WESTERN BLOT

Presentado por:
Diana Milena Rico Martinez
Paula Busa
https://tse1.mm.bing.net
 WESTERN BLOT
El Western blot, o inmunoblot, es una
técnica analítica usada para detectar
proteínas específicas en una muestra
determinada.
Mediante una electroforesis en gel se
separan las proteínas.
Las proteínas son transferidas desde el gel
a la membrana electroforéticamente.

https://advansta.com/wp-
 TIPOS DE WESTERN BLOT
Se habla de tipos de
western blot según el tipo
de detección de las
proteínas.

DIRECTO: El anticuerpo
primario marcado (con una
enzima) se une al antígeno
de la membrana y
reacciona con el sustrato
originando una señal
detectable.
https://image.slidesharecdn.
 INDIRECTO: El anticuerpo
primario sin marcar reacciona
con el antígeno. Luego se añade
un anticuerpo secundario
marcado contra el anticuerpo
primario (se une ) y reacciona
con el sustrato.

https://image.slidesharecdn
 DIAGNÓSTICO
http://slideplayer.es/1128565
* Determina presencia o ausencia , niveles
y tamaño de una proteína concreta en
una muestra.
* Prueba confirmatoria de VIH cuando el
ELISA da un resultado positivo
* Enfermedades inflamatorias
* Enfermedades infecto-contagiosas
* Factores de crecimiento
* Proteínas de secreción
* Perfil de citoquinas en modelos
experimentales
 TECNICAS RELACIONADAS
(Unblot In-Gel Detection )
DETECCION EN EL PROPIO GEL
En los últimos años se ha
desarrollado la posibilidad de
realizar la detección de las
proteínas dentro del propio gel sin
perdida de sensibilidad; Este
técnica elimina la necesidad de
realizar los pasos de transferencia
y bloqueo ,además, permite la
detección de proteínas que no se
transfieren con eficiencia desde el
gel a la membrana y evita las
perdidas de proteínas durante el
propio paso de transferencia.
Far-Western blot detection
Esta técnica utiliza una proteína
marcada en lugar de un anticuerpo
como sonda en la membrana ,la cual
reconoce y se une a las proteínas de
la membrana a través de
interacciones proteína–proteína, por
lo que si se genera señal en la
membrana, indica la presencia de
una proteína que posee el peso
molecular correspondiente a la banda
donde se observa la señal.
 REFERENCIAS
* https://www.creative-diagnostics.com/images/
Western-blot-experimental-steps.jpg
* https://advansta.com/wp-content/uploads/2016/10/
Film_IMG_0089_auto_adj_crop.png
* https://es.slideshare.net/tratamiento1/fundamento-y-
procedi
* http://www.onlinebiologynotes.com/wp-content/
uploads/2017/12/western-blotting-feature-678x381.jpg
miento-de-las-pruebas-de-western-blot
* http://slideplayer.es/1128565/3/images/5/Diagnostico
* https://tse1.mm.bing.net/th?
id=OIP.r6oafhCINtEZ2cZG8EB5CwHaEA&pid=15.
1&P=0&w=291&h=158