COLORACION DE ZIEHL-NEELSEN

PRINCIPIO DE LA COLORACION

• LA TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN ES UNA COLORACIÓN DIFERENCIAL

ÚTIL PARA DETECTAR BACTERIAS ACIDO-ALCOHOL RESISTENTES
ENTRE ELLAS, LA IDENTIFICACIÓN DE MICOBACTERIAS, AUNQUE NO
PERMITE LA DIFERENCIACIÓN DE DISTINTAS ESPECIES. LA
CARACTERÍSTICA DE ÁCIDO-RESISTENCIA DE ESTOS
MICROORGANISMOS HACE DE ESTA COLORACIÓN UN MÉTODO
RÁPIDO EN EL DIAGNÓSTICO, PRESUNTIVO, DE INFECCIÓN
MICOBACTERIANA. LAS MICOBACTERIAS SON COLOREADAS DE
ROJO POR LA FUCSINA Y RETIENEN EL COLOR A PESAR DE LA
ACCIÓN DEL ÁCIDO Y DEL ALCOHOL.
 QUE ES TUBERCULOSIS ?
• ES UNA INFECCION BACTERIANA • SE TRANSMITE DE PERSONA A
CONTAGIOSA QUE COMPROMETE PERSONA PORMEDIO DEL AIRE
PRINCIPALMENTE A LOS PULMONES, • SINTOMAS:
PERO PUEDE PROPAGARSE A OTROS
ORGANOS. -TOS

• CAUSADA POR LA BACTERIA: -FIEBRE

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, O -SUDORES NOCTURNOS

BACILO DE KOCH -PERDIDA DEPESO
 PARA QUE SIRVE Y QUE COLOREA?

• ESTA TÉCNICA ES UN TIPO DE COLORACIÓN DIFERENCIAL, LO QUE IMPLICA EL USO

DE DISTINTOS COLORANTES CON LA FINALIDAD DE CREAR CONTRASTE ENTRE LAS
ESTRUCTURAS QUE SE DESEAN OBSERVAR, DIFERENCIAR Y POSTERIORMENTE
IDENTIFICAR. LA TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN SIRVE PARA IDENTIFICA CIERTOS
TIPOS DE MICROORGANISMOS ALGUNOS DE ESTOS MICROORGANISMOS SON
MICO BACTERIAS (POR EJEMPLO, MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS), NOCARDIAS
(POR EJEMPLO, NOCARDIA SP.) Y ALGUNOS PARÁSITOS UNICELULARES (POR
EJEMPLO, CRYPTOSPORIDIUM PARVUM).
 COMO SE VEN LOS ELEMENTOS
COLOREADOS?

PUEDEN OBSERVARSE BACTERIAS ACIDO RESISTENTES (MICOBACTERIAS Y ALGUNO

ACTINOMICETOS RELACIONADOS), ES DECIR AQUELLAS BACTERIAS CAPACES DE
RESISTIR LA DECOLORACIÓN CON ALCOHOL ACIDO, LAS CUALES ADQUIEREN UN
COLOR ROJIZO EN TANTO QUE LAS OTRAS CÉLULAS RECIBEN EL COLOR DEL
SEGUNDO COLORANTE.
 EN QUE CLASE DE MUESTRA SEPUEDE
EMPLEAR ?

LA BACILOSCOPIA ES UNA PRUEBA QUE SE UTILIZA PARA DETECTAR LA PRESENCIA

DE BACILOS EN UNA MUESTRA DETERMINADA. LAS MUESTRAS QUE PUEDEN SER
FUNCIONALES PARA ESTE ANÁLISIS SON: ESPUTO LAVADOS BRONQUIALES JUGO
GÁSTRICO ORINA LÍQUIDOS.
 MATERIALES NECESARIOS PARA EL
PROCEDIMIENTO

1.PORTAOBJETOS 6.OBJETO PARA DESTILAR AGUA

2. GUANTES, PINZAS Y PAÑUELO LIMPIO 7.ACEITE DE INMERCION
Y SECO
8.CONTRA COLORANTE VERDE DE
3. MECHERA MALAQUITA O AZUL DE METILENO
4.VELA U OBJETO PARA MANIPULAR LA 9.FUCSINA FENICADA (COLORANTE)
CANDELA (HISOPO O ANTORCHA)
10.SOLUCION ACIDO – ALCOHOL
5.BANDEJA U RECIPIENTE DONDE SE
11.MICROOSCOPIO
RECOGIO LA MUESTRA
6.OBJETO PARA DESTILAR AGUA
 COLORANTES EMPLEADOS

• COLORANTE PRIMARIO: SE USA CARBOL FUCSINA AL 0,3 % (FILTRADO). ESTE

COLORANTE SE PREPARA A PARTIR DE UNA MEZCLA DE ALCOHOLES: FENOL EN
ETANOL (90 %) O METANOL (95 %), Y EN ESTA MEZCLA SE DISUELVEN 3 GRAMOS DE
FUCSINA BÁSICA. 
• SOLUCIÓN DECOLORANTE: EN ESTE PASO SE PUEDEN EMPLEAR SOLUCIONES DE
ÁCIDO ALCOHOL AL 3 % O ÁCIDO SULFÚRICO AL 25 %.
• COLORANTE SECUNDARIO (CONTRA-COLORANTE): EL COLORANTE MÁS EMPLEADO
PARA REALIZAR EL CONTRASTE EN LAS MUESTRAS SUELE SER EL AZUL DE METILENO
AL 0,3 %. SIN EMBARGO, TAMBIÉN SE PUEDEN EMPLEAR OTROS, COMO EL VERDE
MALAQUITA AL 0,5 %.
 TECNICA PASO A PASO

1.PREPARAR UN FROTIS BACTERIANO 8.LAVAR LA MANCHA

2.SECADO DEL FROTIS  9.CUBRIR EL FROTIS CON COLORANTE
3.CALENTAR LA MUESTRA 10.LAVAR LA MANCHA
4.CUBRIR LA MANCHA 11DRENAR
5.CALENTAR LA MANCHA 12.EXAMINAR EL FROTIS EN EL
6.LAVAR LA MANCHA MICROSCOPIO
13.INTERPRETAR LOS RESULTADOS
7.CUBRIR EL FROTIS CON ALCOHOL
ÁCIDO