llevan a órganos linfoides periféricos

• Los antígenos normalmente presentes en el timo y la médula ósea incluyen autoantígenos ubicuos o
ampliamente diseminados, incluidos los que son llevados por la sangre

• Además, muchos antígenos específicos de tejidos periféricos se expresan en el timo mediante un

mecanismo especial

• Por lo tanto, en los órganos linfoides generativos, los linfocitos inmaduros que reconocen a antígenos
son típicamente células con especificidades ante lo propio
Desarrollo de los linfocitos
 Tolerancia periférica
• La tolerancia periférica es inducida cuando los linfocitos maduros que reconocen antígenos
propios:
i. mueren por apoptosis, o
ii. se vuelven incapaces de activarse por una nueva exposició n al antígeno tolerado
iii. La tolerancia periférica también es mantenida por las células T reguladoras (Treg) que
suprimen activamente los linfocitos específicos del antígeno propio
 Las Tregs también pueden prevenir las respuestas a los antígenos derivados de los
microbios comensales, o del feto en las mujeres embarazadas
iv. Algunos antígenos propios son secuestrados o aislados del sistema inmunológico y
otros antígenos son ignorados
 Los antígenos pueden estar aislados del sistema inmunitario por barreras
anatómicas, como en los testículos y los ojos, y por tanto no pueden captar los
receptores de antígenos
 Los microbios comensales también pueden estar separados del sistema inmunitario
por barreras físicas, como la capa de queratina de la piel y la capa de mucosidad
de los tractos gastrointestinal y respiratorio
Tolerancia de los linfocitos T
 Tolerancia central de los linfocitos T
• Durante su maduración en el timo
• Se produce en las células T doble positivas de la corteza tímica y en las células T
monopositivas recién generadas en la médula
i. se eliminan muchas células T inmaduras que reconocen antígenos con alta avidez
 Selección negativa

ii. algunas de las células sobrevivientes en el linaje CD4+ se convierten en Tregs

• Antígenos normalmente expresados en tejidos periféricos se expresan en células

epiteliales medulares tímicas bajo el control de la proteína reguladora autoinmune (AIRE)

• También se presentan por macrófagos y células dendríticas

• Mutaciones en el gen AIRE son la causa de una enfermedad autoinmunitaria multiorgá nica
llamada síndrome autoinmune poliendocrino tipo 1 (APS1)
Tolerancia periférica de los linfocitos T
Co-estimulació n en la sinapsis inmunoló gica
Tregs

Τ CD4+CD25+

IL-10
TGFβ
Tolerancia de los linfocitos B
Tolerancia central de los linfocitos B
 Edició n de receptores
• El reconocimiento de antígeno con alta afinidad y avidez en la médula ósea resulta en
una reactivación de las RAG1 y RAG2

• Si el reordenamiento de la cadena ligera editada no es productivo, se harán

reordenamientos adicionales de Vκ a Jκ en el mismo locus

• Si éstos también fallan, el proceso puede proceder en el locus κ del otro cromosoma

• Si esto tampoco es productivo, pueden seguir reordenamientos en los loci de la cadena

ligera λ

• Se estima que entre los linfocitos B de la sangre periférica de los seres humanos, 25-50%
de todas las células y la mayoría de las células que expresan cadenas ligeras λ han
sufrido la edición del receptor durante su maduración

• Es probable que las células B autorreactivas intenten primero cambiar su especificidad y

si la edición del receptor falla mueran por apoptosis
 Tolerancia periférica de los linfocitos B
• Los linfocitos B maduros que reconocen antígenos propios en los tejidos periféricos en
ausencia de células T ayudantes específicas pueden:
i. dejar de responder funcionalmente (anergia) o
ii. morir por apoptosis (deleción)

• Las señ ales de las células T ayudantes pueden estar ausentes si estas células T son
eliminadas o anérgicas o si los antígenos propios son antígenos no proteicos

• Dado que los antígenos propios generalmente no provocan respuestas inmunes innatas, las
células B tampoco se activarán a través de los receptores del complemento o PRRs

• Así, al igual que en las células T, el reconocimiento de antígenos sin estímulos adicionales
produce tolerancia