Exámenes de laboratorio

en Inmunología
Dra. Natalia Nuñez del Prado Alanes
EXÁMENES DE LABORATORIO EN INMUNOLOGÍA

DIAGNÓSTICO
• INMUNOLÓGICO
– Inmunodeficiencias
– Autoinmunidad
– Alergia
• NO INMUNOLÓGICO
– Patología infecciosa
– Patología no infecciosa
– Anatomía patológica
– Otros…..
EXÁMENES DE LABORATORIO INMUNODEFICIENCIAS

Estudio de ID inmunidad innata

Estudio de ID inmunidad innata
Estudio de ID inmunidad innata
 Estudio de ID inmunidad innata
Test de fagocitosis
Prueba de NAT: Aspecto normal de neutrófilos
capaces de reducir NAT a Formazan
 Estudio de ID inmunidad innata
Test de fagocitosis
Prueba de NAT: Aspecto patológico de neutrófilos con
incapacidad para reducir NAT a Formazan
Estudio de ID inmunidad innata
Quimiotaxis en filtro
Estudio de ID del complemento

Nivel total del complemento en sangre: 41 a 90 U hemolíticas

Nivel de C1: 14.9 a 22.1 mg/dL 
Niveles de C3: 88 a 201 mg/dL 
Niveles de C4: 15 a 45 mg/dL
 Estudio de ID humorales
Electroforesis de proteínas
Electroforesis normal Agammaglobulinemia
 Estudio de ID humorales
Electroforesis de proteínas
Hipogammaglobulinemia Agammaglobulinemia
 Estudio de ID humorales
Desarrollo normal de Igs hasta los 18 meses
 Estudio de ID humorales
Niveles normales de Inmunoglobulinas por edades
Estudio de ID humorales
Niveles de Inmunoglobulinas séricas
Estudio de ID humorales
Respuesta a vacunas
Estudio de ID por citometria de flujo
 Estudio de ID por citometria de flujo
Estudio de poblaciones linfocitarias

LB (CD19+)

NK (CD3- CD16+ CD56+)

Estudio de ID por citometria de flujo
Estudio de ID celulares
Proliferación de linfocitos
Estudio de ID celulares
Proliferación de linfocitos
 AUTOINMUNIDAD
• Estudio de autoanticuerpos
• Enfermedades autoinmunes sistémicas y
órganoespecíficas
• Técnicas: inmunoensayos (ELISA, WB, IFI)
 Inmunofluorescencia indirecta

Técnica de inmunomarcación utilizando Ac

conjugados con fluorocromos, permite detectar la
presencia de
• Ags unidos a tejidos (inmunohistoquimica)
• Ags unidos a células (inmunocitoquimica)
 Inmunofluorescencia indirecta

Permite detectar • Membrana

Intracelulares • Citoplasmáticos
• Nucleares
Ags celulares • Matriz extracelular
Extracelulares • Membrana basal
Fundamento
Se basa en el uso de Ac conjugados a
un fluorocromo, esta prueba no
necesita de una reacción química
para hacerse evidente ya que se basa
en la fluorescencia

Los fluorocromos emiten luz de

una determinada longitud de onda
luego de ser excitados por un haz
de luz de longitud de onda menor.
Fluorocromos
• Isotiocianato de fluoresceína
(FITC) (490nm-520nm)
• Ficoeritrina (565nm- 575nm)
• Rodamina (552nm- 570nm)

PUEDE DETECTARSE Ag
DIFERENTES EN UN MISMO
CORTE DE TEJIDO O CELULA
Tipos de INMUNOFLUORESCENCIA
Inmunofluorescencia directa

Se utiliza un Ac primario conjugado con el fluorocromo especifico para un

determinado Ag.
Se incuba la muestra con el Ac primario durante un tiempo y a T°
adecuada, se retira el exceso y se procede a observar al microscopio de
fluorescencia
Tipos de INMUNOFLUORESCENCIA
Inmunofluorescencia indirecta

Utiliza un Ac primario sin marcar (muestra) que reconoce al Ag de interés y

luego para evidenciar esta unión se agrega Ac conjugado que reconoce al
Ac primario provocando su fluorescencia bajo el microscopio de
fluorescencia
Patrones de ANA por técnica IFI

D.F. Hernandez Ramırez, J. Cabiedes / Reumatol Clin. 2010;6(3):173–177

Interpretación de patrones ANA (anticuerpos antinucleares)
• Patrón nuclear
Patrón nuclear homogéneo

Antes llamado patrón

difuso, presenta una
fluorescencia homogénea y
regular en todo el
nucleoplasma, cuya
intensidad puede variar
dependiendo de la
concentración del Ac

Encontrado en pacientes con LES, hepatitis autoinmune crónica o artritis

idiopática juvenil
• Patrón nuclear
Patrón nuclear moteado fino
También llamado granular
fino, pequeñas motas finas
en todo el
nucleoplasma. Los
nucléolos pueden estar
teñidos o no. Las células
mitóticas (metafase,
anafase y telofase) tienen
la masa de cromatina no
teñida

Presente en SjS, LES, lupus eritematoso cutáneo subagudo, lupus

eritematoso neonatal, bloqueo cardíaco congénito, DM, SSc
• Patrón nuclear
Patrón nucleolar homogéneo

Tiene como característica

una tinción intensa de los
nucléolos, mientras que la
placa en metafase no
muestra tinción

Encontrado en pacientes con SSc, síndrome de superposición SSc-

AIM y pacientes con manifestaciones clínicas de otras SARD
• Patrón citoplasmático

Antes llamado
citoplasmático homogéneo
El patrón aparece turbio,
casi homogéneo en todo el
citoplasma

Encontrado en pacientes con LES y síndrome de antisintetasa, enfermedad

pulmonar intersticial, poliartritis, fenómeno de Raynaud.
 Patrones ANA nucleares

Patrón homogéneo
Patrones ANA citoplasmáticos
ANA: diagnóstico difernecial

J. Cabiedes, C.A. Nunez-Alvarez / Reumatol Clin. 2010;6(4):224–230

• ANCA: anticuerpos anti-citoplasma de neutrófilos

R.Kettritz. How anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies activate neutrophils. Clinical and Experimental
Immunology vol. 169:220-228
ANCA: Anti-Neutrophil Cytoplasmic Autoantibodies

Antígenos reconocidos: Antígenos reconocidos:

•PR3 (90%) •MPO (80-90%)
•MPO (2%) •PR3
Raramente:
• BPI A-ANCA o X-ANCA

• Elastasa
• Catepsina G
Vasculitis asociadas a ANCA

(GPA: Granulomatosis con poliangeitis)

(MPA)
IFI: anticuerpos órgano específicos

Pénfigo Hepatitis autoinmune

Anticuerpos anti-desmogleina Anticuerpos anti-músculo liso
(ASMA)
IFI: anticuerpos órgano específicos

Anemia perniciosa
Anticuerpos anti-células parietales
gástricas
ELISA: ensayo inmunoenzimático

D.F. Hernandez Ramırez, J. Cabiedes / Reumatol Clin. 2010;6(3):173–177

Western Blot
 Western Blot - LIA

Antígenos
Perfil ENA
nucleares
extraíbles
Asociación de ENA con enfermedades autoinmunes
Nanoensayo luminométrico múltiple (NALIA)
Nanoensayo luminométrico múltiple (NALIA)

D.F. Hernandez Ramırez, J. Cabiedes / Reumatol Clin. 2010;6(3):173–177