MALDI

Carlos Alfonso Medina Olvera| Espectroscopia Aplicada | FES Cuautitlán Campo 1

MALDI = Matrix-Assisted Laser
Desorption/Ionization 
desorción/ionización láser asistida por matriz
Técnica desarrollada en 1987 por el ingeniero japonés Koichi Tanaka.

-Espectros poco intensos que contenían fragmentos de las moléculas analizadas

-Mezcla con una matriz de naturaleza orgánica, la luz del láser era absorbida de forma más
eficiente y los espectros tenían una mayor intensidad con apenas fragmentación. Este método
denominado MALDI-MS
"soft-ionization" ya que permite ionizar biomoléculas, como péptidos y proteínas, sin ruptura
durante el proceso.
IONIZACIÓN POR MALDI

• La muestra se mezcla con la matriz en

exceso sobre una superficie de metal
de tal forma que ambas cocristalizan
cuando se evapora el solvente. Esta
preparación es sometida a pulsos
cortos de láser en alto vacío lo que
provoca que la absorción de energía
por parte de la matriz sea convertida
en energía de excitación y en
transferencia de H+ a la muestra
(ionización) dando lugar,
normalmente, a especies
monocargadas. El área irradiada, de
unas pocas micras, se calienta dando
lugar a la desorción de los iones de
fase sólida a fase gaseosa.
Generalidades
Los pulsos del láser deben ser de energía entre 10 6 y 107 W/,
duración de 1 a 5 ns. Cada muestra se expone a 240 disparos.

Potencial = 1 eV

Ácido 2,5-dihidroxibenzoico (DHB)

Ácido 3,5-dimetoxi-4-hidroxicinámico (Ácido sinapínico)
Ácido alfa-cyano-4-hidroxicinámico (HCCA).
Para analizar péptidos, proteínas, lípidos y oligosacáridos.

La matriz HCCA es usada para la detección de picos de baja masa pudiendo llegar a la detección de iones de 10 kDa. La
matriz DHB también es útil para la detección de picos de baja masa. La matriz ácido sinapínico es usada para la detección
de picos de elevada masa.
De todas las matrices, la HCCA es la más efectiva para proporcionar picos de alta calidad y espectros reproducibles
 Ventajas Desventajas

-Reducción en -No identifica múltiples

tiempo de microorganismos en
respuesta de muestras complejas
bacterias, micro -Falta de perfiles en
bacterias y hongos base de datos
-Identificación -Requiere una cantidad
económica de proteína considerable
-Facilidad de para obtener perfiles
procesamiento fiables(sensibilidad baja)

“…acorta la identificación del microorganismo implicado en 1,45 días, reduce los costes globales del
diagnóstico en un 56,9% y puede llegar a reducir la estancia media 2,5 días, y el coste por paciente en un
40%...”
Departamento de Medicina Preventiva, Salud Pública y Microbiología Médica, Universidad de Salamanca,
Salamanca, España