LABORATORIO DE

HEMATOLOGA
1. Introduccin

2. Reglas de trabajo en el laboratorio de hematologa

3. Material de laboratorio de hematologa

1. Material de vidrio y/o plstico
2. Material ptico
3. Material elctrico

4. Limpieza de material de laboratorio

1. Material de vidrio
2. Material de plstico
3. Material ptico
4. Material elctrico
Rama de la medicina que se
encarga del estudio e
investigacin de la sangre y los
rganos hematopoyticos tanto
sanos como enfermos
 Segn el anlisis a realizar, utilizaremos un tipo distinto de muestra

La sangre utilizada debe ser fresca,

Ejp. Las plaquetas deben estudiarse a partir de sangre fresca ya que de lo contrario

son mas difciles de visualizar y se aglutinan

Hay que evitar toda contaminacin de las muestras,

Se puede alterar las condiciones fsico qumicas de la sangre

El operador deber evitar todo contacto con las muestras,

ya que todas ellas son potencialmente contaminantes

Las muestras hay que manejarlas con gran precaucin ,

ya que los componentes sanguneos son de una gran labilidad

Es de gran importancia la buena rotulacin de las muestra

para evitar la confusin entre ellas

 El tipo de vidrio mas utilizado es el de borosilicato de Na y Al

Alto grado de resistencia trmica

Las marcas comerciales tipo Pyrex, Kimax

Al trabajar con vidrio hay que tener una serie de precauciones:

No someterlos a cambios bruscos de temperatura ni de presin

No aplicar fuerzas sobre llaves etc.
No conservar soluciones concentradas de lcalis en vidrio de
borosilicato, ya que destruyen la calibracin

En los ltimos aos el vidrio ha sido sustituido, en gran parte,

por el plstico, debido fundamentalmente a:

Ventajas:
Su resistencia a la rotura, su bajo peso y precio
Inconvenientes:
Estn hechos de monmeros orgnicos, por lo que pueden ser atacados
por disolventes orgnicos y cidos o bases fuertes.
Erlenmeyer:
Recipiente de forma cnica con boca

cilndrica,

Contiene una escala volumtrica

orientativa.

Se utiliza para contener soluciones

Matraz Aforado:
Recipiente de forma ovalada y fondo plano,

con una boca acabada en un largo y

estrecho tubo cilndrico donde se encuentra
el anillo de enrase.

Se utiliza para hacer mediciones

volumtricas exactas
Matraz de vidrio de
fondo redondeado,
que se usa cuando
queremos calentar
una sustancia de
forma homognea.
 Se utilizan normalmente para transferir un volumen
determinado de lquido.

Las hay de muy diversas capacidades (desde 1 a 50 ml) y

llevan grabadas sobre sus paredes, la capacidad y la
temperatura a la que deben ser utilizadas.

Pipetas aforadas (volumtricas):

Estn diseadas para medir un solo volumen de lquido.
Son tubos largos de vidrio con un ensanchamiento en su parte central
donde generalmente viene indicada su capacidad y temperatura de
uso
Las hay de doble aforo

Pipetas graduadas
Son tubos de vidrio de seccin uniforme que terminan en una punta
fina y tienen grabada en las paredes de cristal una graduacin que
divide su volumen total en mililitro y en dcimas o centsimas de
mililitro, segn la capacidad de las mismas
Utensilios de goma o
plstico que se usan
para succionar lquidos,
y permiten dosificarlos.
Pera de goma con 3 vlvulas.

Vlvula A: expulsin de aire

Vlvula S: aspiracin de
lquido

Vlvula E: vaciado de lquido

 El aspirador lleva rueda
de carga y vlvula de
vaciado
A: VACO

E: EMPUJE
S: SUCCIN
 Micropipetas :

Son pipetas que se

utilizan para transferir
cantidades muy pequeas
de lquidos
(entre 1 y 500 microlitros).

Las mas utilizadas

actualmente son
automticas con las
puntas desechable
Pipeta de Shali:
Shali

Est diseada para determinar la

cantidad de hemoglobina.

Esta graduada.

Pipeta Westergreen:
Westergreen

Para la sedimentacin de sangre

Pipeta Pasteur:
Pipetas Pasteur desechables
Pasteur

Puede ser de cristal o de

plstico

No calibrada pero si graduada

que se utiliza apretando la Pipetas Pasteur de cristal

boquilla de arriba

Pipeta de Thoma:
Thoma

Pipeta graduada de cristal para

contar glbulos Pipetas Pde Thoma
Son tubos cilndricos
calibrados con una base de
apoyo. Se utilizan para medir
volmenes que requieren
poca precisin
Sirven para suministrar
repetidamente un volumen
determinado de un reactivo
o diluyente, a una solucin
 Son recipientes
cilndricos anchos, con
calibracin volumtrica
aproximada.

Estn provistos de un
pico que sirve para
verter fcilmente los
lquidos
Para transferir
slidos o lquidos a
recipientes
Recipientes cilndricos que sirven
para contener las muestra a utilizar
en el proceso analtico.

Los hay de tres tipos:

Tubos de ensayo: son de mas de

7 mm de dimetro

Tubos de hemlisis: tienen 7 mm

de dimetro y una longitud de 5 a
10 cm.
Los utilizados en la VSG tienen dos
enrases a 0,4 y 2 ml

Tubos de centrfuga: son mas

resistentes que los anteriores y
pueden tener el fondo esfrico o
cnico
 Es el tubo de
microcentrfuga

Es un pequeo tubo de
base cnica de
aproximadamente 1,5 ml
de capacidad, que se
emplea para almacenar
pequeas cantidades de
lquido
Podemos utilizar diferentes
tubos, los cuales son utilizados
para diferentes pruebas ya que
contiene un anticoagulante
distinto. Entre los ms
comunes podemos encontrar:
 Aparato destinado a
medir la
temperatura.

En l cada grado
est subdividido en
dcimas de grado.
Se utilizan generalmente
par contener agua
destilada. Suelen tener
distintas capacidades
(500-1000ml)
 Esptulas y cucharillas

Para agitar las Esptulas: Se utilizan

disoluciones.
para coger de los
frascos las cantidades
Nunca deben de ser
huecas que necesitamos de los
productos.
 Recipiente de cristal
o cermica, que sirve
para machacar o
moler los slidos que
se quieren reducir a
pasta o polvo.
Tubos de goma:
Se usan en
montajes
Son cubetas de distintas
formas y tamaos que
se utilizan para recoger
los restos de las
tinciones.
 Son dos barras paralelas unidas por sus
extremos.

Se utilizan como soporte de portaobjetos

una vez acopladas sobre el cristalizador
 Utilizadas en el
banco de sangre para
la recogida de los
distintos
componentes de la
sangre
 Soportes para tubos
de ensayo
 Pequea lmina de vidrio
rectangular, donde se coloca
la muestra para ser
examinada al microscopio.

Existen portas excavados que

poseen una cavidad
semiesfrica de distinto
dimetro de profundidad, que
se utilizan para tcnicas de
observacin in vivo
 Fina lmina de vidrio de
unos 0,17 mm de espesor
que se recubren las
muestras que se quieren
examinar al microscopio.

Los mas corrientes son de

18x18mm
22x22 mm
22x32 mm
Son los recipientes
utilizados como
contenedores de
muestras en las
distintas tcnicas:
Tincin
Espectrofotometra
 Dispositivos destinados a
la medida de la masa de
sustancias. Pueden ser:

Granatarios: tienen una

precisin comprendida
entre 10 mg y 1 mg

Balanzas de precisin:
generalmente son
monoplano y de lectura
electrnica. Tienen una
precisin de 0,1 mg
Se utiliza para el secado
de los tubos y pipetas,
tras su limpieza
Son cajas cilndricas
que pueden ser
utilizadas en
hematologa como
cmara hmeda
Para la limpieza del
material
Trpode
Soporte metlico para el
calentamiento de recipientes
a la llama

Rejilla con cermica:

Entramado de alambre con
un aislamiento central de
cermica, que evita el
contacto directo de la llama
con el objeto sometido a
calentamiento

Tringulos:
Se utilizan para poder montar
sobre el mechero, diverso
material de vidrio
 Constan de una placa de
vidrio con una excavacin
en forma de H, en la que
llevan grabadas distintos
modelos de cuadrculas,
segn el tipo de cmara.

Se utilizan en el recuento
de clulas
Quemador de gas
con el que se
obtiene una llama
de gran intensidad
calorfica
 Son aparatos que constan de un
dispositivo giratorio donde se
colocan los tubos.

Por accin de la fuerza

centrfuga se separan sus
componentes o fases
(generalmente una slida y una
lquida), en funcin de su
densidad

Se utilizan para separar los

elementos formes de la sangre

Su velocidad y tiempo de giro

son regulables
 Centrfuga de microhematocrito

Se diferencia de la anterior, en que no est

diseada para tubos, sino para capilares.

Consta de una especie de plato horizontal con

unos surcos para colocar los capilares, y permite
aplicar una fuerza centrfuga de 12.000 a 15.000
g. durante un tiempo controlado automaticamente

Lector de microhematocrito
Sirve para leer el valor del hematocrito
Tubos capilares para
determinacin del
microhematocrito
Recipientes destinados a contener
agua, con un sistema calefactor
termostatizado que generalmente
dispone de un agitador mecnico.
Se utilizan para incubar muestra a
temperatura ambiente
 Tambin se denomina
estufa u horno Pasteur

Son estufas de calor seco

que se utilizan para secar
el vidrio y extensiones.
Son dispositivos
mecnicos de agitacin
continua que acogen
bien tubos o matraces.
En ocasiones estn
acoplados con baos
termostatados
 Aparato que tiene la capacidad de
proyectar un haz de luz
monocromtica a travs de una
muestra y medir la cantidad de
luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al
operador realizar dos funciones:

Dar informacin sobre la

naturaleza de la sustancia en la
muestra

Indicar, indirectamente, que

cantidad de la sustancia que nos
interesa, est presente en la
muestra
APARATOS DESTINADOS
AL ESTUDIO DE LOS
TIEMPOS DE
COAGULACIN DE LA
SANGRE
Aparato destinado a obtener agua destilada a
partir de la red de agua.
El dispositivo consiste en la evaporacin del
agua
dicho vapor pasa por un sistema de
refrigeracin que lo condensa pasando a un
colector.
Los hay que tienen un sistema que destila el
agua dos veces, obteniendose agua bidestilada
Son dispositivos que
automticamente
mezclan las muestras
con los reactivos y
efectan las lecturas de
punto final
 UN CONTADOR ELECTRNICO DE CLULAS ES UN
INSTRUMENTO CAPAZ DE CONTAR Y MEDIR
PARTCULAS EN SUSPENSIN.

Se fundamenta en que las clulas son peor conductoras

elctricas que las soluciones en las que estn suspendidas.

El dispositivo de medida consiste en un pequeo orificio, a

travs del cual se hace pasar la sangre diluida.

Dicho orificio tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su

salida

A travs de ese mismo orificio tambin se hace pasar una corriente

elctrica constante

Si el orificio es atravesado solamente por lquido diluyente:

la resistencia elctrica medida es mnima y constante,

Cuando el orificio es atravesado por una clula sangunea

se produce un aumento de la resistencia elctrica y un cambio

de potencial entre los electrodos que es registrado y contado.

El pulso elctrico generado es proporcional al tamao de la

clula
 Instrumento que sirve para la
esterilizacin mediante calor
hmedo
Sirve tanto para slidos como para
lquidos.

Utiliza para ello vapor de agua a alta

presin y temperatura
Las altas presiones evitan que el agua
llegue a ebullicin a pesar de su alta
temperatura.

La esterilizacin se realiza:
121 C,
1 atmosfera de presin
un tiempo superior a 20 min.

El fundamento del autoclave es que

coagulan las protenas de los
microorganismos debido a la mezcla
de la presin y temperatura
Fases del proceso completo de esterilizacin en un autoclave:

Fase de purgado
A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del caldern, se va
produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo salir por la vlvula de
purgado que est abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura
de esterilizacin.

Fase de esterilizacin
Una vez cerrada la vlvula de purgado y alcanzada la temperatura de
esterilizacin previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilizacin.

Fase de descarga.
Terminado el proceso de esterilizacin, deja de funcionar la resistencia
calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin y temperatura del
caldern empiezan a bajar poco a poco
Material de vidrio:

Antes de empezar a limpiarlo, sobre todo si se ha empleado material

corrosivo, hay que vaciarlo y enjugarlo para evitar posibles salpicaduras

Como regla general, en la limpieza de material de vidrio, hay que lavarlo

inmediatamente despus de su utilizacin o bien sumergirlo en una
solucin detergente

Seguidamente se limpia con detergente ayudndonos de escobillas y lo

enjuagamos con agua corriente

Finalmente se enjuaga con agua destilada para evitar el depsito de sales

Se deja secar en escurrideros o en la estufa Pasteur a 70C

Una vez seco se guarda en su lugar

La prueba de que el material de vidrio est perfectamente limpio, se obtiene

si al mojarlo, el agua humedece homogneamente toda la superficie
Material con residuos orgnicos resistentes:

Lo sumergiremos durante 24 horas en

mezcla sulfocrmica

Seguidamente lo enjuagamos con

abundante agua

Procedemos a su limpieza.
Portaobjetos y cubreobjetos

Lavarlos con agua y jabn

Aclararlos con abundante agua caliente
Los desengrasamos
sumergindolos, al menos una hora, en una mezcla de alcohol etlico-ter
etlico 1:1 o simplemente en alcohol
Volver a aclarar los portas
Tomar los portas, tocndolos solamente por los bordes
para evitar que se engrasen

Si no los vamos a usar :

Los guardaremos en un recipiente con cierre hermtico con alcohol
etlico
Pipetas:
Tras su uso:

Sumergir en mezcla sulfocrmica durante 24

horas

Enjuagar posteriormente con agua corriente y

agua destilada
Las pipetas cuentaglbulos***:

Despus de su uso, tienen que lavarse interiormente de la

siguiente manera:

Primero haciendo pasar a travs de ella

agua corriente una vez

Luego, haciendo pasar a travs de ella

agua destilada 3 veces

Y, finalmente, haciendo pasar a travs de ella

acetona o alcohol de 95 otra vez

Tras ello ha de secarse su interior, preferentemente

mediante un secador de aire
Las pipetas cuentaglbulos: otra forma

Despus de su uso, las enjuagaremos con agua destilada

(aspirando 8-10 veces) y

Despus con acetona

otras 8-10 veces,
aspirando aire al final, para que el aire evapore los restos de
acetona.

Al menos una vez a la semana, las pipetas cuentaglbulos

deben permanecer toda la noche:

En mezcla sulfocrmica o leja comercial al 4%,

Para evitar depsitos grasos o proteicos en el interior del capilar

Cmaras cuentaglbulos

Hay que manejarlas con mucho cuidado, ya que

se puede rayar la superficie grabada, con lo que
se vuelven inservibles.

Para su limpieza se seguir el protocolo de

limpieza del material de vidrio, exceptuando la
parte cuadriculada, la cual limpiaremos:

Enjugar con abundante agua destilada

Limpiar con papel para lentes empapado en alcohol-
ter
El material potencialmente infeccioso:

Antes de proceder a su limpieza, se

desinfectar o esterilizar
Material de plstico

Se limpia igual que el de vidrio, no obstante,

hay que tener en cuenta que puede ser
atacado por disolventes orgnicos y mezcla
sulfocrmica, por lo que no utilizaremos dichas
sustancias
Material ptico:

La parte ptica se limpia cuidadosamente con papel para

lentes, el resto con pao o algodn hmedo

Material elctrico:

Para proceder a su limpieza, debemos cerciorarnos de

que est desenchufado. La limpieza la realizaremos con un
pao hmedo. Para manchas resistentes podremos utilizar
un pao con agua jabonosa o un algodn humedecido en
alcohol. Tras la limpieza hemos de secar perfectamente el
aparato y asegurarnos de que lo colocamos en una posicin
estable