PROTOCOLO DE CURVA DE CRECIMIENTO DE MICROBIANO

CIUDAD Y FECHA: HORA INICIO: HORA FIN:

BOGOTÁ 26 DE MARZO DE 2022 8:00 am 5:00 pm

LUGAR: DIRECCIÓN GENERAL / REGIONAL / CENTRO

SENA Tecnoparque

Nombre del procedimiento: CURVA DE CRECIMIENTO DE MICROBIANO

Objetivo: conocer el número de microorganismos presentes en el medio líquido.

Principio del Método:

La reproducción bacteriana ocurre mediante la fisión binaria, en la que una célula bacteriana se divide y
se convierte en dos células. El tiempo necesario para la división celular se conoce como la generación
de medio tiempo o tiempo de duplicación, que es el tiempo necesario para el número de células a doble.

Para entender y definir el crecimiento de microorganismos particulares, se colocan en un matraz, donde

se controlan el suministro de nutrientes y condiciones ambientales. Si el medio líquido proporciona
todos los nutrientes necesarios para el crecimiento y parámetros ambientales propicios para el
crecimiento, el aumento de números puede medirse como una función del tiempo para obtener una
curva de crecimiento. En este proceso se observan varias fases de crecimiento distintas dentro de una
curva de crecimiento. Se trata de la fase lag, la exponencial o fase logarítmica, fase estacionaria y la
fase de muerte, cada uno de los cuales se asocian con cambios fisiológicos específicos.

● Fase lag: Crecimiento lento o falta de crecimiento debido a la adaptación fisiológica de las
células a condiciones de cultivo o dilución de exoenzimas debido a la densidad celular inicial de
baja.
● Exponencial o fase logarítmica: Tasas de crecimiento óptimo, donde los números de
crecimiento celular son dobles en intervalos de tiempo discretos conocidos como el tiempo de
generación malo.
● Fase estacionaria: Crecimiento (división celular) y la muerte de las células de contrapeso entre
sí dando por resultado ningún aumento neto en número de células. La tasa de crecimiento
reducida es generalmente debido a una falta de nutrientes o acumulación de constituyentes de G
D
residuos tóxicos. -
● Fase de muerte: Tasa de mortalidad supera la tasa de crecimiento lo que resulta en una pérdida F-
neta de células viables. 0
0
7
V.
Hay diferentes maneras de medir el crecimiento en un medio líquido, incluyendo mediciones de
turbidez con un espectrofotómetro colorimétrico, estas se basan en el hecho de que con una mayor
presencia de células el medio será mas turbio. También se puede realizar mediante diluciones seriadas.

DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO

DIAGRAMA DEL PROCEDIMIENTO:
Las mediciones de absorbancia se realizan en distintos intervalos de tiempo, así se conoce el nivel de
turbidez y de esta manera la fase de crecimiento en el que se encuentran los microorganismos. Para
relacionar la transmitancia con la densidad bacteriana se requiere hacer curvas de patrón de densidad
conocidas.
En caso de ser un conteo de células viables se realiza un conteo en medio sólido, por lo que se siembra
una cantidad conocida de la suspensión cuyo numero se desea conocer. En un medio solido cada bacteria
se multiplicará formando una colonia visible a simple vista que puede ser contada.

Por ejemplo, basado en el concepto que una célula se divide dando dos células hijas, y éstas a su vez
se vuelven a dividir dando dos células cada una de ellas, se presenta en el siguiente cuadro la
proliferación de una población de células a partir de una sola, con un tiempo de generación de 30
minutos.

Tiempo N° de Log 10
(horas) células (N° de células)
0 1 0
0,5 2 0.301
1 4 0.602
1,5 8 0.903
2 16 1.204
2,5 32 1.505
3 64 1.806
3,5 128 2.107
4 256 2.408
4,5 512 2.709
5 1024 3.010

Como se observa en la gráfica la curva aumenta su pendiente. Frecuentemente es útil transformar los
datos de número de células a su logaritmo decimal (ó graficar el número de células versus el tiempo
transcurrido en una gráfica semilogarítmica). Se obtiene así una gráfica en la que la relación es lineal.
Ésta última gráfica permite fácilmente encontrar el tiempo de duplicación para la población estudiada.

Julio 30 EDT COVID 19 SENA

COMPROMISOS
ACTIVIDAD RESPONSABLE FECHA
 REGISTRO DE ASISTENCIA DEL ACTA No- DEL DÍA________ DEL MES DE_____________ DEL AÑO 20

OBJETIV
O (S)
TIPO DE VINCULACIÓN
N CÉ
EMPRESA/ CELULAR/EXT.
o NOMBRES Y APELLIDOS DU PLA
NTA CONTRATI
STA CORREO ELECTRÓNICO FIRMA
DEPENDENCIA SENA
. LA

G
D-
F-
0
0
7
V.
G
D-
F-
0
0
7
V.