Está en la página 1de 8

“CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA”

M.C: Elva Beatriz Díaz Duarte

INTEGRANTES
Daisy Guadalupe García Morales
Iván Leonardo Guerrero Contreras
Armida Arely Hinojos Hernández
Kenia Daniela Pardo Pavía
Frida Fernanda Ruiz Orozco
Nallely Guadalupe Sáenz Cordero
Celeste Yahaira Sánchez Villela
Fernanda Joselyn Zapien Cano

4º”C”
Fecha: 18 de mayo de 2017

Hgo. Del Parral Chihuahua

INDICE
¿Qué es cromatografía?..............................................................................................3

1
Análisis químico con métodos cromatográficas………………………………………….3

¿Qué es cromatografía de capa fina?.........................................................................3

¿Para qué se utiliza?...................................................................................................4

Adsorbentes y eluyentes……………………………………………………………………4

Eluyentes más comunes para cromatografía de capa fina…………..…………………4

Reveladores más comunes para cromatografía de capa fina………………………….5

Revelado de las placas……………………………………………………………………..6

Preparación de cromatoplacas y capilares……………………………………………….7

Actividad……………………………………………………………………………………...8

Bibliografía……………………………………………………………………………………9

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA


¿Qué es cromatografía?
La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más
compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la

2
otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la
naturaleza de las dos fases involucradas: sólido líquido (capa fina, papel o
columna), liquido líquido y gases-liquido (fase vapor).
Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes
de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa,
que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra,
denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la
estacionaria puede ser un sólido o un líquido.
Análisis químico con métodos cromatográficos
La cromatografía es actualmente el principal método utilizado para la separación de
mezclas de especies químicas estrechamente relacionadas entre sí. Se puede
emplear para identificación cualitativa y determinación cuantitativa de las especies
separadas.
Análisis cualitativo: el parámetro que puede usarse con fines cualitativos en
cromatografía es el tiempo de retención. Este es característico de cada componente
en cada sistema cromatográfico. Se trata sin embargo de una información pobre si
se compara con otras técnicas de identificación (ej: espectroscópicas). Únicamente
con el tiempo de retención resulta difícil asegurar la presencia de un componente en
una mezcla, aunque si se puede afirmar la ausencia. La identificación requiere
siempre el uso de patrones en las mismas condiciones cromatográficas.
Análisis cuantitativo: se basa en la comparación del área o altura de pico del
componente de interés con la de estándares de esta sustancia de concentración
conocida, admitiendo que existe una relación lineal entre el área o altura de pico y la
concentración en un determinado intervalo de concentraciones. En los análisis
basados en altura de pico se requiere que la anchura de los picos no sufra
modificación durante el tiempo necesario para obtener los cromatogramas de la
muestra y los estándares para obtener resultados exactos. Por ello suele usarse
mucho más el análisis basado en área de pico, parámetro independiente de los
efectos de ensanchamiento.
¿Qué es cromatografía de capa fina?
La cromatografía de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar
moléculas relativamente pequeñas. En la biología celular se utiliza frecuentemente
para separar azúcares simples, lípidos, aminoácidos, nucleótidos, metabolitos, y
ocacionalmente para separar cadenas cortas de polipéptidos y ácidos nucleicos. Al
igual que otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase móvil y
el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o
se moverá con la fase móvil, viajando una distancia que es inversamente
proporcional a la afinidad por la fase estacionaria.
Para que se utiliza
‐ Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así́, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de purificación.

3
‐ Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas.
Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
‐ Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar como desaparecen
los reactivos y como aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cuándo la reacción ha acabado.
Adsorbentes y eluyentes
-Eluyente.- Es la sustancia que se añade a una columna cromatográfica para hacer
correr nuestro producto de interés.
-Adsorbente.- Es un sólido que tiene la capacidad de retener sobre su superficie un
componente presente en corrientes líquidas o gaseosas.
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) más ampliamente utilizados son la gel de
sílice (SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. La alúmina anhidra es el
más activo de los dos, es decir, es el que retiene con más fuerza a los compuestos;
por ello se utiliza para separar compuestos relativamente apolares (hidrocarburos,
haluros de alquilo, éteres, aldehídos y cetonas). El gel de sílice, por el contrario, se
utiliza para separar sustancias más polares (alcoholes, aminas, ácidos carboxílicos).
El proceso de adsorción se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo‐
dipolo o enlaces de hidrógeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe
ser inerte con las sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones
de descomposición. El adsorbente interacciona con las sustancias mediante
interacción dipolo‐dipolo o mediante enlace de hidrógeno si lo presentan.
El orden de elución de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la
fase móvil o eluyente. Este puede ser un disolvente único o dos miscibles de distinta
polaridad.
Eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina
-Éter de petróleo
-Cloruro de metileno
-n-hexano
-Acetato de etilo
-Ciclohexano
-Acetona
–Tolueno
-Iso-propanol
-Dietil-éter
-Etanol
-t-butil-éter

4
-Metanol
-Cloroformo
-Ácido acético
En general, estos disolventes se caracterizan por tener bajos puntos de ebullición y
viscosidad, lo que les permite moverse con rapidez. Raramente se emplea un
disolvente más polar que el metanol. Usualmente se emplea una mezcla de dos
disolventes en proporción variable; la polaridad de la mezcla será el valor
promediado en función de la cantidad de cada disolvente empleada. El eluyente
idóneo para cada caso ha de encontrarse por "el método del ensayo y del error".
Para la selección del adsorbente deber tomar las siguientes consideraciones:
a) Polaridad
b) Tamaño de partícula
c) Diámetro
d) Área Superficial
e) Homogeneidad
f) Pureza
Reveladores más comunes para cromatografía en capa fina
Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras
pueden revelarse mediante:
a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase
estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a ó F366), el número
que aparece como subíndice nos indica Ia longitud de onda de excitación del
indicador utilizado
b) La introducción de la placa en vapores de yodo c) El rocío con una solución de
agualH2SOa 1:1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una
campana de extracción de gases). Después calentar intensamente, por ejemplo, con
un mechero. Hasta carbonizar los compuestos
Factores que influyen en una separación por cromatografía de capa fina.
a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la fase
estacionaria.
b) La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.
c) Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o agentes
plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas deben limpiarse
corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y después dejar secar
completamente antes de aplicar la muestra.
d) Pureza de los disolventes.

5
Revelado de las placas
La mayor parte de las placas de cromatografía llevan un indicador fluorescente que
permite la visualización de los compuestos activos a la luz ultravioleta (254 nm). El
indicador absorbe la luz UV y emite luz visible. La presencia de un compuesto activo
en el UV evita que el indicador absorba la luz en la zona en la que se encuentra el
producto, y el resultado es la visualización de una mancha en la placa que indica la
presencia de un compuesto.
En el caso de compuestos que no absorben luz UV, la visualización (o revelado) del
cromatograma requiere utilizar un agente revelador. Este tiene que reaccionar con
los productos adsorbidos proporcionando compuestos coloreados.
Preparación de cromatoplacas y capilares
Se pueden utilizar cromatofolios ya preparados (comerciales), o bien, preparar las
cromatoplacas en el laboratorio. Para preparar las cromatoplacas, se introducen dos
portaobjetos juntos, limpios y secos, en una suspensión de gel de sílice al 35% en
acetato de etilo, se dejan secar al aire y se separan con cuidado. Se preparan 6
cromatoplacas y se ordenan sobre una hoja de papel. Para aplicar las soluciones a
las cromatoplacas utilice capilares, que previamente deber ser estirados en la flama
del mechero (flama pequeña), con el fin de que tengan el diámetro adecuado (ver
Figura l) Para mayor claridad de los resultados, incluya en su informe los dibujos de
las cromatoplacas a tamaño natural de todos los experimentos de esta sesión.

ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
“La ruleta”

6
Este juego consiste en una ruleta con una serie de colores que a su vez contienen
una pregunta con relación al tema. El participante girara la ruleta y en donde apunte
la flecha será la pregunta que deberá contestar correctamente. Si acierta en la
respuesta se les otorgara un pequeño premio, por el contrario, si fallan se
someterán a una descarga eléctrica.

BIBLIOGRAFIA
https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/guion-p6.pdf

7
http://organica1.org/1311/1311_6.pdf
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/6.-CROMATOGRAFIA_26249.pdf
https://es.slideshare.net/yerga/cromatografia-de-capa-fina

También podría gustarte