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Técnicas de Inmunoprecipitación
Técnicas de Inmunoprecipitación
inmunoprecipitación
Las técnicas de Inmunoprecipitación, es un
inmunoensayo comúnmente utilizado para
estudiar proteínas en solución, mediante el uso de
anticuerpos con alta afinidad por las mismas.
Objetivo
La purificación y el aislamiento de una proteína especifica
utilizando un anticuerpo contra esa proteína.
Una de las ventajas es que no desnaturaliza las proteínas
antes de que se produzca la unión del antígeno con el
autoanticuerpo.
Factores clave en IP
Muestra: En la hora de obtener el antígeno a partir
dde células o tejidos, es preciso utilizar un buffer de
lisado adecuado que incluya inhibidores de
proteasas, asi como un desincrustante
Enfermedades (¿qué?)
Se utiliza para detectar enfermedades ampollosas, para
detectar autoanticuerpos dirigidos a proteínas epidérmicas
en el pénfigo vulgar, foliáceo y pénfigo paraneoplásico.
Etapas
1- Radiomarcadores de una proteína celular.
2- Extracción de la proteína de tejido.
3- Incubación de la proteína radiomarcada con los autoanticuerpos.
4- Precipitación del complejo antígeno-anticuerpo con la ayuda de proteínas
A o G.
5- Análisis de las proteínas precipitadas mediante gel de poliacrilaminada y
autoradiografía.