FACULTAD DE TECNOLOGÍA MÉDICA

ESCUELA DE LABORATORIO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA

BACTERIOLOGÍA
Docentes:
Dr. Carlos Benites Azabache Alumno: Espinoza Palomino, Adrian.
Mg. David Lazón Año: 3er Año.

2020
Mg. Cesar Guerrero Barrantes
Hidrólisis del
hipurato sódico
Determina la capacidad que
tienen los estreptococos del
grupo B, así como otras
bacterias, de hidrolizar
enzimáticamente el hipurato
sódico y como indicador de la
reacción se utiliza ninhidrina.
 Streptococus agalactiae
Composicion:
Streptococus beta
hemolítico del grupo
B
Hipuricasa:
 Enzima hidrolasa
 Actividad:
 Hidroliza el hipurato
sódico en ácido benzoico y
glicina.  Neuraminidasa
 Proteasa
 Hialuronidasa
 Hipuricasa
Fundamento:
 Esta prueba se basa en la actividad Benzoglic
hidrolasa que tiene la enzima ina
(hipuricasa), que desdobla al Hipuricas
hipurato (benzoglicina) en acido a
benzoico y glicina.
 Esta técnica es muy eficaz para
estreptococos beta hemolíticos del
grupo B (EGB) con un 95%.
 Con el método clásico se detecta el
acido benzoico y con el rápido la
glicina. Glicina Acido
benzoico
 Método Método
clásico rápido

Streptococus Streptococus Streptococus Streptococus

agalactiae pyogenes agalactiae pyogenes

 INDICADOR: al 12%. INDICADOR: Ninhidrina al 3.5%

RESULTADOS:
Se observa la presencia de un precipitado marrón
persistente por formación de un complejo
coloreado del hierro con el acido benzoico que no
se disuelve por agitación durante 10 minutos.
RESULTADOS
Prueba (+): Solución color purpura
Prueba (-): Solución incolora.
Materiales:
  Placa de Petri.
Agar Infusión Cerebro Corazón (Agar
ICC/BHI).
Pipeta Pasteur.
Microorganismo problema.
Hipurato sódico (benzoglicina).
al 12% o Ninhidrina al 3.5%.
Control de calidad:
 Streptococus pyogenes (-), método
rápido.
Asa de siembra de platino
Mechero bunsen
Estufa de cultivo.
 Método
clásico
 PROCEDMIENTO:
 Se utiliza un caldo infusión de corazón de
pH 7.4 o mejor un caldo Todd & Hewitt
con hipurato de sodio al 1%.
 Se inocula con el microorganismo a
ensayar y se incuba durante 48 horas a
37°C.
 Se revela con al 12%.
RESULTADOS:
Se observa la presencia de un precipitado
marrón persistente por formación de un
complejo coloreado del hierro con el acido
benzoico que no se disuelve por agitación
durante 10 minutos.
Método
rápido
PROCEDIMIENTO:
 Se prepara una solución con 0.25 g de
hipurato de sodio en 25 mL de agua
destilada.
 Se esteriliza por filtración.
 Se agrega un inoculo denso del
microorganismo a 0.5 mL de la solución.
 Se inocula a 35°- 37 °C durante una hora, se
le agregan dos gotas del revelador
(ninhidrina al 3.5% en butanol cetona 1.1).
 Se vuelve a poner en estufa durante quince
minutos exactos y se efectúa la lectura final.
RESULTADOS
Prueba (+): Solución color purpura
Prueba (-): Solución incolora.
 STREPTOCOC STAPHHYLOC
US (-)
Catalasa OCUS
Catalasa (+)

Alfa - Beta -
hemolíticos hemolíticos

S. pneumoniae otros S. pyogenes Streptococus del

Optoquín (+) Optoquín (-) Bacitracina (+) grupo B(-)
Bacitracina

IMPORTAN S. agalactiae Otros

CIA Hipurato sódico (+) Hipurato sódico (-)